ПЦР-анализ на гепатит С. Гепатит с диагностика пцр


сдача анализа и диагностика. Методы определения результатов

ПЦР на гепатит С

Вирусный гепатит С - опасное заболевание, которое часто вызывает цирроз печени и онкологические злокачественные новообразования.

Эта патология без лечения угрожает жизни пациента.

Чтобы лечение было качественным, болезнь нужно своевременно диагностировать.

Специфических симптомов патология практически не имеет.

Это затрудняет клиническую диагностику заболевания.

Поэтому вирусный гепатит С определяется в ходе лабораторных исследований.

ПЦР анализы на гепатит С

Основными методами определения заболевания остаются серологические исследования крови на антитела, а также ПЦР.

Более точным исследованием считается ПЦР.

Потому что этот метод имеет высокую чувствительность.

Он становится положительным вскоре после начала заболевания, в то время как антитела синтезируются лишь через 1-1,5 месяца.

Кроме того, после излечения гепатита С противовирусными препаратами может длительное время сохраняться ложноположительный результат серологического исследования.

В то же время анализ дает точные результаты.

При излеченном гепатите С это исследование будет отрицательным.

Что позволяет использовать метод для установления критериев излеченности.

С помощью исследования можно определять количественные показатели вирусной нагрузки.

Кроме того, можно определить генотип вируса.

Поэтому перед началом терапии это позволяет дать прогноз дальнейшему развитию заболевания и подобрать максимально эффективную схему.

В процессе лечения ПЦР помогает определить его эффективность и своевременно скорректировать терапию при необходимости.

Молекулярные диагностические исследования на гепатит С делятся на три вида:

  • качественные
  • количественные
  • генотипирующие

 

Стандартный тест определяет РНК вируса гепатита (ДНК у него нет) при вирусной нагрузке от 100 или 300 МЕ/мл.

диагностика гепатита в лаборатории

Он может использоваться в первичной диагностике вирусного гепатита.

Кроме того, анализ применяется как скрининговый метод.

Потому что он недорогой, высокоточный и занимает минимум времени.

Основные показания к профилактическому обследованию на гепатит С методом ПЦР:

  • беременность
  • запланированная пересадка органов
  • донорство крови или любого другого биоматериала (стволовых клеток, спермы, ооцитов и т.д.)
  • подозрение на инфицирование гепатитом С после переливания крови в течение 6 месяцев после процедуры
  • прием на работу в медицинские организации
  • поступление в стационар на лечение по поводу любых заболеваний
  • предстоящие плановые хирургические операции
  • поступление в места лишения свободы
  • хронические заболевания печени

 

Профилактическое обследование проходят люди из групп риска по гепатиту С.

К числу таковых относятся:

  • наркоманы
  • их половые партнеры
  • проститутки
  • люди, пользующиеся их услугами
  • люди, работающие с детьми или пищевыми продуктами
  • частые половые контакты со сменой партнеров
  • онкобольные
  • пациенты на гемодиализе
  • дети, рожденные от матерей с гепатитом С

 

Существует также ультрачувствительный тест.

Он дает положительный результат уже при достижении вирусной нагрузки в 10 или 15 МЕ/мл.

Это позволяет проводить более точную диагностику.

Показания к использованию высокочувствительных методов:

  • планирование противовирусного лечения
  • определение антител к гепатиту С в сыворотке крови
  • болезни печени неуточненной этиологии, в том числе при отрицательном анализе на антитела
  • диагностика вирусного гепатита у лиц с приобретенными иммунодефицитными состояниями, в том числе ВИЧ
  • лица, получающие лучевую или химиотерапию
  • при раке крови
  • при использовании иммуносупрессивной терапии (например, после трансплантации органов)
  • на фоне лечение глюкокортикоидами (например, при аутоиммунных патологиях)

 

Вирус может быть обнаружен раньше после первичного инфицирования.

Кроме того, такое исследование позволяет раньше выявить рецидив гепатита С после периода ремиссии.

Ультрачувствительный метод дает более точные результаты при диагностике после лечения.

ПЦР часто проводят в комбинации с определением антител к вирусу гепатита С.

ПЦР тест на гепатит С

Это требуется для получения надежных результатов исследования.

Потому что бывают случаи, когда при остром гепатите С ПЦР дает отрицательные результаты, хотя на самом деле вирус в крови есть.

Поэтому основанием для установления диагноза является:

  • одновременные положительные результаты двух исследований - определения антител в крови к вирусу гепатита, а также обнаружение его РНК
  • троекратные положительные результаты исследования ПЦР на гепатит С

 

Подтверждение требуется ещё и потому, что анализ иногда дает ложноположительные результаты.

Хотя случается это редко.

Специфичность диагностического теста очень высокая.

Всем пациентам до начала противовирусной терапии показано проведение генотипирования с помощью ПЦР.

Этот метод диагностики чрезвычайно информативен.

Всего существует 6 типов вирусов гепатита С.

А рамках них также выделяются субтипы, которые обозначаются буквами латинского алфавита.

Это позволяет:

  • дать прогноз клиническому течению заболевания
  • определить риск перехода патологии в хроническую форму
  • установить риск осложнений
  • оценить вероятность ответа на лечение теми или иными препаратами
  • рассчитать правильно дозу препаратов
  • определить оптимальный курс терапии
  • выяснить, когда стоит проводить диагностику с целью установления критериев излеченности (при большинстве типов вируса гепатита С контрольные исследования проводятся сразу после завершения терапии, а при 1 типе - через 12 недель)

 

Продолжительность терапии и дозы имеют немаловажное значение не только в плане эффективности терапии.

Важно подобрать такие дозировки лекарств, которые помогут уничтожить вирус, но в то же время будут безопасными.

лечение гепатита С

Потому что многие препараты имеют побочные эффекты и плохо переносятся пациентами.

С помощью теста ПЦР на генотип вируса можно провести оценку целесообразности применения интерферонов в лечении заболевания.

Например, положительная вирусологическая реакция на назначение интерферонов при вирусе 1 типа составляет всего 35%.

В то же время пациенты с другими типами вируса реагируют на такое лечение в 70% случаев.

Сколько дней делают ПЦР на гепатит С, зависит от используемого метода диагностики.

Исследование в большинстве случаев проводится за 1 день.

В некоторых случаях оно может занимать до 4 рабочих дней.

Расшифровка

Результаты качественного исследования на гепатиты могут быть двух видов:

  • положительные
  • отрицательные

 

То есть, вирус или обнаружен, или не обнаружен.

Если он обнаружен, это означает, что человек болен вирусным гепатитом С.

Если же вирус не обнаружен, это говорит либо о том, что он здоров, либо о недостаточной чувствительности метода.

Если это скрининговое исследование, скорее всего, дальше человека обследовать не будут.

Потому что он, скорее всего, действительно не болен.

А вот если имеются клинические признаки, указывающие на возможное развитие вирусного гепатита С, особенно на фоне имеющихся факторов риска, может проводиться повторная диагностика с использованием более чувствительных методов.

Высокочувствительным тестом считается тот, который способен выявить РНК вируса при вирусной нагрузке 25 МЕ/мл или меньше.

В норме РНК не должна определяться вообще ни в каком количестве.

Даже минимальная вирусная нагрузка говорит о болезни и является показанием к назначению лечения.

Иногда бывает так, что обычное количественное исследование ПЦР оказывается отрицательным.

А последующий высокочувствительный тест - положительный.

Так происходит потому, что он способен выявлять вирус в меньших концентрациях.

Немаловажно, через какое время после заражения приходит сдавать анализы.

Высокочувствительные тесты показывают инфицирование вирусом гепатита С уже с первых дней, ещё до окончания инкубационного периода.

Результаты с генотипированием показывают не только есть вирус или нет, но также его тип.

Например, вирус типа 3 или 5.

Указывается также подтип.

Сдача крови для исследования методом ПЦР имеет важнейшее значение в процессе лечения заболевания.

После инфицирования лечение проводят не сразу.

Особенно если инфекция протекает в легкой форме.

Потому что существует вероятность спонтанного излечения острого гепатита С.

Правда, она небольшая - всего 20-30%.

Срок наблюдения может составлять до 12 месяцев.

Если выздоровления нет, назначается лечение.

Перед этим обязательно проводится генотипирование.

Лучше всего на лечение отвечают пациенты с генотипами вируса 2 и 3.

Хуже всего лечатся гепатиты С типов 1 и 4.

Важно и определение вирусной нагрузки.

Если до начала количественный ПЦР показывает, что она составляет от 850 МЕ/мл и выше, это неблагоприятный прогностический признак.

Такие пациенты плохо отвечают на лечение.

ПЦР проводится и после терапии.

Критерием излеченности является исчезновение РНК из крови.

Если она вообще не определяется сразу после терапии, это полная ремиссия.

Об устойчивом вирусологическом ответе говорят, если через 6 месяцев после завершения терапии РНК вируса гепатита С не определяется.

Появление РНК после его исчезновения в результате лечения свидетельствует о рецидиве.

Если же РНК определяется всегда - до начала терапии и после неё - это говорит о неэффективности схемы лечения.

Существует также такое понятие как ранний вирусологический ответ.

Это снижение концентрации РНК вируса гепатита С в 2 раза в течение 3 месяцев лечения.

При обнаружении раннего ответа вероятность излечения очень высокая.

Таким образом, анализ помогает контролировать эффективность терапии не только после окончания курса.

Но и в процессе получения пациентом медикаментозного лечения.

Это дает возможность вовремя скорректировать схему, заменив препараты или добавив дополнительное лекарственное средство.

При 1 типе вируса количественный ПЦР проводят обязательно через 6 месяцев лечения.

Если РНК не снижается, то терапию прекращают в виду её неэффективности.

Если наблюдается вирусологический ответ, то терапию продлевают до 12 месяцев.

При типе 1 желательно осуществлять контроль через каждые 3 месяца терапии.

Раз в 2 недели сдавать биохимический анализ крови для определения уровня трансаминаз (оценка степени поражения печени).

При типах 2 и 3 промежуточный контроль часто не проводится.

ПЦР делают сразу после окончания курса, который длится 6 месяцев.

Гепатит С ПЦР отрицательный

Часто диагностика вирусного гепатита С проводится одновременно с использованием двух тестов - ПЦР и серологического исследования.

Анализ крови на антитела может быть положительный, а ПЦР - отрицательный.

Почему так происходит?

Если антитела есть, а РНК нет, скорее всего, человек здоров.

По всей видимости, он недавно прошел курс лечения.

Если после Тенофовира РНК вируса не обнаружено, это говорит о наступлении ремиссии.

При этом норма молекулярного исследования не исключает, что антитела остаются повышенными.

Потому что они не являются частью вируса.

Это факторы иммунной системой человека.

Они вырабатываются после инфицирования и длительно циркулируют в крови даже после выздоровления.

Серологические исследования нередко дают ложноположительные или ложноотрицательные исследования.

Ложноположительные результаты наблюдаются в 20% случаев.

Причиной их чаще всего бывает недавно перенесенная инфекция.

Реже - онкологические заболевания.

Ложноотрицательные результаты анализа крови на антитела к гепатиту С обычно обусловлены тем, что исследование проводится слишком рано.

Антитела начинают определяться не раньше, чем через месяц после заражения.

При необходимости проведения диагностики вирусного гепатита С, обращайтесь в нашу клинику.

У нас доступны самые современные диагностические исследования на эту инфекцию.

После диагностики вы можете пройти курс лечения под руководством опытного врача, если гепатит С будет обнаружен.

www.venerologia.ru

ПЦР на гепатит С

Полимеразная цепная реакция (сокращенно — ПЦР) — один из самых современных методов определения гепатита С в крови. Анализ ПЦР на гепатит С позволяет не только выявить болезнь, но еще и определить ее стадию, вне зависимости от срока заражения. Таким образом, вы будете осведомлены не только о наличии вируса, но и о степени развития болезни.

Преимущества анализа на ПЦР перед другими методиками диагностики

Антитела, присутствующие в крови человека, даже профессиональному врачу заметить непросто, особенно если их концентрация мала. Достоинство полимеразной цепной реакции состоит в том, что данная методика вычисляет вирус даже на самых ранних стадиях развития. Среди преимуществ этой методики диагностирования врачи особенно отмечают следующие:

  • она считается одной из самых точных, позволяет вычислить даже малую концентрацию антител в крови;
  • ПЦР-анализ показывает результаты даже спустя 7–8 дней после заражения, в отличие от общего и биохимического анализа крови;
  • для проведения необходима лишь кровь пациента, а значит, отпадает необходимость добывать ткани печени, как при другой эффективной методике диагностирования — биопсии;
  • по РНК вируса можно не только поставить точный диагноз, но еще и определить его стадию.

С помощью современных методик врачам удалось изучить РНК вируса гепатита С. При подозрении на такой диагноз специалисту необходимо взять кровь и провести качественный и количественный анализ ПЦР РНК вируса. Нужно понимать, в чем отличие между качественным и количественным анализом.

С помощью первого варианта удается поставить диагноз, а благодаря второму определяется стадия болезни. Так, если в крови присутствует РНК вируса, можно сказать, что человек страдает от гепатита. Однако лишь количественная диагностика поможет определить, когда произошло заражение и какое лечение подойдет человеку в данном случае.

Сама болезнь считается крайне коварной, ведь она может развиваться без видимых симптомов. Именно поэтому врачи всегда проводят лабораторную диагностику, изучая кровь, а также мочу и иногда кал пациента.

Если и после полимеразной цепной реакции остаются сомнения в правильности поставленного диагноза, врач будет вынужден прибегнуть к биопсии печени. Эта методика подразумевает забор печеночной ткани с помощью специальной иглы и ее тщательной изучение.

Качественный анализ ПЦР

Обнаружение РНК гепатита С в крови — дело не самое простое, поскольку здесь важна внимательность и опытность врача. Часто специалисту не удается заметить малую концентрацию вируса, из-за чего ставится ложноотрицательный результат. Кстати, такой ложный диагноз не является редкостью. По каким еще причинам он может оказаться неправильным:

  1. Если кровь забиралась в неподобающих условиях.
  2. Прием «Гепарина» пациентом в большинстве случаев приводит к ложным результатам исследования.
  3. Попадание в биологический материал веществ из окружающей среды тоже может обернуться постановкой ложного положительного диагноза.

Именно поэтому забор крови нужно осуществлять осторожно и внимательно. При таком исследовании никаких особых мер соблюдать не нужно. Обычно врачи рекомендуют избегать приема большого количества медикаментов перед проведением анализа и отказ от алкоголя непосредственно перед исследованием.

При помощи ПЦР гепатит С не всегда удается выявить. Несмотря на точность этой методики, она дает результаты лишь спустя неделю после заражения. Если же проводить диагностирование раньше, велик риск получения отрицательного результата.

Если врачу удается обнаружить антитела даже в минимальной концентрации, то ставится положительный результат. Для его подтверждения врач может взять кровь на биохимический анализ. При наличии антител гепатита С биохимический анализ должен показать повышение билирубина в крови и присутствие ферментов АСТ и АЛТ.

Если по результатам ПЦР вирус есть, а остальные анализы показывают его отсутствие, врач может направить человека на биопсию. Данное заболевание считается крайне опасным и коварным, поэтому от гепатолога требуется максимальная точность.

Количественный анализ и его расшифровка

Если у пациента не обнаружено РНК вируса, он может вздохнуть свободно. Однако если полимеразная цепная реакция дала положительный результат, врачу придется сделать еще и количественный анализ.

Расскажем, что такое количественный анализ крови при гепатите. Его смысл в том, что врач определяет концентрацию вируса в крови. Чем выше эта концентрация, тем опаснее и запущеннее заболевание.

Как расшифровывается такой анализ:

  1. Если в крови не обнаружено вируса, значит, человек абсолютно здоров.
  2. Если концентрация РНК менее 600 МЕ/мл, значит, заболевание находится на ранней стадии развития, а заражение произошло недавно.
  3. Если концентрация составляет не более 800 МЕ/мл, то речь идет о запущенном гепатите, который может вскоре перейти в хроническую стадию.
  4. Если концентрация вируса выше 800–1000 МЕ/мл, то велика вероятность острой стадии развития болезни. Почти наверняка болезнь вышла на хроническую стадию и поразила большую часть тканей печени.

При гепатите С ПЦР отрицательный может быть показан из-за индивидуальных особенностей организма человека. Так, если человек принял большое количество лекарств перед сдачей анализов или использует гормональные препараты, результаты могут оказаться неточными. Особой трактовки требуют анализы, взятые у женщины, которая находится на первом триместре беременности. В таком случае ПЦР анализ может показать слишком большую концентрацию вируса.

Все эти нюансы должны учитываться при диагностике гепатита. Хороший врач может заметить антитела даже в небольшой концентрации и поставить диагноз.

При гепатите В, А ПЦР диагностика обычно не проводится. Это исследование актуально именно для болезни группы С.

С помощью анализа можно определить антитела даже в малой концентрации на ранней стадии развития проблемы. Однако ПЦР диагностику на гепатит С должен проводить исключительно опытный врач, обладающий достаточной квалификацией для правильной трактовки результатов.

vrednye.ru

Исследование ПЦР|Расшифровка результатов анализа крови на гепатит С

Очень популярным в современном мире медицины стала аббревиатура ПЦР. Расшифровка звучит как полимеразная цепная реакция. Этот метод используют для получения большого количества информации о состоянии клеток органов. В случае с диагностикой гепатитов результаты ПЦР будут одними из последних слов в окончательной постановке диагноза.

все об анализе пцр для обнаружения гепатита с

В чем же особенность ПЦР-анализа? В том, что с помощью специальных реакций можно увеличить в объеме часть среды в исследуемом образце. Соответственно, и количество микроорганизмов, заключенных в ней. И тогда упрощается задача обнаружить вирус, чтобы констатировать его наличие или отсутствие. Но уже на основании очевидного, в прямом смысле слова, факта.

Именно поэтому роль ПЦР в диагностическом направлении неоспоримо важна. Исследование крови ПЦР дает четкие ответы на такие вопросы, как присутствует ли вирус в организме, какой он и насколько «запущена» ситуация – на каком этапе находится заражение.

Если обратиться к истории, то ПЦР-метод был создан в конце 20 века в США биохимиком Кэри Муллисом. Спустя 8 лет учёный получил Нобелевскую премию – настолько значимым для микробиологии и медицины было признано это открытие. Мгновенно изменилась ситуация по качеству диагностики гепатита С, различных патологий пищеварительной и выделительной систем. Своевременность выявления подобных болезней высоко актуальна – печень в качестве фильтра вылавливает отравляющие вещества, таким образом принимая первый дар в случае поражения желудочно-кишечного тракта на себя. По этой причине при первых симптомах, характерных для гепатитов, может быть проведено ПЦР-исследование.

Важно! Средство от болезней печени, которое помогло Читать далее →

Анализ ПЦР на гепатит С

Современные способы определить вирус гепатита С - это иммунограмма и метод взятия биоптата для проведеия гистологического исследования – биопсия печени. Так выявляется поражение клеток органа и фиксируется наличие/отсутствие антител. Но случаются и ошибочные выводы, которые легко проверить через ПЦР, которая остаётся самой точной из диагностических методик.

Для проведения исследования необходимо образце ткани создать цепочку РНК (рибонуклеиновой кислоты) вируса. При инфицировании гепатитом С частицы вируса, хоть его мишенью и является печень, всё равно разносятся по кровяному руслу. Если в особой среде эти частицы встретятся с определёнными молекулами, то выстроится комплементарный вирус РНК. Концентрация рибонуклеиновой кислоты многократно повысится, и её можно будет исследовать. Именно так устанавливается зараженность вирусом гепатита С. Но проводить анализ целесообразно, когда в крови больного уже обнаружили антитела к гепатиту С, что и становится обоснованным поводом для продолжения диагностики.

На бланке с данными о результатах ПЦР может быть два результата: слово «обнаружено» подтверждает, что РНК вируса есть в крови. «Не обнаружено» - не отрицает наличие вируса в крови, но говорит об его минимальной концентрации. Может быть и другой вердикт - на бланке ставится запись «недостаточно материала». В этом случае необходимо повторно пройти исследование.

анализ пцр

Врачи всегда обращают особенное внимание пациентов с подозрением на гепатит, что «не обнаружено» - не дает 100% гарантию «чистоты» печени. Недавнее инфицирование практически незаметно даже для лабораторных методов, концентрация вируса в крови ещё слишком мала, чтобы стать заметной. Но со временем вирус размножится.

Результаты ПЦР со знаком «+» подтверждают высокую концентрацию вируса гепатита в крови. Это говорит о течении инфекционного процесса.

Впрочем, как и любое другое исследование, в случае с ПЦР-методов, возможно получить ложноположительные и ложноотрицательные результаты ПЦР. Препятствовать синтезу цепочки РНК во время реакции могут некоторые элементы, которые оказались в среде исследования. А если цепочка не синтезировалась, то лаборант выносит «не обнаружено». Такие факторы могут задержать своевременную диагностику гепатита.

Одним из препятствий для синтеза РНК является гепарин. Он препятствует свёртываемости крови. Ошибка может случиться и в том случае, если образец крови пациента хранился или транспортировался с нарушением правил. Ошибочный вердикт положительного характера может быть вынесен, если кровь больного поместили в нестерильную пробирку. Также ошибка возможна, если пациент инфицирован другими типами гепатита.

Изменить итоги исследования может повышенное содержание в крови пациента криоглобулинов. Поэтому иногда врачи советуют перед ПЦР-исследованием провести пробу на наличие этих веществ. Тогда можно будет спрогнозировать их влияние на результат ПЦР.

Когда врач уверен в том, что ПЦР – исследование проведено качественно, без ошибок и искажений, а результат его положительный, то можно уверенно ставить диагноз и начинать терапию. Но следует понимать, что в отличие В-формы, которую можно полноценно вылечить, гепатит C – это пожизненный диагноз. Излечиться от него нельзя. В отдельных тяжёлых случаях течения болезни может даже потребоваться трансплантация печени.

Внимание! Для лечения и профилактики болезней печени наши читатели успешно используют метод Читать далее →

Количественный анализ ПЦР

С помощью этого вида диагностики можно узнать сразу два фактора: есть ли в крови РНК вируса гепатита С и насколько сильно поражена печень. Результаты ПЦР выносятся в особых единицах измерения – количестве копии на миллилитр крови (копии/мл). Впрочем, иногда в некоторых стандартах объем единиц вируса измеряют в МЕ/мл. В этом случае 1МЕ/мл = 4 копиям/мл.

Для вынесения положительного результата нужно, чтобы количество вирусных единиц было больше, чем 800 000 МЕ/мл или 3 000 000 копий/мл. Если же полученное значение меньше 400 000 МЕ/мл, то ставится отрицательный результат. Но в бланке ответа эти значения проставляют не всегда. Некоторые лаборатории просто пишут, что количество частиц вируса превышает норму или ниже неё. Либо вируса не обнаружено вообще. Если в бланке указано, что РНК ниже диапазона измерения, это означает что частицы вируса гепатита С в крови есть, но их количество крайне мало. В этом случае через какое-то время врач может назначить повторное исследование. Если картина изменится и концентрация вируса вырастет, значит можно делать вывод о развитии болезни.

Первое исследование назначают перед стартом лечения. Последующие количественные анализы ПЦР берут каждые 10-14 дней. Это необходимо для понимания эффекта от терапии – нужно отслеживать изменение концентрации вируса в крови. Самое важное исследование – то, которое производят на 12 неделе терапии.

При всей своей информативности ПЦР-исследование не требует специальной подготовки. Не нужно накладывать на пациента ограничений в еде, поде или наполненности некоторых органов. Единственная рекомендация - необходимо за пару часов до забора крови воздержаться от курения и употребления спиртного. Забор крови осуществляют из вены.

Полезное видео

Будем признательны, если вы поделитесь данной публикацией в социальных сетях. Спасибо!

kzdorovie.ru