Лабораторная диагностика вирусных гепатитов. Диагностика лабораторная вирусных гепатитов


Лабораторная диагностика вирусных гепатитов

В настоящее время в категории вирусных гепатитов рассматривается 7 амостоятельных нозологических форм: гепатиты А, В, С, D, E, F, G. По путям передачи вирусные гепатиты делят на:

1. Энтеральные, передающиеся фекально-оральным путём. К ним отно­сятся гепатиты А, Е и, очевидно, F.

2. Парентеральные, передающиеся через парентеральные манипуляции, включая, в естественных условиях, трансплацентарный и половой пути переда­чи. К ним относятся гепатиты В, С, D, G.

Наибольшее распространение получили гепатиты А, В, С, сравнительная характеристика которых представлена в табл. 3.

Таблица 3

Сравнительная характеристика вирусных гепатитов а, в, с

Признак

Гепатит А

Гепатит В

Гепатит С

Вирус (семейство)

Picomaviridae

Hepadnaviridae

Flaviviridae

Тип нуклеиновой кислоты

однонитчатая +РНК

двунитчатая ДНК с однонитчатым участком

однонитчатая +РНК

Размер вириона

27-32 нм

42-45 нм

30-60 нм

Суперкапсид

отсутствует

имеется

имеется

Путь заражения

фекально-оральный

парентеральный

парентеральный

Инкубационный период

в среднем 25-30 дней

в среднем 60-90 дней, может быть до 6 месяцев

в среднем 35-70 дней

Возрастные группы

преимущественно дети до 1 5 лет

дети и взрослые

дети и взрослые

Сезонность

чаше август-сентябрь

в течение всего года

в течение всего гоги

Переход в хрониче­скую форму

отсутствует

имеет место

имеет место в

50 % случаев

Носительство

отсутствует

длительное

длительное

Онкогенность

отсутствует

имеет место

имеет место

I. Гепатит А (гА). Лабораторная диагностика гА основывается либо на выявлении самого возбудителя (метод иммунной электронной микроскопии - ИЭМ), его антигенов (радиоиммунный, иммуноферментный, иммунофлюорес-центный метод - РИА, ИФА, ИФ) или антител к вирусу гА (РИА, ИФА).

Для ранней диагностики заболевания, а также выявления источников ин­фекции используется определение антигена вируса гА в фекалиях больных, где он появляется за 7-10 дней до клинических симптомов и в первые дни заболе­вания.

Из определяемых в настоящее время специфических маркёров гА важ­нейшими являются антитела класса Ig M к вирусу гА, которые появляются в сыворотке крови и слюне уже в начале заболевания и сохраняются в течение 3-6 месяцев. Обнаружение антител класса Ig M к вирусу гА однозначно свидетельствует о гепатите А и используется для диагностики заболевания, в том числе и бессимптомных случаев инфекции,и выявления источников инфекции в очагах.

Антитела к вирусу гА класса Ig G выявляются с 3-4-й недели заболевания и сохраняются длительно, что позволяет оценить состояние иммунитета насе­ления, динамику специфического гуморального иммунитета.

Вирус гепатита А в материале от больного можно выявить методом им­мунной электронной микроскопии. В основе метода лежит смешивание суспен­зии вируса с антисывороткой, отделение иммунных комплексов и исследование их в электронном микроскопе.

II. Гепатит В (гВ). В организме людей, заражённых вирусом гВ, с разной частотой и на разных этапах могут выявляться серологические маркёры: по­верхностный HBs Ag и сердцевинный НВе Ag, а также антитела к ним (anti-НВс, anti-HBe, anti-HBs). Динамика их появления и интерпретация результатов представлены в табл. 4 и 5.

Таблица 4

studfiles.net

Вирусный гепатит в диагностика лабораторная

ВАЖНО! Для того, что бы сохранить статью в закладки, нажмите: CTRL + D

Задать вопрос ВРАЧУ, и получить БЕСПЛАТНЫЙ ОТВЕТ, Вы можете заполнив на НАШЕМ САЙТЕ специальную форму, по этой ссылке >>>

Диагностика вирусных гепатитов

Диагностика острых и хронических гепатитов обязательно должна носить комплексный характер.

Прежде всего она направлена на определение возбудителя данного заболевания. Также врач обязательно должен оценить степень нарушения работы печени и выявить сопутствующие осложнения. Начальной стадией диагностики является изучения анамнеза и осмотр пациента. После этого специалист назначает другие методы диагностики вирусных гепатитов – лабораторные и инструментальные.

Лабораторная ПЦР-диагностика

В процессе ПЦР-диагностики заболевания определяют маркеры острых и хронических гепатитов. К ним относят следующее:

  1. Маркеры гепатита А. Анти-НАV IgM появляются в крови к окончанию инкубационного периода. В этот момент у человека возникают первые симптомы гепатита. Антитела присутствуют в сыворотке около полугода. Благодаря выявлению данных веществ методом ПЦР можно говорить о текущей или недавно возникшей инфекции.

Анти-НАV-total возникают в сыворотке позже. Они говорят о присутствии HAV-инфекции и последующем формировании иммунитета. Данный показатель, полученный в процессе исследований методом ПЦР, может использоваться для определения эффективности профилактики с помощью вакцин.

  • Маркеры гепатита В. В эту категорию входит НВsAg, который является поверхностным антигеном гепатита В и появляется в завершающей стадии инкубационного периода. Его не удается выявить в 10 % острых случаев заболевания и большинстве хронических.

    Антитела анти-НВs возникают спустя 3-12 месяцев после начала развития патологии. Они присутствуют в организме примерно 5 лет. Ангиген НbcorA не удается определить в сыворотке крови. Его удается выявить лишь в гепатоцитах.

    Анти-Нвcor IgM представляет собой антитела к ядерному антигену, которые характерны для завершения инкубационного периода и начала развития болезни. Определение данных веществ является значимым критерием при проведении ПЦР-диагностики.

    Анти-Нвcor IgG характерны для парентеральных гепатитов во время развернутой клинической картины. Они сохраняются на всю жизнь и свидетельствуют о том, что человек перенес инфекцию. В завершение инкубационного периода можно обнаружить НвeAg. Он сохраняется в течение 10-12 недель и говорит о репликации парентеральных вирусов.

    Анти-Нве представляют собой антитела к HbeAg и возникают во время развернутых проявлений. Данные вещества сохраняются на 5 лет после заболевания. При хронических парентеральных гепатитах их выявляют и по истечении указанного времени.

    Оценка РНК-вируса свидетельствует о его репликации и развитии активного инфекционного процесса. Определение генотипа парентеральных вирусов является критерием прогнозирования протекания и оценки тактики терапии гепатита.

    Также в процессе ПЦР-диагностики обязательно определяется вирусная нагрузка. Она представляет собой критерий активности репликации и оценивается для выбора тактики терапии и определения ее эффективности.

  • Маркеры гепатита D. В этом случае определяются анти-НDV, которые говорят о наличии активной дельта-инфекции. Существует две разновидности заболевания – коинфекция и суперинфекция. Их выявляют и в период обострения, и при хронических формах недуга.

    Маркеры анти-НDV выше при суперинфекции, нежели при коинфекции. Благодаря этому проводится дифференциальная ПЦР-диагностика.

  • Другие показатели

    Помимо ПЦР-диагностики, очень важно оценить количество ферментов печени. Поражение тканей органа сопровождается попаданием в кровь ферментов, что влечет их увеличение в составе плазмы. В нормальном состоянии количество АСАТ составляет 5-35 Ед./л, а АЛАТ – 5-40 Ед./л.

    Лабораторная диагностика вирусных гепатитов должна включать определение плазматической активности щелочной фосфатазы. В случае развития гепатита она увеличивается. В норме данный показатель составляет 30-115 Ед./л.

    Немаловажное значение имеет оценка фракций билирубина – свободного и связанного. Его повышение обусловлено неспособностью клеток печени выводить из организма данный пигмент. В норме концентрация связанного билирубина составляет 0,1-0,3 мг/дл, а свободного – 0,2-0,7 мг/дл.

    Инструментальные исследования

    Чтобы обследовать органы брюшной полости, обычно применяют ультразвуковое исследование. Это достаточно простой метод, который помогает визуализировать увеличение печени и других органов, а также оценить происходящие в них изменения. Также с помощью УЗИ оценивается состояние сосудов. Если же врач планирует сделать пункционную биопсию, данный метод поможет выбрать оптимальное место для прокола.

    С помощью данного аппарата удается увидеть на мониторе определенные сечения внутренних органов. В результате можно визуализировать локальные изменения в них – камни, опухолевые образования и т.д.

    Неправильные результаты можно получить исключительно в том случае, если работа органа нарушается на клеточном уровне. Вследствие этого весь орган поражен. К примеру, при изменении клеток печени удастся обнаружить нарушение оттенка тканей. Однако информацию относительно характера и тяжести болезни получить не удастся.

    В такой ситуации проводится пункционная биопсия. Это наиболее точная методика, которая позволяет получить максимальное количество информации. С помощью данного способа оценивается структура тканей печени, что позволяет наиболее точно диагностировать гепатит.

    Наши читатели рекомендуют

    Наша постоянная читательница порекомендовала действенный метод! Новое открытие! Новосибирские ученые выявили лучшее средство ОТ ГЕПАТИТА. 5 лет исследований. Самостоятельное лечение в домашних условиях! Тщательно ознакомившись с ним, мы решили предложить его и вашему вниманию.

    Особенности диагностики во время беременности

    Гепатит у беременных – очень опасная патология, поскольку она практически всегда провоцирует нарушения в развитии плода. При поражении вирусом типа В практически всегда заражается и ребенок. Наличие гепатита С у беременных провоцирует несколько иную картину. Тем не менее, нельзя сказать, развитие данного заболевания у беременных спровоцирует инфицирование малыша.

    Чтобы провести правильную диагностику, прежде всего нужно сдать анализ крови и провести ПЦР-диагностику. При гепатите В у беременных имеет значение наличие HBsAg и НВеАg. Если они присутствуют, риск заражения ребенка повышается. В такой ситуации также уменьшается эффективность вакцины для беременных.

    Если же будущая мама заболевает гепатитом С, инфицирование ребенка происходишь лишь в 5 % случаев. При этом данный вид заболевания передается от беременных к плоду лишь при условии активного протекания недуга. В большинстве случае ребенок заражается от матери при родах.

    При выявлении вирусного гепатита у беременных обязательно требуется стационарная терапия. Если у женщин развивается цирроз печени, нужно принимать все меры, чтобы беременность и вовсе не наступила. Дополнительные нагрузки на организм, которые возникают у беременных, спровоцируют сильное обострение болезни.

    При хронизации процесса беременность не оказывает влияния на клиническую картину патологии. Иногда у беременных женщин воспаления в печени и вовсе прекращаются. Однако нужно быть готовой к тому, что после родов гепатит резко обострится. Потому так важно держать данный процесс под контролем.

    Особенности дифференциальной диагностики

    Дифференциальная диагностика проводится для того, чтобы отличить вирусный гепатит от острых поражений печени, связанных с воздействием химических веществ. Особенно важно провести диф диагностику алкогольной формы заболевания. На начальном этапе развития этого недуга часто ставят ошибочный диагноз, принимая его за вирусный гепатит. Это происходит в 50 % случаев.

    Чтобы провести диф диагностику этих процессов, нужно учитывать, что алкогольный гепатит развивается исключительно на фоне постоянного употребления большого количества спиртного. Важными критериями диф диагностики в данном случае является следующее:

    • отсутствие или кратковременность преджелтушного этапа;
    • быстрый спад желтухи;
    • преобладание болевого и диспепсического синдромов;
    • развитие лихорадки;
    • высокая плотность печени.

    Также при диф диагностике делают анализ крови. С помощью этого исследования удается выявить лейкоцитоз – довольно часто он составляет более 15-20 тыс. Также наблюдается нейрофилез, который характеризуется сдвигом нейтрофильной формулы влево.

    Немаловажным критерием при диф диагностике являются данные биохимического исследования. Алкогольный гепатит характеризуется билирубинаминотрансферазной диссоциацией.

    В сложных случаях диф диагностика проводится с помощью биопсии печени. При алкогольном гепатите преобладает поражение центральных зон долек. Также диф диагностика показывает ожирение гепатоцитов и нейтрофильную инфильтрацию. В отдельных случаях по результатам диф диагностики удается выявить алкогольный гиалин.

    Своевременно проведенная диагностика вирусных гепатитов позволяет правильно подобрать лечение и не допустить развития опасных осложнений. Она проводится с помощью различных методов – ПЦР, УЗИ и т.д. Немаловажное значение имеет и выполнение диф диагностики. Однако особенно важно проводить исследования у беременных, чтобы не допустить опасных последствий для матери и ребенка.

    Кто сказал, что вылечить ГЕПАТИТ печени невозможно?

    • Много способов перепробовано, но ничего не помогает.
    • И сейчас Вы готовы воспользоваться любой возможностью, которая подарит Вам долгожданное хорошее самочувствие!

    Эффективное средство для лечения печени существует. Перейдите по ссылке и узнайте что рекомендуют врачи!

    Образование: Ростовский Государственный Медицинский Университет (РостГМУ), Кафедра гастроэнтерологии и эндоскопии.

    Источник: http://lechupechen.ru/gepatit/diagnostika-virusnyh-gepatitov/

    ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ВИРУСНЫХ ГЕПАТИТОВ

    А. А. Асратян Институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи РАМН,

    Московская медицинская академия им. И.М.Сеченова

    Основой лабораторной диагностики вирусных гепатитов служат:

    — знания об их возбудителях и репликации

    — информация о появлении и исчезновении маркеров инфицирования

    — современные иммунохимические и молекулярно- биологические методы детекции антигенов, антител и нуклеиновых кислот/

    Лабораторная диагностика гепатита В (ГВ) Строение вириона см. рис. 1.

    Лабораторная диагностика ГВ — основана на выявлении специфических для ГВ антигенов и соответствующих антител в крови, а также вирусных нуклеиновых кислот, основными из которых являются:

    анти-НВс класса Ig М и IgG

    НВе Ag — анти-НВе

    Наиболее широко в диагностике ГВ используется определение НВsAg. Данный антиген выявляется как при остром, так и при хроническом заболевании (однако острая инфекция обычно подтверждается наличием высоких титров анти-НВс IgМ). При остром ГВ поверхностный антиген вируса обнаруживается через 3-5 недель от момента инфицирования, то есть задолго до появления клинических признаков болезни и в этих случаях является единственным серологическим маркером. НВsAg постоянно выявляется в преджелтушном и желтушном периодах болезни. Персистирование НВsAg в течение 6 месяцев и более указывает на затяжное или хроническое течение болезни, и позволяет предположить хроническое носительство вируса. Элиминация НВsAg и появление антител к нему является непременным условием выздоровления. Серологическими маркерами репликации ВГВ являются — анти-НВс класса IgМ, НВеAg, ДНК и ДНК-полимераза, которые обнаруживаются при остром ГВ с первых дней клинических проявлений и могут обнаруживаться при обострении хронического ГВ. Серологические маркеры репликации ВГВ определяют как в целях общей диагностики, так и для оценки эффективности применяемой терапии. НВсAg выявляется в ткани печени и не определяется в сыворотке крови. Опосредовано его присутствие в организме отражают циркулирующие антитела – анти-НВс класса IgМ и IgG. В острый период ГВ наличие анти-НВс класса IgМ является дополнительным маркером этого заболевания. Однако необходимо учитывать, что около 50% больных хроническим ГВ также могут иметь эти антитела в периоде обострения, но чаще в низких концентрациях. Наличие в сыворотке крови только анти-НВс класса IgG наблюдается в период между исчезновением НВsAg и образованием анти-НВs. Сочетанное выявление анти-НВс класса IgG в низком титре с анти-НВs указывает на перенесенную ГВ-инфекцию и наличие иммунитета. Тестирование НВеAg проводят в сыворотках крови только с наличием НВsAg и позитивный результат данного маркера свидетельствует об активном процессе – либо подтверждает диагноз острого ГВ, либо свидетельствует об обострении хронического ГВ. Длительность циркуляции НВеAg имеет важное прогностическое значение: выявление НВеAg через 2 и более месяца после начала заболевания служит признаком возможного развития хронического гепатита. Выявление НВеAg без присутствия НВsAg в сыворотке крови в подавляющем большинстве случаев указывает на ложный результат анализа. Однако больные, инфицированные мутантным вирусом могут оставаться серонегативными по НВеAg, несмотря на сохраняющуюся инфекционность и наличие анти-НВе Наличие ДНК-ВГВ (наиболее чувствительный маркер продолжающейся репликации ВГВ) в сыворотке крови указывает на высокую инфекционность данного образца и активное размножение вируса в организме. Позитивный результат удается зарегистрировать практически у всех больных острым ГВ в разгар заболевания. Снижение его концентрации в процессе лечения хронического гепатита является хорошим прогностическим признаком, указывающим на эффективность применяемой терапии. Высокая активность аминотрансфераз сыворотки отражает воспалительное повреждение ткани печени, вызываемое преимущественно реакциями иммунной системы организма против инфицированных вирусом гепатоцитов, а не прямым цитопатическим действием вируса. Высокий уровень ДНК-ВГВ в сочетании с низким уровнем аминотрансфераз свидетельствует о недостаточном иммунном ответе организма. Выявление анти-НВе при отсутствии НВеAg и ДНК-ВГВ свидетельствует о закончившейся активной репликации инфекции. Сероконверсия НВsAg в анти-НВs происходит у 90-95% больных с острым ГВ в стадии разрешения инфекционного процесса и, является показателем иммунитета к вирусу ГВ, то есть наличие анти-НВs свидетельствует о перенесенной инфекции и наличие иммунитете к этой инфекции. Лица, имеющие эти антитела в защитной концентрации (10 МЕ и более) не болеют ГВ и не нуждаются в вакцинации. Все применяемые методы исследования для определения специфических маркеров ГВ можно разделить на 2 группы – иммунохимический и молекулярно-биологические. Иммунохимические – основное место принадлежит иммуноферментному анализу (ИФА) с его высокой чувствительностью и специфичностью, простотой проведения и стабильностью реактивов. Молекулярно-биологические – точечная и жидкостная гибридизация, а также цепная полимеразная реакция (ПЦР) – позволяет выявлять наличие ДНК-ВГВ непосредственно, либо с помощью определения вирусоспецифического фермента – ДНК- полимеразы. НВ sAg /анти-НВ s Для выявления основного маркера ВГВ, разработаны разнообразные методы, позволяющие определить антиген в концентрации до 0,05 нг/мл, которые подразделяются на так называемые «поколения» (табл. 1). В настоящее время основным методом обнаружения НВsAg является ИФА Важным этапом в развитии лабораторной диагностики вирусных гепатитов в России стали проведение (с 1998 г.) сравнительных испытаний диагностических препаратов для оценки их качества под эгидой МЗ РФ. Современные диагностические препараты обладают высокой специфичностью, но возможны и ложноположительные результаты. Для разграничения ложноположительных от истинно положительных результатов применяется тест нейтрализации НВsAg – специфической сывороткой. Принципиально новым для системы выявления НВsAg стало требование к отечественным производителям диагностических препаратов – обязательное включение в тест-систему слабоположительного контрольного образца, содержащего НВsAg в концентрации 1 нг/мл. Для определения анти- НВsAg был испытан весь спектр иммунохимических методов, основной из которых сейчас – ИФА (для качественного и количественного анализа). Анти-НВс класса Ig М и IgG , НВе Ag – анти-НВе (рис. 2 и табл. 2) Для тестирования этих маркеров могут быть использованы различные варианты твердофазного иммуноанализа: иммуноферментный, радиоиммунный, химиолюминисцентный и их различные варианты. ДНК ВГВ — определяют при помощи проведения ПЦР– анализа. В настоящее время наиболее широкое распространение получили амплификационные методы детекции ДНК ВГВ. Появилась возможность определять ДНК ВГВ в качественном и количественном варианте.

    Лабораторная диагностика гепатита Д (ГД) Вирус гепатита Д (ВГД) – это дефектный вирус, содержащий одно-спиральную РНК, которому для репликации необходимо помощь вируса ГВ для синтеза оболочечных белков, состоящих из HBsAg, который используется для инкапсуляции генома ВГД. ВГД не принадлежит ни к одному из известных семейств вирусов животных, по своим свойствам ВГД наиболее близок к вироидам и сателлитным вирусам растений. Лабораторная диагностика осуществляется путем обнаружения серологических маркеров ВГД, включая наличие антигена, антител к нему и РНК ВГД. Обнаружение антигена ВГД и РНК ВГД в сыворотке крови или ткани печени свидетельствует о наличии активной ГД-инфекции, однако, следует отметить, что эти маркеры могут не обнаруживаться в сыворотке больных фульминантным ГД. Маркером активной репликации ВГД также является анти-ВГД класса IgМ. Серологические маркеры инфекции ГД зависят от того, как был приобретен вирус – в виде коинфекции с ВГВ (у большинства больных заболевание имеет острое течение и заканчивается выздоровлением) или суперинфекции у больных с хронической ГВ-инфекцией (протекает тяжелее, чем коинфекция — в 10% развивается фульминантный гепатит). При коинфекции в большинстве случаев антитела — анти-ВГД класса IgМ и IgG — обнаруживаются в течение заболевания. Титр анти-ВГД обычно снижается до практически неопределяемых уровней после выздоровления, и не сохраняется никаких серологических маркеров того, что человек был когда-либо инфицирован ВГД. Антиген ВГД определяется только у 25% больных и обычно исчезает вместе с исчезновением HВsAg. При суперинфекции у больных с хронической ГВ-инфекцией серологическая картина имеет следующие характерные особенности: – титр HBsAg снижается к моменту появления антигена ВГД в сыворотке; — антиген ВГД и РНК-ВГД продолжают определяться в сыворотке, так как обычно у большинства пациентов с суперинфекцией ГД (70-80%) развивается хроническая инфекция, в отличие от случаев коинфекции; — определяются высокие титры антител (анти-ВГД) как класса IgМ, так и IgG, которые сохраняются неопределенное время. Серологические маркеры вируса ГД определяют методом иммуноферментного и радиоиммунного анализа, а РНК-ВГД — методом полимеразной цепной реакции. Отечественными и зарубежными промышленными биотехнологическими предприятиями выпускаются диагностические наборы, включающие все необходимые компоненты и реактивы для постановки теста. В диагностических препаратах используют дельта-антиген, полученный из печени сурков, экспериментально зараженных ГД; антиген, выделенный из печени погибших носителей ВГД; дельта-антиген, полученный генно-инженерным способом.

    Лабораторная диагностика гепатита С (ГС) Открытие возбудителя ГС стало возможным благодаря методам молекулярной биологии в 1989-1991 гг. Сначала путем клонирования был получен из сыворотки больных с гепатитом “ни-А, ни-В” вирусный геном, а затем был установлена и структура самого вируса. Физико-химическая характеристика вируса позволили отнести ВГС к семейству флавовирусов. Геном вируса ГС (ВГС) представлен однонитчатой позитивной РНК, состоящих из 10 000 нуклеотидных оснований, образующих регионы, которые кодируют три структурных белка (С, Е1, Е2) и пять неструктурных (NS2, NS3, NS4, NS5). Особенностью ВГС является чрезвычайно высокая гетерогенность его генома. Анализ нуклеиновых кислот РНК-ВГС различных изолятов выявил существенные отличия в их первичной структуре. На основании этих данных была построена классификация ВГС, разделяющая их на варианты ( их 6-9) и субтипы- генотипы, одни из которых присутствуют во всех регионах мира, а другие только в отдельных странах. Лабораторная диагностика ГС была решена при помощи современных методов молекулярной биологии, учитывая, что при ГС вирус находится в крайне низкой концентрации и его антигены не доступны выявлению с помощью современных методов индикации, усилия исследователей сосредоточены на выявлении антител к различным антигенным компонентам вируса, обнаружение которых может служить индикатором наличия вируса. В качестве антигенов использовали белки, кодированные структурной и неструктурной зоной РНК-ВГС, полученные при помощи рекомбинантной технологиии или синтеза (полипептиды, используемые в современных иммунологических методах – С22-3; С33с, С100-3, С200, NS5, S-1-1). Лабораторная диагностика ГС основывается на обнаружении серологических маркерв ВГС: антител к вирусу ГС (анти-ВГС, анти-ВГС класса IgМ, IgG) методом ИФА и РНК-ВГС методом ПЦР. К настоящему времени разработаны 4 поколения тест-систем для выявления анти-ВГС в иммуноферментном методе, но ИФА первого поколения сейчас не используется из-за низкой чувствительности. РНК-ВГС является показателем активной репликации ВГС и самым ранним маркером инфекции, и может быть обнаружена методом полимеразной цепной реакции уже через 1- 2 недели после инфицирования, незадолго до повышения уровня сывороточных трансаминаз. Анти-ВГС обнаруживаются к 5-6 неделе после начала гепатита в 80% случаев и к 12 неделе у 90% лиц методом иммуноферментного анализа. При определении анти-ВГС в некоторых случаях регистрируется ложноположительная реакция. Для разграничения ложноположительных образцов от образцов действительно содержащих антитела к ВГС, разработаны дополнительные тесты – рекомбинантный иммуноблотинг, определение спектра белков анти-ВГС. Иммуноблотинговые диагностикумы позволяют исключить неспецифический результат, полученный методом ИФА, однако визуальная оценка иммуноблотинговых полос может быть неоднозначной в разных диагностических центрах. В нашей стране более широкое распространение получили отечественные подтверждающие твердофазные иммуноферментные тест-системы (так называемы системы «Спектр»), основанные на определении антител к отдельным вирусным антигенам: core, NS3, NS4ab, NS5a. Выявление РНК ВГС считается «золотым» стандартом в диагностике ГС и подтверждением положительных результатов обнаружения анти-ВГС. В настоящее время для индикации РНК ВГС используется ПЦР в качественном и количественном варианте. Чувствительность методов определения РНК ВГС повышается с каждым годом, достигая в настоящее время 10-50 копий РНК в 1 мл крови. Диагноз хронического ГС у лиц с наличием анти-ВГС обычно ставится на основании повышенных печеночных проб в течение более 6 месяцев.

    Лабораторная диагностика гепатита А (ГА) Вирус ГА (рис. 3) — это РНК- содержащий вирус, размером 27 нм, классифицированный как пикорнавирус. Во всех изолятах собранных в разных частях мира, наблюдается только один серотип ВГА. ВГА не имеет наружной оболочки, но состоит из наружной белковой капсулы, или капсида, содержащего внутри положительную одноцепочную РНК, который действует в качестве матрицы для выработки вирусных белков внутри клетки-хозяина. Лабораторная диагностика ГА основана на выявлении маркеров вируса ГА – антигена ВГА, антител (анти-ВГА класса IgМ и IgG ), а также РНК ВГА. Окончательным доказательством о текущей или недавней инфекции служит наличие в сыворотке крови (даже в одной пробе сыворотки) антител к ВГА класса IgM (анти-ВГА IgM) и наличие ВГА в фекалиях. На перенесенную инфекцию ГА, а также на длительный иммунитет, указывает наличие антител к ВГА класса IgG (анти-ВГА IgG). Диагноз острого ГА подтверждается в острой или ранней стадии выздоровления при наличии анти-ВГА класса IgM, которые появляются в последние 5-10 дней инкубационного периода и продолжают выявляться на протяжении 6-7 месяцев от начала заболевания. Кроме того, эти антитела могут быть выявлены в первые месяцы у лиц (20-30%), вакцинированных инактивированной вакциной против ГА. Их образование связано с первичным иммунным ответом на введение антигена, а не на инфекцию, вызванную вакциной. РНК ВГА может быть выявлена за несколько дней до повышения активности АлАТ и в течение 5 — 59 дней заболевания при типичном течении ГА; при затяжных случаях — РНК ВГА в среднем может определяться до 95 дней. Антиген вируса ГА (ВГА-Ag) обнаруживается в фекалиях больных за 7-10 дней до проявления клинических симптомов и в первые дни заболевания, что используется также для ранней диагностики и выявления источников возбудителя инфекции. Концентрация ВГА в фекалиях является наивысшей на протяжении 2-х нед. перед появлением желтухи. У взрослых выделение вируса с фекалиями продолжается обычно менее одной недели после появления желтухи. Вирус, однако, был обнаружен также через 2 мес. от начало заболевания (во время обострения). Дети могут выделять вирус более длительно, чем взрослые, возможно в течение нескольких недель после клинического проявления заболевания. Хроническое выделения ВГА из фекалий не отмечается. Определение антигена ВГА нашло также применение в санитарной вирусологии при исследовании воды на наличие вируса. Анти-ВГА класса IgG (рис. 4) также появляются рано в начале заболевания (с 3-4 недели), сохраняются на протяжении всей жизни и обеспечивают пожизненную защиту от этого заболевания. Определение анти-ВГА IgG используется для изучения иммуноструктуры населения, динамики специфического гуморального иммунитета. Определение анти-ВГА класса IgG важно также для пред- и поствакцинального скрининга (минимальная протективная концентрация анти-ВГА соответствует 20 МЕ/л). Для их определения отечественными производителями выпускаются коммерческие диагностические препараты иммуноферментного анализа. Лабораторная диагностика основана на выявлении маркеров вируса ГА с помощью специфических иммунодиагностических методов — методы ИФА, РИА. Отечественными и зарубежными промышленными биотехнологическими предприятиями выпускаются диагностические наборы, включающие все необходимые компоненты и реактивы для постановки теста. Кроме твердофазных ИФА и РИА с успехом применяется и метод иммуноэлектронной микроскопии, метод ПЦР. Все вышеупомянутые методы иммунодиагностики с равной вероятностью выявляют инаппарантные, бессмиптомные или клинически выраженные формы ГА. Особое место в лабораторной диагностике ГА занимают молекулярно-генетические методы тестирования РНК ВГА. ПЦР диагностика позволяет обнаружить РНК ВГА в концентрации 40 копий/мл. В настоящее время происходит накопление данных о месте ПЦР в системе лабораторной диагностики ГА.

    Лабораторная диагностика гепатита Е (ГЕ) Этиологический агент гепатита Е (ГЕ) — это сферический вирус, лишенный внешней оболочки, это односпиральный РНК-вирус размером около 32-34 нм в диаметре. При постановке диагноза ГЕ в каждом отдельном случае необходимо принять во внимание несколько диагностических аргументов: — наличие у больного симптомокомплекса острого, и предположительно инфекционного гепатита, — надежное исключение этиологического участия вирусов ГА и ГВ, основанное на отрицательных результатах серологических тестов — анти-ВГА класса IgM и анти-НВс класса IgM, — тщательный анализ данных эпидемиологического анамнеза, включая указания на недавние выезды в эндемичные регионы, — исследование (по возможности) фекалий больного на присутствие частиц вируса ГЕ методом иммуноэлектронной микроскопии, ПЦР. Существуют диагностические методы, основанные на применении иммунофлюоресцирующих антител (МФА) для определения антигена ВГЕ в фекалиях и иммуноферментного анализа (ИФА) для определения антител к ВГЕ — анти-ВГЕ класса IgM и IgG. Наличие анти-ВГЕ класса IgM с высокой частотой определяются в сыворотках больных ГЕ в острой стадии заболевания и в период ранней реконвалесценции; выявление анти-ВГЕ класса IgG свидетельствуют о перенесенной в прошлом ГЕ — инфекции. Для диагностики ГЕ определяют также РНК ВГЕ. Отечественные фирмы производители диагностических тест-систем для выявления маркеров вирусных гепатитов:

    МОСКВА и область — НИАРМЕДИК — ЭКОлаб — БИОСЕРВИС

    НОВОСИБИРСК — ВЕКТОР БЕСТ — ВЕКТОР МБС ( МЕДИКОБИОЛ.СОЮЗ) — ВЕКТОР БИАЛЬГАМ

    НИЖНИЙ НОВГОРОД — МИКРОГЕН (бывший ИМБИО) — ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ СИСТЕМЫ САНКТ-ПЕТЕРБУРГ — АВИЦЕННА — АКВАПАСТ

    © ООО «Лабораторная диагностика ИНВИТРО» 2004 — 2011

    Источник: http://www.labdiagnostic.ru/docs/hepatit.shtml

    Определение вирусных гепатитов В и С

    Оставьте комментарий 822

    Гепатиты — группа вирусных заболеваний, практически бессимптомно поражающих клетки печени. Ранняя диагностика гепатита С, как более скрытого, позволит вовремя остановить патологический процесс. Диагностика гепатита B и C исключительно важна для определения прогноза на выздоровление и подбора схемы лечения. Для выявления вирусов используют 2 группы методов: лабораторные и инструментальные. Самой эффективной является лабораторная диагностика вирусных гепатитов.

    Почему так важна ранняя диагностика?

    Первые симптомы инфицирования не выражены ярко и не специфичны. Если гепатит В на начальных стадиях может беспокоить больного слабыми симптомами, то форма С долгое время не проявляет себя. Между тем, вирус, находясь в организме, начинает медленно уничтожать печень. Многие люди являются носителями болезни, не подозревая о том, что передают вирус другим.

    Поздняя диагностика гепатита приводит к переходу заболевания в хроническую форму или к необратимым поражениям печени, циррозу и раку.

    Чтобы вовремя заметить в крови вирус, важно периодически проводить исследования людям, которые рискуют заразиться: люди с ВИЧ-положительным статусом, медработники, больные, которым переливают кровь. Обязательно обследование на гепатит С беременным женщинам для исключения возможности инфицирования ребенка.

    Особенности гепатитов

    Стадии и симптомы гепатита В

    Вирусный гепатит В развивается медленно. Всего выделяют 4 фазы заболевания, от которых зависит проявление симптомов. Прогноз на выздоровление благоприятный, реже переходит в хроническую форму. Ухудшение ситуации возможно при сопутствующей патологии печени, одновременном поражении вирусами С, D. Процесс хронизации при отсутствии лечения длится около 10-ти лет.

    • быстрая утомляемость, ухудшение аппетита;
    • возможно небольшое повышение температуры тела;
    • боль в мышцах и суставах;
    • привкус горечи во рту, тошнота, иногда рвота;
    • расстройства стула;
    • печень увеличена и болезненна;
    • тупые боли в животе;
    • темный цвет мочи;
    • кал бесцветный.
    • нарастающая желтушность кожи и склеры глаз;
    • ухудшение общего состояния;
    • появление сыпи на коже.
    • постепенно исчезает желтушность и сопутствующие проявления;
    • восстанавливается аппетит;
    • показатели крови приходят в норму.

    Формы и симптоматика гепатита С

    Болезнь опасна тем, что очень часто протекает бессимптомно, даже на острой стадии симптомы стертые. Большинство больных обращаются к медикам уже с хронической формой. Инкубационный период длится от 2-х недель до 6-ти месяцев. Симптомы зависят от характера протекания заболевания: острого или хронического. Острая фаза может закончиться выздоровлением либо болезнь примет хроническую форму. При отсутствии лечения в течение нескольких лет развивается цирроз или первичный рак печени.

    Гепатит С в отличие от гепатита В в 80―90% переходит в хроническую форму из-за скрытого течения, позднего выявления и начала терапии.

    • температура слегка повышена;
    • боль в крупных суставах;
    • вялость и слабость;
    • иногда рвота и тошнота;
    • тяжесть и боль в правом подреберье;
    • резко темнеет цвет мочи;
    • пожелтение склер;
    • светлый кал.
    • хроническая усталость;
    • цикл сна нарушается;
    • тяжесть и постоянная болезненность в правом подреберье;
    • устойчивое изменение цвета кала и мочи;
    • частые кровотечения из носа;
    • нарушение аппетита, иногда отвращение к пище.

    Методы исследования при диагностике гепатита В и С

    Задача обследования — выявление вируса, определение его вида, активности, степени поражения клеток печени. Только на основании результатов исследования ставят окончательный диагноз, подбирают метод лечения, также используют их для оценки эффективности проводимой терапии. Лабораторная диагностика гепатита проводится методом исследования разных показателей крови.

    Лабораторная диагностика заболевания

    • Иммуноферментный анализ (ИФА). Определяет наличие специфических антигенов и антител в организме. Антитела вырабатываются спустя 3―6 недель после инфицирования и присутствуют еще долгий промежуток времени после выздоровления. Результат говорит лишь о возможном присутствии вируса и требует проведения дополнительных обследований. Лабораторная диагностика гепатита В направлена на обнаружение 3-х типов антигена вируса: HBsAg, HBcAg, HBeAg. При гепатите С выявляют анти-HCV.
    • Экспресс-тест. Определение антител в крови происходит за 15 минут. Результаты теста не такие же точные, как ИФА, поэтому при положительном результате следует обратиться к врачу для детальной диагностики. Чаще всего с помощью тестов проводят скрининг групп риска заражения и первичную диагностику больных.
    • Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Выявляет генетический код вируса и количество его частичек в 1 мл крови. Специфичный и качественный метод диагностики.
    • Биохимия крови с определением уровня печеночных ферментов (АЛТ, АСТ). Количество этих ферментов в кровяном русле — индикатор активности вируса и интенсивности воспаления в печени.
    • Концентрация желчного пигмента билирубина позволяет оценить работу печени. При повреждении печеночной ткани часть желчи начинает поступать в кровь и количество билирубина возрастает.
    • Белковые пробы.
    • Коагулограмма (оценка свертываемости крови). Показатели ухудшаются из-за снижения количества белка протромбина.
    • Биопсия печени. Забор частички печеночной ткани. Этим методом можно определить степень повреждения структуры ткани печени.

    Инструментальные методы диагностики гепатитов

    Лабораторная диагностика гепатитов дополняется инструментальными методами:

    • Фиброэластография. С помощью прибора (фиброскана) определяется плотность печени и изменения в тканях. Метод дает возможность наблюдать за динамикой болезни и эффектом от лечения.
    • УЗИ органов брюшной полости и печени. Обследование печени выявляет только поверхностные изменения. С помощью УЗИ можно определить форму, размеры, положение органа.

    Анализы для дифференциальной диагностики

    Важно отличить гепатит В и С от видов А, Е, D. Для дифференциальной диагностики используются лабораторные анализы, которые выявляют генетические коды вирусов и специфические антигены. Отличия гепатитов В и С проявляются и в аспектах клинической картины. Необходимо также исключить гепатиты, спровоцированные другими возбудителями (цитомегаловирус, вирус Эпштейна- Барра, токсоплазма), кишечные инфекции, пищевые отравления, желчнокаменную болезнь и желтуху неинфекционной природы (следствие закупорки желчных протоков камнем при желчнокаменной болезни или обильного употребления продуктов богатых каротином).

    Лечение вирусных гепатитов В и С

    Больных острой формой вирусного гепатита обязательно направляют в инфекционное отделение. Кроме медикаментозного лечения, важным аспектом является режим. Учитывая тяжесть состояния, назначается полупостельный либо постельный режим. Лечение гепатита включает в себя такие направления:

    • Дезинтоксикационная терапия. Купирование симптомов токсического поражения организма. Внутривенно вводятся: 5% раствор глюкозы, «Гемодез». При выраженных симптомах — глюкокортикостероиды («Преднизолон»).
    • Иммуномодуляторы: интерфероны (содержат защитный белок, который вырабатывается при вирусном заражении).
    • Противовирусные средства: «Циклоферон», «Фармвир».
    • Спазмолитики. Особенно важны при холестазе (замедлении или прекращении выделения желчи). Используется «Но-шпа» или «Спазмол».
    • Желчегонные средства: сульфат магния, «Аллохол».
    • Ферментные препараты: «Мезим-форте».
    • Гепатопротекторы: «Карсил», «Эссенциале».
    • Витамины: группы В, чаще всего В6 или В12, С, Е.

    Даже при легком течении болезни ограничивается физическая нагрузка. Питание 4―5-ти разовое, щадящее по показаниям диеты № 5 или № 5а (при тяжелом состоянии). В остром периоде необходимо обильное питье. Можно употреблять минеральные воды, фруктовые и ягодные отвары. Выписывают из стационара обычно на 20―30-й день болезни.

    Копирование материалов сайта возможно без предварительного согласования в случае установки активной индексируемой ссылки на наш сайт.

    Внимание! Информация, опубликованная на сайте, носит исключительно ознакомительный характер и не является рекомендацией к применению. Обязательно проконсультируйтесь с вашим лечащим врачом!

    Источник: http://infopechen.ru/gepatity/diagnostika/metody-diagnostiki-gepatita-b-i-c.html

    Читайте также

    medicinavdome.ru

    2.Методы лабораторной диагностики вирусных гепатитов.

    1.Биохимический анализ крови(билирубин общий,прямой,непрямой,белок,АЛТ,АСТ,ЩФ,С-реакт.белок)

    2.ОАК

    3.ОАМ,реакция мочи на билирубин,уробилин.

    4.Кал на стеркобилин.

    5.Выявление серологических маркеров вирусных гепатитов-ПЦР(HBsAg,HВeAg,анти-НВс класса IgM и IgG,анти-НВе и анти-HBs,HBV ДНК)

    6.Серодиагностика вирусного гепатита

    Билет 11

    1.Псевдотуберкулез. Значение эпидемиологических, клинических данных и лабораторных показателей для диагностики.

    2.Современные методы специфической иммуно и генодиагностики инфекционных заболеваний.

    Этиология. Возбудитель псевдотуберкулеза относится к семейству Епrerobacteriaceae, роду Yersinia, виду Yersinia pseudotuberculosis. Грамотрица-тельная палочка размером 0,8-2 • 0,4-0,6 мкм не требовательна к питательным веществам. Растет на обычных и обедненных средах, лишенных азотосодержащих веществ и органических соединений углерода. Содержит соматический О- и жгутиковый Н-антигены. По О-антигену выделяют 8 серологических вариантов возбудителя псевдотуберкулеза.

    Факторы патогенности

    1. Адгезины, инвазины.2. Токсины:-эндотоксин (липополисахарид)- подавляет фагоцитарную активность нейтрофилов, подавляет гуморальный ответ;-энтеротоксин – вызывает секреторную диарею;-цитотоксин – вызывает гибель кишечного эпителия с развитием катарального и язвенного илеита;«летальный» токсин;«фактор проницаемости»;«суперантигенный» токсин – активирует Т-лф, вызывая гиперпродукцию цитокинов, что оказывает повреждающее действие на ткани.

    Эпидемиология

    выделен из органов и фекалий многих видов млекопитающих, птиц, земноводных, членистоногих, а также из смывов с овощей, корнеплодов, из фуража, почвы, пыли, воды. Однако основным резервуаром возбудителя и источником заболеваний человека являются синантропные и другие грызуны.

    Ведущий путь передачи инфекции — пищевой. К основным факторам передачи относятся овощные блюда (салаты из овощей) и молочные продукты, употребляемые в пищу без предварительной термической обработки. Накоплению возбудителя в продуктах способствует хранение их в овощехранилищах и холодильниках. Второе место занимает водный путь передачи.

    Патогенез. Возбудитель псевдотуберкулеза попадает в желудочно-кишечный тракт с инфицированной пищей или водой. Преодолев защитный барьер желудка, микробы фиксируются в клетках лимфоидного аппарата кишечника, оттуда проникают в регионарные мезентериальные лимфатические узлы, вызывая их воспаление. На этой стадии, как правило, клинических проявлений болезни нет, заболевание протекает в латентной форме, а в случае несостоятельности барьера регионарных лимфатических узлов микробы попадают в кровяное русло и различные органы, происходит их массовая гибель, сопровождающаяся высвобождением большого количества эндотоксина, появляются клинические симптомы болезни (лихорадка, интоксикация, поражение органов). Возбудитель фиксируется в клетках системы мононуклеарных фагоцитов. Эти патогенетические факторы обусловливают возможность развития генерализованной формы заболевания и объясняют полиморфизм клинической картины псевдотуберкулеза. Патологоанатомическая картина при тяжелом течении болезни свидетельствует о поражении всех органов и систем.

    Симптомы и течение. Инкубационный период от 3 до 18 дней, в среднем 10 дней. Заболевание начинается остро без выраженной продромы. Появляется озноб, головная боль, недомогание, боль в мышцах и суставах, бессонница, першение в горле, кашель. Температура тела повышается до 38—40°С. Наряду с симптомами общей интоксикации у части больных на первый план выступают признаки поражения желудочно-кишечного тракта (боли в животе различной локализации, тошнота, рвота, понос). Кожа сухая и горячая, нередко наблюдаются одутловатость и гиперемия лица и шеи — симптом «капюшона», бледный носогубный треугольник, ограниченная гиперемия и отечность кистей и стоп — симптомы «перчаток» и «носков», инъекция сосудов конъюнктив век и глазных яблок, диффузная гиперемия слизистой оболочки ротоглотки иногда с точечной или мелкопятнистой энантемой. На языке — белый налет. Артериальное давление понижается, отмечается сосудистая лабильность. На 1-6-й, чаще на 2-4-й день болезни появляется ярко-красная точечная сыпь на нормальном или субиктеричном фоне кожи. Наряду с точечной, скарлатиноподобной наблюдается и мелкопятнистая сыпь, в ряде случаев вся она имеет макулезный характер. Отдельные элементы или вся сыпь могут носить геморрагический характер. Иногда сыпь появляется лишь на ограниченных участках кожи. Независимо от характера сыпи и ее количества она располагается на симметричных участках. Сыпь сохраняется от нескольких часов до 8 дней и исчезает бесследно. В период разгара есть артралгии. В ряде случаев артралгии столь выражены, что приводят к обездвиживанию пациентов. Язык очищается от налета, приобретая ярко-малиновую окраску. Боли в животе локализуются в илеоцекальной области, интенсивность их различна, иногда боли в животе являются доминирующим симптомом. При пальпации живота в илеоцекальной области наблюдаются болезненность и урчание. Кроме того, в ряде случаев в правой подвздошной области при перкуссии укорочен перкуторный звук, наблюдаются напряжение мышц передней брюшной стенки и симптомы раздражения брюшины. Этот симптомокомплекс обусловлен развитием мезаденита, терминального илеита или аппендицита. Абдоминальная форма синдром поражения желудочно-кишечного тракта (боли в животе, тошнота, рвота, понос, признаки терминального илеита, мезаденита, аппендицита). Желтушная — боли в правом подреберье, потемнение мочи, желтушность кожи и склер, увеличение печени, билирубинемия, гипертрансаминаземия. Артралгическая — выраженные артралгии, обездвиженность больных. Экзантемная — экзантема, симптомы «капюшона», «перчаток», «носков». Катаральная — кашель, насморк, першение и боли в горле, гиперемия и отек слизистой оболочки ротоглотки. Смешанная — к ней относятся заболевания, протекающие с четко выраженными признаками двух клинических форм.Генерализованная — все синдромы или по крайней мере три выражены настолько ярко, что трудно выявить преобладание одного из них. Лабораторная диагностика

    1.Выделение возбудителя от больного в остром периоде болезни возможно из фекалий, мочи, мазков слизи из ротоглотки, удаленных аппендиксов и мезентериальных лимфатических узлов. Используют методику Паттерсона и Кука, основанную на способности  Y. pseudotuberculosis расти при пониженной температуре в среде подращивания (стерильный фосфатно-солевой буфер рН 7,4, среда Серова и др.).

    2. В серологической диагностике используют реакции агглютинации (РА) и непрямой гемагглютинации (РНГА). Диагностическим титром может считаться для РА 1:200, для РНГА 1:100.

    3. Обнаружения антигенов иерсиний в организме больных: РНГА, РНИФ (реакция непрямой иммунофлуоресценции), РКА (реакция коагглютинации), латексагглютинация, ИФА (иммуноферментный анализ). Эти методы позволяют обнаружить антигены иерсиний в различных биологических средах организма в первые дни заболевания.

    Лечение

    1. левомицетин по 0,5 г 4 раза в сутки,14 дней или стрептомицин пo 0,5 г 2 раза в сутки вм 2 недели. При генерализованной форме антибиотики парентерально. Цефалоспорины — цефазолин, кефзол, цефамезин по 1,0 г 4—6 раз в сутки внутримышечно или внутривенно, фторхинолоны — ципрофлоксацин, ципробай по 0,2—0,4 г 2 раза в сутки внутривенно капельно.

    2. Патогенетическая терапия — дезинтоксикационные (полиионные растворы, реополиглюкин, гемодез и др.), общеукрепляющие, стимулирующие и десенсибилизирующие средства,поливитаминов и иммуномодуляторов.

    studfiles.net


    Смотрите также