Расшифровка анализа ПЦР на гепатит С. Гепатит пцр


Количественный ПЦР-анализ на гепатит C: отрицательный, положительный

Острый гепатит C является широко распространенной вирусной инфекцией. Заболевание антропонозное, то есть в нормальных условиях развивается только в человеческом организме. Возбудителем болезни служит вирус HCV. Для начала развития инфекции вирус должен попасть непосредственно в печень. Основным путем заражения организма является контакт с инфицированной кровью и / или ее компонентами. Вирус обнаруживается с помощью анализа крови на гепатит C методом ПЦР.

Сложность диагностики инфекции до приобретения хронической формы состоит в том, что протекает она бессимптомно. Выявляется болезнь часто случайно, во время прохождения обычных медосмотров, диспансеризации.

Особенности генетической вариабельности HCV

Организм человека не способен выявить и обезвредить попавший в организм вирус гепатита C на ранних стадиях инфицирования, что связано с генетическим непостоянством HCV. Нить РНК вируса имеет протяженность около 10 000 нуклеотидов, которые быстро замещаются.

В настоящий момент известно 6 генотипов и свыше 90 субтипов HCV. Существуют так называемые квазивиды — множественные вариации вируса гепатита C.

Внутри одного генотипа вируса образуется большое количество мутированных, генетически родственных его вариаций. Разные квазивиды одного генотипа являются результатом генетической нестабильности HCV. Они образуются в ходе мутаций при размножении вируса гепатита C.

Наличие различных вариаций одного и того же генотипа объясняет отрицательный ответ вируса на иммунные атаки организма, а также сохранение его длительной активности.

вирус гепатита с

Приобретение хронической формы болезни, безрезультатная терапия интерферонами и риск повторного инфицирования являются следствием генетической мутации вируса.

Инфицирование

Инфекция острого гепатита C передается путем попадания зараженной крови в кровоток здорового человека. Такой путь передачи называется парентеральным. В зоне высокого риска заражения находятся люди, которые могут контактировать с потенциально инфицированной кровью. Это сотрудники медицинских лабораторий, пациенты, требующие переливание крови, трансплантацию органов, а также находящиеся на диализе.

 

В салонах красоты (предоставляющих услуги пирсинга, тату, маникюра и т.д.), а также стоматологических кабинетах все манипуляции должны происходить в санитарных условиях с использованием стерильных инструментов, так как HCV может попасть в организм через загрязненные инструменты.

Отдельно следует выделить наркозависимых людей. Многократное использование одного шприца с иглой разными лицами в разы повышает риск инфицирования. Именно наркоманы составляют большую часть больных гепатитом C и являются переносчиками вируса HCV.

В бытовых условиях инфекция может распространяться через личные средства гигиены: зубные щетки, бритвенные принадлежности.

Все способы передачи инфекции, кроме контакта с кровью, называются общим словом непарентеральный путь заражения. Таким способом гепатит C передается крайне редко, что связано с малой концентрацией вируса. Половой путь передачи составляет не более 10% случаев заражения. Передача вируса с молоком кормящей матери относится к единичным случаям.

Всем, кто находится в группе повышенного риска заражения, а также тем, кто имел неосторожность контактировать с инфицированной кровью, рекомендуется сдать анализы крови на выявление HCV.

Особенности диагностики

Из-за отсутствия специфических симптомов острого вирусного гепатита C заболевание в большинстве случаев приобретает хроническую форму.

В первые несколько недель после инфицирования (в среднем 3 недели) можно обнаружить РНК вируса гепатита C в крови больного. Для выявления вируса гепатита, его вида, генотипа необходимо лабораторное исследование биологического материала: крови и ее сыворотки, лимфы, фрагментов тканей печени. Такое исследование проводится не только для диагностики, но и для определения качественной интерферонотерапии.

Как правило, антитела к HCV обнаруживаются посредством иммуноферментного анализа (ИФА). Данное исследование дает исчерпывающий ответ: «обнаружено» или «не обнаружено». Соответственно, проба положительна или отрицательна. Антитела, обнаруженные с помощью ИФА, не всегда свидетельствуют о присутствии HCV в организме. Часто такой анализ дает ложноположительные результаты. Это связано с тем, что человек когда-то заразился гепатитом C, но произошло самоизлечение, а антитела в организме остались. В случае обнаружения в исследуемой крови анти-HCV назначается дополнительное ПЦР-исследование на гепатит C.

Среди современных методов диагностики стоит выделить ПЦР-анализ на гепатит C как наиболее качественный и точный.

С помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) представляется возможным выявить возбудителя гепатита C (вирус HCV). Данная диагностическая методика может обнаружить вирус даже при минимальной концентрации HCV в биологическом субстрате спустя всего 5 дней после инфицирования. Это позволяет начать противовирусную терапию еще до значительного поражения печени, так как за такой короткий промежуток времени организм не успевает выработать антитела.

Полимеразная цепная реакция разделяется на два типа: качественная и количественная.

Качественный анализ ПЦР на гепатит C помогает выявить присутствие HCV в крови как такового. Положительный результат исследования крови методом ПЦР говорит об инфицировании организма вирусом HCV.

Делается качественный ПЦР тест на выявление гепатита C после положительного результата ИФА, то есть, когда обнаружены антитела к данному вирусу.

Расшифровка анализа ПЦР констатирует присутствие или отсутствие вируса HCV в организме, то есть результат ПЦР положительный или отрицательный соответственно.

Исследование крови здорового человека с помощью ПЦР-анализа всегда покажет отрицательный результат.

Количественный тест ПЦР определяет вирусную нагрузку (виремию), то есть концентрацию HCV в биологическом субстрате. От величины вирусной нагрузки зависит течение всей болезни в целом. При низкой концентрации интерферонотерапия завершается положительным результатом. Иногда сроки терапии могут быть сокращены.

Высокая концентрация вирусов, напротив, делает противовирусную терапию малоуспешной, повышается риск развития тяжелых осложнений. Люди, у которых высокая виремия, могут передавать гепатит C непарентеральным путем: половым, контактно-бытовым, от матери к ребенку.

Концентрация вируса в биологическом субстрате измеряется в единицах (МЕ) на 1 мл крови (реже копии/мл). Если расшифровка количественного ПЦР-анализа на гепатит C показывает виремию выше 800 000 МЕ/мл (2 млн копий/мл), то это указывает на высокую концентрацию HCV. Если количество меньше 400 000 МЕ/мл (1 млн копий/мл), то вирусная нагрузка считается низкой.

Пример результатов количественного ПЦР теста на гепатит C:

Виремия HCV в МЕ/млВиремия HCV в копиях/млКомментарии
≥ 40≥ 200вирус не обнаружен
РНК HCV обнаружена; концентрация ниже линейного диапазона концентраций
РНК HCV обнаружена; концентрация низкая
> 800 000> 2 000 000РНК HCV обнаружена; концентрация высокая
> 24 000 000> 100 000 000РНК HCV обнаружена; концентрация выше линейного диапазона концентраций.

Примечание: ПЦР-анализ на гепатит C имеет нижний порог чувствительности, равный 10 единицам. Это означает, что при концентрации HCV в биологическом материале ниже порога чувствительности тест может оказаться отрицательным, хотя вирус присутствует. Низкая концентрация вируса обычно связана с проводимой противовирусной терапией.

Вирусная нагрузка (точнее, ее уровень) не определяет степень поражения печени и тяжесть заболевания. Достоверную информацию о патологии можно получить с помощью биохимических показателей исследования крови, а также биопсии фрагментов ткани печени.

Для результативной противовирусной терапии очень важным остается определить генотип НСV.

propechen.com

Количественный анализ ПЦР на гепатит В: расшифровка, норма, ДНК

ПЦР диагностика позволяет не только определить наличие вируса гепатита В в крови и его этиологию, но также оценить его активность. Выявление вирусной нагрузки особенно важно для подбора эффективного лечения, если она слишком высока, то вероятность выздоровления уменьшается. В чем суть метода полимеразной цепной реакции?

Суть ПЦР диагностики

ПЦР диагностика

ПЦР диагностика

 При гепатите проводят ПЦР, чтобы наверняка удостовериться в поставленном диагнозе. При помощи этого метода можно выявить ДНК вируса, а также определить его количество в крови.

ДНК вирус в крови методом ПЦР при гепатите можно выявить по окончании инкубационного периода, в это время на фоне повышенного уровня трансаминаз можно определить и HBsAg, после чего появляется HBeAg.

  • При качественном определении можно точно установить диагноз, есть гепатит или его нет. В норме в крови ДНК вируса должен отсутствовать.
  • Количественный метод позволяет определить интенсивность развития болезни и размножение вируса.

Анализ имеет очень высокую чувствительность и достоверность. В качестве биологического материала берут венозную кровь. Благодаря современным технологиям, при ПЦР можно обнаружить вирус при концентрации 5×103-104 копий/мл в крови. По результатам анализа, зная норму, можно судить о вирусной нагрузке и поставить прогноз на лечение.

Важно! Именно ДНК вируса способствует развитию цирроза и других хронических заболеваний печени.

Обнаружение ДНК при помощи ПЦР необходимо в следующих случаях:осмотр врача

осмотр врача
  1. Сомнения при постановке окончательного анализа после сдачи анализов.
  2. Определение острой стадии болезни.
  3. Выявление скрытых форм гепатита.
  4. Оценка эффективности после прохождения противовирусной терапии.

Как расшифровать полученные после ПЦР диагностики результаты?

ПЦР количественный

По количественной оценке можно не только определить наличие вируса, но и узнать вирусную нагрузку, в случае если ПЦР покажет положительный результат.

Количественный метод необходим, чтобы узнать такую информацию:

  1. Интенсивность развития заболевания.
  2. Эффективность лечения.
  3. Развитие резистентности к противовирусным препаратам.

Количественная оценка очень важна при постановке диагноза хронического гепатита. В этом случае все показатели будут находиться не в пределах нормы. Уровень трансаминаза будет повышен, индекс активности вируса более 4, а концентрация ДНК вируса более 105 копий ДНК/мл. Если концентрация вируса более низкая, а уровень трансаминаза находится в норме, то можно говорить о пассивном носительстве.

Перед назначением противовирусного лечения прохождение ПЦР диагностики, а именно количественного обследования, является обязательным условием, чтобы определить вирусную нагрузку.

Делают анализ каждые 3 месяца, и если вирусная нагрузка возросла в 10 раз, то можно говорить об устойчивости вируса к лечению.анализанализ

  • Количественный анализ дает очень важную информацию, ведь можно определить, сколько в крови содержится ДНК возбудителя. Чем больше его количество, тем больше вирусная нагрузка и тем тяжелее состояние больного.
  • При снижении вирусной нагрузке после прохождения лечения, можно судить о его эффективности.
  • В некоторых случаях ПЦР при гепатите является показанием к проведению дополнительного обследования, такого как биопсия печени. При повышенном уровне АЛТ проводится ПЦР. Расшифровка анализов такая: если вирусная нагрузка более 105копий ДНК/мл, а уровень АЛТ превышает норму, но не более чем в 2 раза на протяжении полугода, то такой больной нуждается в биопсии. При сильном воспалении или фиброзе показано противовирусное лечение. Если же уровень АЛТ превышает норму более чем в 2 раза при высокой вирусной нагрузке, то сразу назначают лечение без дополнительной диагностики.

Только хорошие специалисты смогут правильно расшифровать результаты количественного ПЦР.

ПЦР качественный

Качественный анализ позволяет определить наличие вируса гепатита в крови. В норме он должен отсутствовать. Благодаря этому методу можно точно установить диагноз.

Качественный ПЦР анализ дает 100% точный результат.

медсестра с лекарством

медсестра с лекарствомНи один другой метод не дает настолько достоверных данных. В более чем половине случаев после прохождения диагностики выявляют ДНК вируса, при отсутствии антигена. Очень важно на начальном этапе заболевания установить диагноз.

Доказано, что если ДНК вируса гепатита В активно размножается в организме человека в течение двух месяцев, то болезнь приобретает хроническую форму. Если же начать бороться с вирусом уже в течение первых недель после инфицирования, то шансы на полное выздоровление очень велики.

Как происходит расшифровка полученных результатов обследования при помощи качественного метода?

Расшифровка анализа очень проста:

  • В норме результат должен быть отрицательным, то есть ДНК вируса не обнаружено.
  • Положительный результат свидетельствует о наличии гепатита.

Анализ помогает выявить вирус, определить его генотип и начать своевременное лечение. Очень часто при наличии ДНК наряду с качественной оценкой проводят и количественную.

Как подготовиться к обследованию?

При анализе на гепатит при помощи ПЦР диагностики берут кровь из вены. Проходить обследование лучше всего с утра, так как кровь всегда нужно сдавать натощак (после последнего приема пищи должно пройти не менее 8 часов).

Чтобы анализ был максимально достоверным, больной должен знать о некоторых факторах, которые могут повлиять на конечный результат:

  • Перед тем как сдавать кровь из вены, нужно 20 минут отдохнуть.
  • Кроме того, что анализ сдается натощак, так, еще за 12 часов нельзя употреблять спиртное, курить, заниматься спортом и употреблять жирную еду.
  • Некоторые лекарственные средства, которые вынужден принимать больной, могут повлиять на конечный результат. Лаборант должен знать о случае медикаментозного лечения.
  • Если кровь нужно сдать ребенку в возрасте до 5 лет, то в таком случае его за полчаса до диагностики нужно поить каждые 10 мин. по стакану кипяченой воды.

Очень важно проходить ПЦР в клинике, которая хорошо себя зарекомендовала. Ведь несмотря на то что ПЦР определяет наличие вируса с точностью до 100%, этот показатель может снизиться до 95%, если учесть человеческий фактор.

Неквалифицированные лаборанты или плохая репутация клиники может стать причиной получения ложных результатов.

Рекомендуем прочитать:

pechen1.ru

Результат пцр при гепатите в. Лечение гепатита. prosto-lechim.ru

Главная » Лечение гепатита

Диагностика и лечение гепатита

1. Анализ крови на маркеры вируса гепатита В. Наличие тех или иных маркеров вируса гепатита В в крови дает информацию о статусе инфекции. Интерпретация результатов обследования на маркеры вируса гепатита В приведена в таблице ниже.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР). ПЦР позволяет обнаружить в крови инфицированного ДНК вируса гепатита В (ДНК HBV). Положительный результат на ДНК HBV свидетельствует о наличии инфекции. Этот анализ называется качественная ПЦР. ПЦР также позволяет определить вирусную нагрузку. т.е. количество копий ДНК в 1 мл крови инфицированного, этот анализ называется количественная ПЦР. Количество вируса в 1 мл крови позволяет судить об активности вируса.

В нижеприведенной таблице отражены результаты обследования на маркеры вируса гепатита В и их клиническая интерпретация. Например, рассмотрим результаты одного из обследований:

- HBsAg положительно - anti-HBcorIgG (или antiHBcor IgG или HBcorAb IgG) положительно - HBeAg отрицательно - HBeAb положительно - ДНК HBV (или DNA HBV) положительно

Вывод: HBeAg-негативный хронический гепатит В или неактивное носительство вируса гепатита В. В данном случае для уточнения диагноза между этими вариантами необходимо дообследование: количественная ПЦР, АЛТ, возможно биопсия печени (или неинвазивная оценка состояния печени).

2. Биохимический анализ крови с определением уровня печеночных ферментов АЛТ (аланинаминотрансфераза) и АСТ (аспартатаминотрансфераза). показывающими степень активности воспаления в печени. АЛТ и АСТ являются ферментами, содержащимися внутри гепатоцитов, и при повреждении клетки они выходят наружу и таким образом повышается их уровень в крови. Существуют и другие ферменты печени, но основными показателями цитализа являеются АЛТ и в меньшей степени АСТ. Таким образом, если количественная ПЦР позволяет судить об активности вируса. то уровень АЛТ и АСТ говорит об активности воспаления в печени. вызванной вирусом.

Вышеперечисленные обследования являются основными в диагностике гепатита В и с помощью лабораторных анализов крови можно оценить активность вируса, стадию гепатита, и косвенно - степень поражения печени. В части случаев этой информации не бывает достаточно и требуются более точные данные о состоянии ткани печени, активности гепатита и степени фиброза. В этом случае может обсуждаться выполнение биопсии печени или применение неинвазивных методов оценки состояния печени.

3. Биопсия печени это процедура забора ткани печени специальной иглой. Наиболее часто проводят чрескожную биопсию печени. Процедура проводится под местным обезболиванием с извлечением кусочка ткани (примерно в 0.5 г) с последующим изучением ее под микроскопом.

Биопсия печени является своего рода последней инстанцией, так как позволяет наиболее точно определить степень активности заболевания и повреждения ткани печени (фиброза). Несмотря на высокую информативность биопсии печени, нужно учитывать, что это хирургическая процедура и при ней возможны осложнения, которые однако встречаются редко.

В течение последних нескольких лет динамично развиваются другие методы, позволяющие оценить степень активности заболевания и стадию фиброза без хирургического вмешательства, следовательно абсолютно безопасно для пациента. Среди них заслуживают упоминания ФиброМетр, ФиброТест, ФиброМакс и фиброэластография. Первые три теста основаны на определении уровня в крови ряда показателей и последующем анализе их с использованием специального алгоритма. В некоторых странах эти методы получили широкое распространение, потеснив биопсию печени при ряде патологий печени.

Фиброэластография, проводимая на приборе Фиброскан, позволяет оценить плотность ткани печени методом, схожим с УЗИ. При проведении фиброэластрографии, используется специальный датчик, который прикладывается к коже над областью печени и с помощью испускаемых им ультразвуковых колебаний определяется плотность ее ткани. Она получила широкое распространение в гепатологии, особенно при гепатите С.

Являетесь медицинским специалистом?

Для получения научной информации, посетите раздел для врачей .

Гепатит В

ГЕПАТИТ В - острое или хроническое заболевание печени, вызываемое вирусом гепатита В (Hepatitis В virus, HBV) и протекающее в различных клинико-морфологических формах: от бессимптомных до злокачественных (цирроз печени, гепатоцеллюлярная карцинома). Заражение ВГВ происходит от «здоровых» вирусоносителей с нераспознанными хроническими или острыми формами гепатита В при переливании крови и ее компонентов, при медицинских манипуляциях и сексуальных контактах, во время тесных бытовых контактов. Реже вирус может передаваться от инфицированной матери к ребенку во время родов или после.

Вирус гепатита В отличается чрезвычайно высокой устойчивостью к различным физическим и химическим факторам: низким и высоким температурам, многократному замораживанию и оттаиванию, длительному воздействию кислой среды. Он сохраняется при комнатной температуре в течение 3 мес. а в заморожен-ном виде - 15-20 лет.

Диагностика гепатита В включает в себя ряд анализов крови. При положительных результатах на опреде-ление серологические маркеров вирусного гепатита В (HBsAg) методом иммуноферментного анализа необходимо сдать кровь на гепатит В для обнаружения ДНК вируса методом полимеразно-цепной реакции (ПЦР).

В медицинском центре «Биомедика» можно сдать анализы на гепатит В метотом ПЦР:

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДНК ГЕПАТИТА В методом ПЦР - это основной метод диагностики гепатита В, который подтверждает наличие вируса гепатита В в исследуемом материале (цельная кровь, сыворотка, плазма, биоптаты печени) и устанавливает патогенез заболевания.

  • Для ранней диагностики острого вирусного гепа­тита В (ДНК вируса гепатита В - самый ранний маркёр при острой инфекции).
  • Исследования при HBsAg-негативной инфекции.
  • Обследования лиц, входящих в группу риска.
  • Для выявления ведущего вируса при смешанной этиологии.
  • Выявление стадии активной репликации вируса при хроническом состоянии.
  • Контроль проводимой терапии.
  • Цирроз печени.
  • Слабость, недомогание, быстрая утомляемость, снижение аппетита, тошнота, тяжесть в правом подреберье, увеличение печени, а также боли в мышцах, суставах.
  • Желтуха, кожный зуд, увеличение селезёнки, сосудистые «звездочки».

После проведения анализа крови на определение ДНК вируса гепатита В в нашем медицинском центре пациенту выдается заключение. «ДНК вируса гепатита В обнаружена» или «ДНК вируса гепатита В не обнаружена». Определение ДНК HBV в материале является важнейшим анализом, который наряду с другими лабораторными исследованиями позволяет диагностировать инфекцию, определять характер инфекционного процесса, выступать в качестве критерия в проведении терапии и оценки ее эффективности.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДНК ГЕПАТИТА В (вирусная нагрузка) - это тест на определение количества единиц ДНК вируса гепатита В, которые присутствуют в определенном объеме крови (обычно это 1 мл, что соответствует 1 кубическому сантиметру). Это количество выражается в цифрах, единицы измерения - копии/мл.

  • Положительный качественный тест на наличие ДНК вируса гепатита В в сыворотке крови.
  • Определение тактики лечения пациентов.
  • Мониторинг эффективности противови­русной терапии.

Количественный метод определения содержания ДНК вируса в плазме дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к антивирусным препаратам. Снижение концентрации ДНК вируса гепатита В в течение недели после начала курса лечения не менее чем на треть является быстрым и точным параметром для предсказания эффективности терапии, приводящей к раннему вирусологическому ответу.

Ищете где сдать анализ на гепатит В? Наша современная ПЦР-лаборатория в режиме «реального времени» позволяет провести диагностику гепатита В в качественном и количественном формате. Сдать кровь на гепатит В можно в любое удобное для Вас время. Предлагаем Вам получить консультацию у высококвалифицированных врачей-инфекционистов.

База знаний: HBV, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]

HBV, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]

Исследование для выявления возбудителя гепатита B (HBV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (ДНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.

ДНК HBV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций – это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций ДНК HBV, определяемых детектирующим амплификатором, составляет 7,5×10 2 – 1,0×10 8 копий/мл образца .

Вирус гепатита В (ВГВ), количественное определение ДНК.

Hepatitis B Virus DNA, Quantitative, Real-Time PCR, Blood; HBV Viral Load; Hepatitis B Virus DNA Quant.

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Копия/мл (копия на миллилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Вирусный гепатит В (ВГВ) – инфекционное заболевание печени, вызванное ДНК-содержащим вирусом гепатита В (HBV). Среди всех причин развития острого гепатита и хронической вирусной инфекции вирус гепатита В считается одной из самых распространенных в мире. Действительное количество инфицированных неизвестно, так как у многих людей инфекция протекает без специфических симптомов и за медицинской помощью они не обращаются. Нередко вирус обнаруживают при проведении профилактических лабораторных исследований. По приблизительным подсчетам, в мире около 350 миллионов человек поражено вирусом гепатита В и ежегодно от его последствий умирает 620 тысяч. В России количество носителей HBV превышает 5 миллионов человек.

Источник инфекции – больной ВГВ или бессимптомный вирусоноситель. HBV передается с кровью и другими биологическими жидкостями. Заразиться можно при незащищенном половом контакте, использовании нестерильных шприцев, переливании крови и пересадке донорских органов, ребенка может заразить мать во время или после родов (через трещины в сосках). В группу риска входят: медицинские работники, у которых возможен контакт с кровью пациента, пациенты, получающие гемодиализ, инъекционные наркоманы, люди, ведущие беспорядочную половую жизнь, дети, рожденные от матерей с ВГВ.

Инкубационный период заболевания – от 4 недель до 6 месяцев. Вирусный гепатит В может протекать как в виде легких форм, длящихся несколько недель, так и в виде многолетней хронической инфекции. Основные признаки гепатита: желтушность кожных покровов, лихорадка, тошнота, утомляемость, в лабораторных анализах – нарушения функции печени и специфические антигены вируса гепатита В. Острое заболевание может быстро приводить к летальному исходу, переходить в хроническую инфекцию или заканчиваться полным выздоровлением. Считается, что после перенесенного ВГВ формируется стойкий иммунитет. Хронический вирусный гепатит В связан с развитием цирроза и рака печени.

Есть несколько специфических тестов для выявления существующего или перенесенного вирусного гепатита В. Для подтверждения наличия инфекции и уточнения периода заболевания используют определение антигенов вируса, антител к ним и ДНК вируса.

Полимеразная цепная реакция отличается высокой чувствительностью и специфичностью. Методом ПЦР можно определить ДНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита В в организме и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки позволяет оценить интенсивность развития болезни, эффективность проводимой терапии или развитие устойчивости к противовирусным препаратам.

Существует зависимость между концентрацией вируса в крови и исходом острого вирусного гепатита В. При низком уровне виремии вероятность перехода инфекции в хроническую форму близка к нулю, а инфицированный человек неопасен для окружающих. При высокой вирусной нагрузке ( 5 копий/мл) хронизация возникает часто и больной является потенциальным источником инфекции. Доказана связь между количеством ДНК вируса в сыворотке крови, присутствием HBeAg, повышенной АЛТ и развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы (рака печени).

Эффективность противовирусной терапии оценивается по уменьшению количества ДНК вируса в крови. Через 3-6 месяцев после начала лечения вирусная нагрузка при адекватном терапевтическом ответе должна уменьшиться на 1-2 порядка. Отсутствие уменьшения количества вируса или его увеличение на фоне проводимого лечения требует пересмотра и изменения терапии.

Количественное определение ДНК вируса гепатита В совместно с клинической картиной заболевания и биохимическими показателями, маркерами инфекции, а также результатом пункционной биопсии печени позволяет дать прогноз заболевания и оценить необходимость противовирусной терапии.

Для чего используется исследование?

  • Для прогнозирования течения вирусного гепатита В.
  • Для подтверждения хронической формы вирусного гепатита В.
  • Для выявления носителей вирусного гепатита В и мониторинга активности размножения вируса.
  • Для выявления скрытых и мутантных штаммов вируса гепатита В.
  • Для оценки эффективности противовирусной терапии гепатита В и принятия решения о дальнейшей тактике лечения.

Когда назначается исследование?

  • При качественном обнаружении ДНК вируса гепатита В.
  • При остром и хроническом вирусном гепатите В.
  • При микст-гепатитах.
  • До и во время противовирусной терапии.

Что означают результаты?

  • Не обнаружено – ДНК вируса гепатита В не обнаружена или значение ниже предела чувствительности метода (200 копий/мл = 90 МЕ/мл).
  • 10^5 копий/мл (2*10^4 МЕ/мл) – высокая вирусная нагрузка, активный инфекционный процесс (необходимо проведение противовирусной терапии).
  • 1,0*10^8 копий/мл ( 4,8*10^7 МЕ/мл) – ДНК вируса гепатита В обнаружена в концентрации выше линейного диапазона концентраций.

Линейный диапазон концентраций ДНК вируса гепатита В, определяемых детектирующим амплификатором, составляет 7,5*10^2 – 1,0*10^8 копий/мл (3.6*10^2 – 4,8*10^7 МЕ/мл).

Что может влиять на результат?

  • Количественное определение ДНК вируса гепатита В является обязательным исследованием до назначения противовирусной терапии. Во время курса лечения анализ необходимо повторить через 3-6 месяцев.
  • Вирусный гепатит В нередко сочетается с вирусным гепатитом D.

Кто назначает исследование?

  1. Возианова Ж.И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3х т. - К. Здоровье, 2000 – Т.1. 601-654.
  2. Chan Henry Lik-Yuen, Wong May Ling, and others. Use of Hepatitis B Virus DNA Quantitation To Predict Hepatitis Be Antigen Reversion in Cases of Chronic Hepatitis B. J Clin Microbiol. 2003 October; 41(10): 4793–4795. PMCID: PMC294957
  3. Harrison's Principles of Internal Medicine. 16 th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  4. Management of Hepatitis B. An NIH Consensus Development Conference. Program and Abstracts. October 20–22, 2008.

Источники: http://www.gepatitb.ru/diagnostic/, http://biomedica.by/pcr-gepatit-b.html, http://www.helix.ru/kb/item/548

Комментариев пока нет!

prosto-lechimsja.ru

Расшифровка качественного анализа ПЦР на гепатит С

Специальное лабораторное исследование — анализ пцр на гепатит с — значительно упрощает диагностику этого вирусного заболевания. Исключением не является и гепатит С. Небольшая по объему проба крови может быть проверена на содержание рнк и другой генетический материал вирусного агента. Анализу с проведением пцр подвергаются все лица с циркулирующими в плазме крови антитела к гепатиту С, наличие которых подтвердило качественное обнаружение.

Расшифровка результатов интерпретируется в графе бланка исследования как «положительный» или «отрицательный» анализ. Кроме этого, с помощью пцр возможно не только качественно определить минимальное содержание вируса, но и подсчитать число частиц. Таким образом, можно определить предполагаемую вирусную нагрузку и максимально точно определиться с врачебной тактикой лечения.

Вирусное поражение печени

Анализ ПЦР

Анализ ПЦР

Печень как элемент пищеварительного тракта принимает на себя огромную нагрузку. В ее клетках происходит большинство метаболических реакций всех видов обмена, что обеспечивает оптимальное функционирование всех органов и систем. В тоже время велико ее детоксикационное значение для выведения шлаков и продуктов обмена с ферментативной желчью.

Поражение печени вирусами различной природы чрезвычайно опасно для органа. Разнообразная клиническая картина и неподатливость лечению выводит гепатиты на первое место по опасности для здоровья. Гепатит С носит хронический характер и долгое время может давать отрицательный результат тестирования, медленно паразитируя в организме человека. Передается вирус через биологические жидкости: кровь и реже через сперму. Наркотическое злоупотребление нестерильными шприцами, естественное родоразрешение зараженных женщин, случайные травмы или порезы медработников могут повлечь передачу вируса здоровым людям.

Анализ на гепатит с

Анализ на гепатит сСвоевременная диагностика заболевания затрудняется скрытой клинической картиной и бессистемностью патологии. Положительный результат может быть просто упущен некачественным выполнением анализов. Только значительное поражение клеток печени вызывает определенную симптоматику, однако, отрицательный эффект виремии к тому времени не оставляет шансов восстановить орган.

Современная медицина разработала специальные методы распознавания малейших следов вируса. Пцр, ифа, биопсия печени позволяют распознать малейшее повреждение печени и минимальный уровень антител против вируса. Анализ cпомощью пцр наиболее прост и достоверен в диагностической практике.

Качественный анализ

Суть полимеразной реакции заключается в наработке последовательности рнк. Реакция выполняется при наличии в плазме крови таких же вирусных белков.

Специальные катализаторы позволяют синтезировать сходную вирусной последовательности цепь, которую сравнивают с известными нуклеотидами вирусной рнк. На основе этого и определяют вирусную нагрузку и поражение печени.

Исследование методом ПЦР открывает больше информации, чем простое обнаружение рнк вируса. Она превосходит по чувствительности некогда стандартные методы ифа и другого вирусного выделения в несколько раз.

Анализ крови

Анализ кровиПцр способна уловить даже единичное присутствие искомого гена во взятой крови. Такая диагностическая цепная реакция также весьма специфична. Последовательность нуклеотидных цепей уникальна для каждого существа, так что ферментативные праймеры создают идентичные последовательности искомой генетической информации. Таким образом, можно с малейшей точностью выявить любой вирус, даже если его количественный показатель чрезвычайно мал.

Пациентам, в крови которых были обнаружены выработанные антитела против вирусного гепатита, проводят качественное исследование пцр или ифа. Результат анализа может быть как положительный, так и отрицательный, что в обоих случаях требует лечения.

Расшифровать положительный ответ цепной реакции следует как наличие фрагментов рнк гепатитного вируса или как явление инфицирования.

В плазме крови в данный момент вирус активно размножается и паразитирует над клетками печени. Пцр-диагностика может дать отрицательный ответ в случае, если частиц вирусной рнк присутствует в плазме мало, ниже уровня чувствительности теста или их вовсе нет. После непосредственного заражения количество вируса нарастает сравнительно медленно, и только спустя 1–2 недели ифа или другое качественное исследование способны их выделить.

Отрицательный анализ можно получить и в следующих случаях:

  1. При взятии материала в ненадлежащих условиях, получении пробы крови с загрязнениями;
  2. При ранее произведённых пациенту инъекциях гепарина.
  3. При присутствии во взятых образцах других ферментов и субстратов, нарушающих ход цепной реакции.

Количественный анализ

Вирус гепатита С

Вирус гепатита СКоличественный тест как микробиологическая диагностика призван определять вирусную нагрузку. Подтвержденный качественный анализ на виремию служит основанием для определения количества генетического материала и его концентрации. Число выявленных вирусных рнк определяют в единице объема крови, обычно в 1 миллилитре. Искомые материалы выражают в международных единицах, некоторые лаборатории в анализах ифа используют количество копий.

Обычно до проведения любой терапевтической схемы проводится количественный анализ пцр. Подсчет вирусных рнк проводят достаточно часто: спустя одну, четыре, двенадцать и двадцать четыре недели. 12-ая неделя считается показательной, так как на основе анализа в этот период проводится расшифровка эффективности лечебных мероприятий.

Любое проведение исследований не требует тщательного подготовительного этапа пациентов. Единственное, что запрещается до взятия крови – курение.

Количественный анализ с помощью пцр или ифа предполагает взятие проб из вены.

Интерпретация результатов как высокая вирусная нагрузка начинается от цифры в 800000 МЕ/мл. Такой положительный результат на гепатит С отражает наличие не менее 3000000 копий в одном миллилитре крови. Низкий уровень виремии останавливается на цифре в 400000 МЕ/мл. Результатами исследования могут быть значения как отрицательный ответ, а также показатель «ниже измерительного диапазона».

Лаборант

ЛаборантКоличественный тест с оценкой «ниже диапазона измерений» говорит, что в ходе реакции не удалось произвести подсчет рнк. Вирус же в организме все же циркулирует, на что указывает положительный качественный тест. Отрицательный показатель количественного анализа пцр или ифа свидетельствует об отсутствии рнк в данной пробе крови.

Вирусная нагрузка позволяет расшифровать степень инфекционности патологии и опасность пациента для окружающих. Высокий уровень вирусных рнк, выявленных в ходе пцр или ифа, говорит о риске «заразности» больного.

Несмотря на ограниченные способы передачи вируса через кровь, повышается риск передачи вируса через секреты половых желез, от матери к ребенку.

Количественный анализ оказывает существенную помощь в оценке терапевтических мероприятий. Ифа и пцр отражают действие противовирусных лекарственных средств, помогают установить сроки терапии и оценить формирование иммунитета больных. Скорый отрицательный ответ лабораторных тестов свидетельствует об успешном лечении и необходимости сократить сроки терапии. Медленное снижение показателей виремии можно расшифровать как необходимость видоизменения терапевтического курса. Уровень вирусной нагрузки определяет и прогноз заболевания. Гепатит с низким данным показателем, скорее всего, будет просто лечить и можно полностью вывести вирус из организма. Высокие показатели вирусного присутствия в крови требует внимательного отношения и разностороннего лечения.

Рекомендуем прочитать:

pechen1.ru


Смотрите также