ПЦР-анализ на гепатит С. Гепатит с пцр


ПЦР гепатита С | Компетентно о здоровье на iLive

HCV в материале в норме отсутствует.

В отличие от серологических методов диагностики вирусного гепатита С, где обнаруживают антитела к HCV, ПЦР позволяет выявить наличие непосредственно РНК HCV и количественно выразить его концентрацию в исследуемом материале. Тест имеет видовую специфичность и высокую чувствительность: десяти молекул РНК HCV в исследуемом материале достаточно для его выявления. Обнаружение антител к HCV подтверждает лишь факт инфицирования пациента, но не позволяет судить об активности инфекционного процесса (о репликации вируса) и прогнозе заболевания. Кроме того, антитела к HCV обнаруживают как в крови больных острым и хроническим гепатитом, так и у тех пациентов, кто болел и выздоровел, а нередко антитела в крови появляются только через несколько месяцев после появления клинической картины заболевания, что затрудняет диагностику. Обнаружение HCV в крови с использованием ПЦР - более информативный метод диагностики. Выявление в ПЦР РНК HCV свидетельствует о виремии, позволяет судить о репликации вируса в организме и служит одним из критериев эффективности противовирусной терапии. Обнаружение РНК HCV с помощью ПЦР на ранних этапах развития вирусной инфекции на фоне полного отсутствия каких-либо серологических маркёров может служить самым ранним свидетельством инфицирования. Однако изолированное выявление РНК HCV на фоне полного отсутствия каких-либо других серологических маркёров не может полностью исключить ложноположительный результат ПЦР. В таких случаях необходима всесторонняя оценка клинических, биохимических и морфологических исследований с повторным неоднократным подтверждением наличия инфекции ПЦР.

Большое значение имеет применение метода ПЦР у больных с хроническим вирусным гепатитом С, так как у большинства из них отсутствует корреляция между наличием вирусной репликации и активностью печёночных ферментов. В таких случаях только ПЦР позволяет судить о наличии вирусной репликации, особенно если конечный результат выражают количественно. В большинстве случаев заболевания исчезновение из сыворотки крови РНК HCV происходит позже нормализации печёночных ферментов, поэтому их нормализация не может служить основанием для прекращения противовирусного лечения.

Практически важно для выявления РНК HCV исследовать методом ПЦР не только сыворотку крови, но и лимфоциты, гепатобиоптаты. Вирусы удаётся обнаружить в 2-3 раза чаще в ткани печени, чем в сыворотке крови. При оценке результатов исследования сыворотки крови на РНК HCV следует помнить, что виремия может носить флюктуирующий характер (как и изменение активности ферментов). Поэтому после положительных результатов исследования ПЦР можно получить отрицательный результат и наоборот. В таких случаях для разрешения возникающих сомнений лучше исследовать гепатобиоптаты.

Обнаружение РНК HCV в материале с помощью ПЦР используют в следующих целях:

  • разрешение сомнительных результатов серологических исследований;
  • дифференциация вирусного гепатита С от других форм гепатита;
  • выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесённой инфекцией или контактом; определение стадии инфицированности новорождённых от серопозитивных по HCV матерей;
  • контроль эффективности противовирусного лечения.

Пациенты с подозрением на вирусный гепатит С:

  • доноры;
  • лица с факторами риска;
  • лица с повышенной активностью АЛТ;
  • пациенты с острым гепатитом

Все вышеизложенные особенности оценки результатов и подходов к диагностике HCV с использованием ПЦР относятся и к другим инфекциям.

Метод ПЦР позволяет не только выявить РНК HCV в исследуемом материале, но и установить его генотип. Определение генотипа вируса имеет большое значение для подбора пациентов с хроническим вирусный гепатитом С к проведению лечения интерфероном-альфа и рибавирином. Лабораторные показания к лечению хронического вирусного гепатита С интерфероном альфа следующие:

  • повышение активности трансаминаз;
  • наличие РНК HCV в крови;
  • генотип 1 HCV;
  • высокая виремия в крови (более 8×105 копий/мл).

В настоящее время можно количественно определять содержание РНК HCV в сыворотке крови методом ПЦР, что имеет большое значение для конроля за лечением интерфероном альфа. Уровень виремии оценивают следующим образом: при содержании РНК HCV от 102 до 104 копий/мл - слабая; от 105 до 107 копий/мл - средняя, выше 108 копий/мл - высокая. При эффективном лечении уровень виремии снижается.

ilive.com.ua

ПЦР на гепатит С — качественный анализ

ПЦР — полимеразная цепная реакция, которая используется в молекулярной биологии. При помощи данного лабораторного исследования предоставляется возможность не только выявить наличие в организме вируса, но и определить его тип и количество. ПЦР на гепатит С широко используется при диагностике инфекционных заболеваний ЖКТ (язв, колитов, гепатитов и т. д.).

Наибольшую нагрузку при развитии болезней ЖКТ испытывает печень, которая осуществляет детоксикацию организма. Она выполняет роль фильтра, выводя из организма субстраты, излишки которых приводят к интоксикации и возникновению серьезных проблем со здоровьем.

Часто именно печень подвергается воздействию вирусных заболеваний, среди которых преобладает гепатит. Если своевременно его не выявить и не начать лечение, то это может привести к печальным последствиям, вплоть до летального исхода. Поэтому при появлении у человека симптомов гепатита врачи назначают анализ ПЦР, который помогает быстро диагностировать болезнь и выявить природу ее происхождения.

Анализ ПЦР

Сегодня диагностика гепатита С происходит при помощи иммунограммы и биопсии печени. Эти исследования помогают определить антитела в организме, которые приводят к поражению клеток печени. Но данные методы не позволяют определить наличие болезни на все 100 %. Наиболее точную информацию о наличии вируса гепатита С дает лабораторное исследование ПЦР.

Принцип ПЦР

Этот анализ проводится в определенных условиях, благодаря которым имеется возможность выстроить цепь РНК в биологическом материале. Происходит это из-за того, что когда организм поражает вирус, его частицы все равно попадают в кровь. И при их соединении со специальными молекулами в определенной среде начинает выстраиваться комплементарный вирусный РНК.

При его последующем исследовании удается выявить вирус гепатита С в организме и процесс разрушения печени, если он начался. Делают ПЦР только после того, как в крови пациента обнаруживаются специфические антитела, которые вырабатываются иммунной системой при поражении организма вирусом.

Как только анализ ПЦР проводится, на бланке указывается: РНК «обнаружено» или «не обнаружено». Однако в некоторых ситуациях указывается «недостаточно материала», и здесь требуется повторная сдача анализа.

Если концентрация вирусных частиц в исследуемом материале меньше минимального количества, то это указывает на отсутствие гепатита С. Однако отрицательный результат на РНК может наблюдаться и тогда, когда организм подвергся совершенно недавно заражению: частиц вируса настолько мало, что тест-система их просто не смогла обнаружить.

Если анализ РНК положительный, это свидетельствует о том, что количество вирусных частиц в исследуемом материале превышает нижний порог, что указывает на наличие инфекционного процесса. Следует отметить, что высокие показатели анализа ПЦР уже являются доказательством развития болезни и говорят о необходимости проведения лечения.

Анализ ПЦР иногда может быть ложноположительным и ложноотрицательным. Последний наблюдается тогда, когда в среде, в которой проводится исследование, находятся компоненты, подавляющие образование цепи РНК вируса. В результате этого не удается своевременно выявить гепатит, что приводит к его дальнейшему прогрессированию.

Повлиять на результат анализа может гепарин, который находится в крови пациентов. Также ошибочный результат может являться следствием несоблюдения условий транспортировки биологического материала и его хранения.

Ложный положительный результат анализа ПЦР наблюдается в том случае, если биологический материал был помещен в загрязненную пробирку либо при наличии вируса гепатита в организме, но другого типа.

ПЦР

На качественность результата анализа ПЦР может повлиять высокая концентрация криоглобулинов в крови. Поэтому, чтобы получить более точные ответы, рекомендуется перед анализом сдать кровь на выявление данного вещества. Это позволит заранее определить возможные искажения результатов анализа.

После того как качественный анализ ПЦР будет сделан и по итогам исследования в крови обнаружится высокая концентрация частиц вируса, пациенту назначают специфическое лечение. Однако следует понимать разницу между гепатитом В и гепатитом С. Если от первого имеется возможность вылечиться, то от второго — нет. И чаще всего он требует пересадки печени.

Количественный анализ ПЦР

Количественный анализ ПЦР дает возможность выявить частицы вируса в крови и определить степень поражения печени. Это более качественный анализ, который дает достоверные результаты. Итоги исследования выражаются в единицах измерения: количестве копий на мл (копии/мл).

Количественный анализ ПЦР проводят перед тем, как начинается лечебная терапия. Затем его проводят каждые 10–14 дней, чтобы следить за эффективностью проводимого лечения. Оценка на 12 неделе лечения является наиболее показательной.

Для проведения такого анализа не требуется какой-либо специальной подготовки. Единственное, что необходимо сделать пациенту, это, естественно, отказаться от алкоголя и курения за один-два часа до взятия биологического материала. Для данного исследования берется кровь из вены.

В разных лабораториях существуют разные значения исследований. В некоторых используются копии/мл, а в некоторых — МЕ/мл: 4 копии/мл равняются 1 МЕ/мл.

Положительным результат РНК считается в том случае, если виремия превышает 800 000 МЕ/мл или 3 000 000 копий/мл. Отрицательным ответ является, когда данные показатели не превышают порога 400 000 МЕ/мл.

При этом в бланке анализа итог проводимого исследования может быть указан не в цифрах, а в виде значения: ниже, выше нормы, не обнаружено и т. д. Значение «РНК ниже диапазона измерения» указывает на то, что частицы вируса присутствуют в исследуемом материале, но в очень маленьких количествах. Если при последующих исследованиях данные значения будут возрастать, это уже свидетельствует о прогрессировании болезни.

Если в анализе указано «РНК не обнаружено», то это говорит о том, что вирус гепатита С и других его типов отсутствует и человек здоров.

ПЦР — один из самых достоверных анализов. При помощи его можно не только выявить уже прогрессирующий гепатит, но и начальную стадию его развития, что позволяет своевременно начать лечение и предотвратить быстрое развитие патологии.

apechen.ru

ПЦР на гепатит С

Полимеразная цепная реакция (сокращенно — ПЦР) — один из самых современных методов определения гепатита С в крови. Анализ ПЦР на гепатит С позволяет не только выявить болезнь, но еще и определить ее стадию, вне зависимости от срока заражения. Таким образом, вы будете осведомлены не только о наличии вируса, но и о степени развития болезни.

Преимущества анализа на ПЦР перед другими методиками диагностики

Антитела, присутствующие в крови человека, даже профессиональному врачу заметить непросто, особенно если их концентрация мала. Достоинство полимеразной цепной реакции состоит в том, что данная методика вычисляет вирус даже на самых ранних стадиях развития. Среди преимуществ этой методики диагностирования врачи особенно отмечают следующие:

  • она считается одной из самых точных, позволяет вычислить даже малую концентрацию антител в крови;
  • ПЦР-анализ показывает результаты даже спустя 7–8 дней после заражения, в отличие от общего и биохимического анализа крови;
  • для проведения необходима лишь кровь пациента, а значит, отпадает необходимость добывать ткани печени, как при другой эффективной методике диагностирования — биопсии;
  • по РНК вируса можно не только поставить точный диагноз, но еще и определить его стадию.

С помощью современных методик врачам удалось изучить РНК вируса гепатита С. При подозрении на такой диагноз специалисту необходимо взять кровь и провести качественный и количественный анализ ПЦР РНК вируса. Нужно понимать, в чем отличие между качественным и количественным анализом.

С помощью первого варианта удается поставить диагноз, а благодаря второму определяется стадия болезни. Так, если в крови присутствует РНК вируса, можно сказать, что человек страдает от гепатита. Однако лишь количественная диагностика поможет определить, когда произошло заражение и какое лечение подойдет человеку в данном случае.

Сама болезнь считается крайне коварной, ведь она может развиваться без видимых симптомов. Именно поэтому врачи всегда проводят лабораторную диагностику, изучая кровь, а также мочу и иногда кал пациента.

Если и после полимеразной цепной реакции остаются сомнения в правильности поставленного диагноза, врач будет вынужден прибегнуть к биопсии печени. Эта методика подразумевает забор печеночной ткани с помощью специальной иглы и ее тщательной изучение.

Качественный анализ ПЦР

Обнаружение РНК гепатита С в крови — дело не самое простое, поскольку здесь важна внимательность и опытность врача. Часто специалисту не удается заметить малую концентрацию вируса, из-за чего ставится ложноотрицательный результат. Кстати, такой ложный диагноз не является редкостью. По каким еще причинам он может оказаться неправильным:

  1. Если кровь забиралась в неподобающих условиях.
  2. Прием «Гепарина» пациентом в большинстве случаев приводит к ложным результатам исследования.
  3. Попадание в биологический материал веществ из окружающей среды тоже может обернуться постановкой ложного положительного диагноза.

Именно поэтому забор крови нужно осуществлять осторожно и внимательно. При таком исследовании никаких особых мер соблюдать не нужно. Обычно врачи рекомендуют избегать приема большого количества медикаментов перед проведением анализа и отказ от алкоголя непосредственно перед исследованием.

При помощи ПЦР гепатит С не всегда удается выявить. Несмотря на точность этой методики, она дает результаты лишь спустя неделю после заражения. Если же проводить диагностирование раньше, велик риск получения отрицательного результата.

Если врачу удается обнаружить антитела даже в минимальной концентрации, то ставится положительный результат. Для его подтверждения врач может взять кровь на биохимический анализ. При наличии антител гепатита С биохимический анализ должен показать повышение билирубина в крови и присутствие ферментов АСТ и АЛТ.

Если по результатам ПЦР вирус есть, а остальные анализы показывают его отсутствие, врач может направить человека на биопсию. Данное заболевание считается крайне опасным и коварным, поэтому от гепатолога требуется максимальная точность.

Количественный анализ и его расшифровка

Если у пациента не обнаружено РНК вируса, он может вздохнуть свободно. Однако если полимеразная цепная реакция дала положительный результат, врачу придется сделать еще и количественный анализ.

Расскажем, что такое количественный анализ крови при гепатите. Его смысл в том, что врач определяет концентрацию вируса в крови. Чем выше эта концентрация, тем опаснее и запущеннее заболевание.

Как расшифровывается такой анализ:

  1. Если в крови не обнаружено вируса, значит, человек абсолютно здоров.
  2. Если концентрация РНК менее 600 МЕ/мл, значит, заболевание находится на ранней стадии развития, а заражение произошло недавно.
  3. Если концентрация составляет не более 800 МЕ/мл, то речь идет о запущенном гепатите, который может вскоре перейти в хроническую стадию.
  4. Если концентрация вируса выше 800–1000 МЕ/мл, то велика вероятность острой стадии развития болезни. Почти наверняка болезнь вышла на хроническую стадию и поразила большую часть тканей печени.

При гепатите С ПЦР отрицательный может быть показан из-за индивидуальных особенностей организма человека. Так, если человек принял большое количество лекарств перед сдачей анализов или использует гормональные препараты, результаты могут оказаться неточными. Особой трактовки требуют анализы, взятые у женщины, которая находится на первом триместре беременности. В таком случае ПЦР анализ может показать слишком большую концентрацию вируса.

Все эти нюансы должны учитываться при диагностике гепатита. Хороший врач может заметить антитела даже в небольшой концентрации и поставить диагноз.

При гепатите В, А ПЦР диагностика обычно не проводится. Это исследование актуально именно для болезни группы С.

С помощью анализа можно определить антитела даже в малой концентрации на ранней стадии развития проблемы. Однако ПЦР диагностику на гепатит С должен проводить исключительно опытный врач, обладающий достаточной квалификацией для правильной трактовки результатов.

www.vrednye.ru


Смотрите также