ПЦР-исследование на гепатит С: виды, показания, расшифровка. Пцр гепатит


Качественный анализ ПЦР на гепатит С

Не все знают, для чего используют метод диагностики ПЦР на гепатит С. Одной из широко распространенных групп заболеваний являются инфекционные болезни органов желудочно-кишечного тракта. Чаще всего страдают желудок (язвы), кишечник (колиты, энтериты) и печень (гепатиты).

Анализ ПЦР

На печень среди всех вышеперечисленных органов возлагается наибольшая нагрузка. В организме роль печени крайне важна:

  1. Практически все реакции метаболизма протекают в печени (именно здесь образуются все виды жизненно необходимых компонентов, позволяющих организму полноценно функционировать).
  2. Печень является главным органом, осуществляющим детоксикационную функцию. С ее помощью (в частности, через желчь) производится удаление многих субстратов, способных вызвать интоксикацию и привести к тяжелым последствиям.

К сожалению, многие люди не следят за своим здоровьем, из-за чего начинает страдать печень. Обычно развиваются гепатиты различной этиологии (вирусные, токсические).

Определение гепатита

Пути передачи гепатитаВирусные гепатиты занимают важное место среди заболеваний печени. Тяжесть протекания заболевания, сложность лечения выносят их на первое место среди патологии другой природы этого органа.

Все гепатиты подразделяются на острые и хронические. К острым относят гепатит А и В. Среди хронических на первом месте гепатит С.

Данное заболевание вызывается вирусом гепатита С. Характерной чертой является то, что заболевание долгое время может протекать без каких-либо клинических проявлений.

Передается оно преимущественно через кровь. С током крови вирус заносится в печень, где начинает размножаться в ее клетках. В результате накопления вирионов происходит разрушение зараженного гепатоцита. В ответ на это начинают вырабатываться антитела, которые начинают атаковать остатки гепатоцитов. Из-за этого со временем нарабатывается пул против клеток печени, что усугубляет течение заболевания.

Из-за того, что болезнь протекает малосимптомно или бессимптомно, а клинические признаки появляются только при значительном поражении клеток, эта болезнь требует создания методов диагностики, позволяющих выявить ее наличие и принять соответствующие меры.

Диагностика гепатита С: качественный и количественный анализы

Проведение ПЦР при гепатите СВ настоящее время для диагностики гепатита С используются такие методы, как биопсия печени, иммунограмма.

Они позволяют непосредственно определить наличие пораженных гепатоцитов (исследование биоптата печени) или специфических антител против пораженных клеток (иммунограмма). Однако существует метод, который позволяет достоверно определить наличие самого вируса. Это ПЦР — полимеразная цепная реакция.

Суть этого метода заключается в том, что в определенных условиях происходит наработка цепей РНК. Это происходит из-за того, что в крови или исследуемом биоптате имеются фрагменты вирусной частицы. При соединении их с некоторыми молекулами в среде происходит синтез цепей, комплементарных вирусной РНК. При их последующем анализе и сопоставлении с известной нуклеотидной последовательностью вируса гепатита С удается выявить, имеется ли в организме данный вирус и присутствует ли поражение печени.

ПЦР проводится после выявления в крови специфических антител против вируса гепатита. После проведения теста выносится результат — РНК “обнаружено” или “не обнаружено”. Изредка он может гласить “недостаточно материала” — в таком случае необходим повторный анализ на гепатит С.

Если количество вирусных частиц меньше необходимого минимального количества, то можно говорить о том, что гепатита нет, а минимальные количества генетического материала могли быть “спутаны” из-за мимикрии генетического материала или некоторых последовательностей нуклеотидов, которые случайно смогли совпасть с таковой у вируса.

Дифференциально-диагностические особенности вирусных гепатитов

  1. При ПЦР отрицательный результат может наблюдаться, когда в самом деле имеются вирусные частицы в крови, однако их настолько мало (заражение произошло недавно или проведению анализа предшествовала длительная и интенсивная противовирусная терапия), что тест-система просто не смогла нормально определить их концентрацию. РНК — «не обнаружено».
  2. Если ПЦР имеет положительный результат, то вирусных частиц в крови наблюдается настолько много, что их количество превышает нижний порог чувствительности тест-системы. В этом случае высок риск развития инфекционного процесса (или он уже присутствует в довольно запущенной стадии). Обычно высокое количество вируса уже является показанием к лечению и последующей пересадке печени.

Иногда тест может становиться ложноположительным или ложноотрицательным.

Ложноотрицательный результат ПЦР гепатита наблюдается в том случае, когда в среде для проведения реакции присутствуют некоторые компоненты, которые ингибируют образование копий вирусной частицы. Из-за этого не удается получить истинной картины состояния крови, что способствует пропуску вируса и прогрессированию заболевания. На реакцию может повлиять и присутствие в крови гепарина (за счет снижения относительной вязкости крови). Неправильная интерпретация анализа возможна и тогда, когда не были соблюдены условия транспортировки и хранения исследуемого материала.

Ложноположительные результаты, когда диагностируется гепатит С, ПЦР чаще всего дает при загрязнении пробирки или рабочей среды. Кроме того, положительные результаты могут наблюдаться при наличии и вирусов гепатита других групп (за счет перекрестного реагирования).

Качественный анализ ПЦР на выявление гепатита С

Медикаментозное лечение гепатита СНаличие в крови большого количества криоглобулинов тоже непосредственно влияет на проведение ПЦР. Из-за этого перед проведением анализа на гепатит С обязательно нужно определить в крови их концентрацию, чтобы выявить искажение результата заранее и предотвратить его.

После проведения указанных тестов становится понятно, имеются ли в крови вирусные частицы. При их определении рекомендовано немедленно начинать противовирусную терапию с целью замедления прогрессирования процесса. В отличие от гепатита В, полного излечения от гепатита С не наблюдается; болезнь лишь переходит в латентную стадию и начинает протекать медленнее. Поражение печени при этом неизбежно. На последней стадии процесса, когда печень уже не справляется со своей функцией, может потребоваться ее трансплантация.

Лечение проводится преимущественно двумя препаратами — интерфероном и рибавирином.

Доказана их эффективность в замедлении процесса поражения гепатоцитов. Попутно обязательно назначается инфузионная терапия с целью облегчения работы печени.

Все пациенты, у которых наблюдалось увеличение количества вирусных частиц в крови, обязательно находятся на учете у гепатолога. Несколько раз в год им рекомендуется проходить профилактический осмотр с целью определения прогрессирования процесса и своевременного выявления показаний к трансплантации. Кроме того, можно использовать и гепатопротекторы, хотя мнения врачей несколько расходятся. Одни считают, что данные препараты позволяют приостановить процесс и защитить еще не пораженные гепатоциты; другие же убеждены, что толку от их приема нет и следует проводить интенсивную противовирусную терапию.

Таким образом, гепатит С относится к категории заболеваний, выявление которых составляет некоторые трудности. Совершенствование методов диагностики, а также своевременные профилактические осмотры позволят снизить частоту развития данного заболевания. Немаловажной является и профилактика данной болезни. Следует тщательно избегать контактов с кровью, отказаться от приема наркотиков, только тогда это заболевание будет искоренено. Главное в профилактике и лечении — сознательное отношение пациента к своему здоровью.

ogepatite.ru

Анализ ПЦР на гепатит С

Полимеразной цепной реакцией (ПЦР) в молекулярной биологии называют экспериментальный метод выявления вирусов. Он позволяет значительно увеличивать концентрации определенных фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в пробах биологического материала, что дает возможность их детерминировать (распознавать) и подсчитывать.

Проведение анализа выполняют следующим образом. Генетический материал (пробу крови), который потенциально может включать искомый ген, вносится в пробирку. Туда же помещают праймеры –синтезированные химическим путем отрезки небольшой длины искомого гена.

В сосуд также добавляют ДНК или РНК полимеразу, она способна выстроить цепочку нуклеиновой кислоты, которая полностью идентична первоначальной. В полученный состав вводят и набор из четырех свободных нуклеотидов – особого строительного материала для РНК или ДНК, один их которых содержит радиоактивные частицы фосфора.

пцр лаборатория

Полученную смесь подогревают до 95–96°С, из-за чего две спирали ДНК, которые в обычном состоянии переплетены между собой, расплетаются. Затем препарат охлаждают, в это время праймеры сами прикрепляются к искомому участку генома вируса, не давая РНК (либо ДНК) вновь сформировать двойную спираль.

В процессе охлаждения полимераза отыскивает свободную цепочку нуклеотидов. Для функционирования данного фермента необходима именно одиночная цепь нуклеотидов. Поскольку полимераза проскальзывает по цепи ДНК (как кольцо по веревке), на двойной спирали она не способна работать.

После этого выполняют повторный цикл нагревания, из-за чего между собой разделяются цепочки нуклеотидов. При каждом из таких циклов ПЦР количество в пробе именно искомого гена гепатита возрастает в геометрической прогрессии, а остальной генетический материал продуцируется (вырастает) линейно.

После очистки раствора от остатков нуклеотидов и разделения при помощи электрофореза цепочек ДНК по параметру молекулярной массы, можно легко определить: есть ли искомый ген в исследуемом образце или нет.

Преимущества ПЦР

Лабораторное исследование методом ПЦР позволяет получить даже больше информации, чем просто присутствие РНК вируса. Определяя параметр уровня радиоактивного излучения, есть возможность выявить, какое количество генетического материала содержалось изначально в исследуемом образце. В случае гепатита – определить показатель уровня вирусной нагрузки.

Еще одним достоинством этого метода является очень высокая степень чувствительности реакции ЦР. Она гораздо выше, чем у классических методов выявления вирусов. В идеальном варианте, для того чтобы выявить искомый ген, для ПЦР достаточно всего одного вируса в пробе.

Кроме этого, ПЦР полностью специфична. Ее праймеры создаются таким образом, чтобы они полностью соответствовали уникальным участкам искомых генов, которых нет ни у какой другой последовательности. Как уникальны отпечатки пальцев, так и в каждом гене есть уникальные последовательности из нуклеотидов.

Качественный анализ ПЦР

Качественный анализ позволяет выявить только факт наличия вируса в крови. Этот тест нужно проводить для всех пациентов, у которых были обнаружены в крови антитела к гепатиту С. Его результатом может быть лишь одно значение из двух: «обнаружено» либо «не обнаружено». У здорового человека в норме (референсное значение) должно быть «не обнаружено».

Есть и специальная интерпретация таких результатов проведенного качественного исследования:

  • Результат «обнаружено». Это означает, что в анализируемом образце взятого биологического материала был найден фрагмент РНК, который специфичен для вируса гепатита С. Следовательно, есть факт инфицирования пациента вирусом гепатита С. Если результатом качественного ПЦР является «обнаружено», то это свидетельствует о том, что вирус размножается и в это время инфицирует в организме новые клетки печени.
  • Результат «не обнаружено». Такой вердикт говорит о том, что в анализируемом образце полученного биологического материала в данной лаборатории не обнаружен фрагмент РНК, который специфичен для вируса гепатита С. Либо же концентрация РНК инфекции-возбудителя в данном образце была ниже границы чувствительности теста.

В острой фазе РНК вируса гепатита С такие качественные исследования по методике ПЦР могут выявить уже спустя 1–2 недели непосредственно после инфицирования организма, то есть задолго до появления антител к самому гепатиту.

взятие крови

Недостоверные результаты анализов такого исследования могут быть получены при:

  • загрязненном биоматериале;
  • присутствии в крови пациента гепарина;
  • наличии в образце химических или белковых субстанций (ингибиторов), которые влияют на различные компоненты ПЦР.

Для проведения качественного анализа ПЦР специальной подготовки пациента к исследованию не требуется. В качестве материала используется венозная кровь.

Оценка результатов

Качественные тесты ПЦР имеют определенную степень чувствительности, и в зависимости от точности проведения исследований и уровня аппаратуры в лаборатории могут варьироваться в пределах от 10 до 500 МЕ/мл.

Это обозначает, что если вирус в пробе крови присутствует в очень малой концентрации (меньше порогового значения чувствительности данной лаборатории), то у больного пациента может быть определен результат как «не обнаружено». Из-за этого при проведении качественного анализа ПЦР с низким уровнем виремии (малой концентрацией вируса), к примеру, для больных, проходящих лечение противовирусной терапией, очень важно знать и порог чувствительности данной диагностической системы.

Варианты диагностических систем

Для контролирования вирусологического ответа, при проведении противовирусного лечения рекомендуется использовать диагностические системы с порогом чувствительности не меньше 50 МЕ/мл. Этим критериям соответствуют, к примеру: анализаторы Cobas Ampicolor ВГС-Теst (c точностью 50 МЕ/мл), а также РеалБест РНК ВГС (с чувствительностью 15 МЕ/мл).

Согласно рекомендациям ВОЗ, для установления окончательного диагноза гепатит С, необходимо основываться лишь на основании трехкратного обнаружения РНК вируса С в пробах сыворотки крови у больного, при отсутствии других разновидностей маркеров гепатита.

Кроме методов ПЦР для выявления у пациентов РНК ВГС также применяют исследование ТМА (метод транскрипционной амплификации). Он обладает лучшим порогом чувствительности (5–10 МЕ/мл), но в нашей стране такой метод тестирования пока не очень распространен.

Диапазон выявляемых модификаций вирусов

Такое качественное определении в сыворотке крови наличия РНК вируса гепатита С позволяет определять несколько генотипов этого вируса. В настоящее время науке известно более шести генотипов этого вируса, а также около 10 субтипов данного заболевания.

В нашей стране распространены вирусы 1, 2, 3 генотипов. Лаборатории могут выявлять следующие генотипы: 1а и 1в, 2а, 2в и 2с, а также 3, 4, 5а и 6 независимо от субтипов. Для всех модификаций вирусов специфичность определения составляет 100%.

много колб

Количественный анализ ПЦР

При помощи количественного теста ПЦР определяется уровень концентрации вируса гепатита в пробах крови (вирусная нагрузка). Данный тест на виремию (концентрацию вируса) позволяет определить количество единиц определенного генетического материала (самой вирусной РНК), которую выявляют в определенном объеме. В данном случае определяют его концентрацию в 1 мл, что соответствует 1 куб. см.

Количественные параметры анализа выражаются в цифрах, для этого используют как единицы измерения международные единицы (МЕ) на миллилитр (мл), обозначающийся как МЕ/мл. Сейчас в некоторых лабораториях количество вируса может определяться и в других единицах измерения: количестве копий на мл, обозначается как копии/мл.

  • Сроки проведения.Для гепатита С такой количественный анализ ПЦР делают непосредственно перед началом проведения терапии. Затем на 1-й, 4-й, 12-й и 24-й неделях. Оценивание на 12-й неделе является показательным, оно позволяет определить эффективность проведения терапии.
  • Подготовка к анализу. Для проведения количественного анализа ПЦР специальной подготовки пациента к исследованию не требуется. За полчаса до взятия проб не следует курить. В качестве лабораторного материала используется венозная кровь.

Оценка результатов

Для разных лабораторных тест-систем существуют разные коэффициенты перевода этого показателя в МЕ/мл. В среднем берут параметр пересчета, при котором 4 копии/мл=1 МЕ/мл. То есть к примеру, если лаборатория выдает результат анализа ПЦР 2,4*106 копий/мл, то этот параметр нужно разделить на 4 и получим 6*105 МЕ/мл.

Высокой считается уровень нагрузки в 800000 МЕ/мл, это примерно соответствует показателю в 3000000 копий/мл. Низкая виремия, согласно данным некоторых авторов, соответствует параметрам количественного ПЦР ниже 400000 МЕ/мл.

В результате проведения количественного теста могут быть поставлены окончательные результаты не в виде цифрового значения, а: «ниже диапазона измерений», или же «не обнаружено».

подготовка к анализу

  • Оценка: «ниже диапазона измерений». Это свидетельствует о том, что количественный тест не смог выявить вирусные РНК гепатита С, однако сам вирус в организме присутствует в очень малых концентрациях. Об этом говорит дополнительно проведенный качественный тест, подтверждающий сам факт присутствия вируса.
  • Оценка: «не обнаружено». Такой результат свидетельствует, что количественный тест не обнаружил в пробе РНК вируса.

Параметр вирусной нагрузки, прежде всего, определяет степень инфекционности болезни, уровень «заразности» больного. Чем выше у пациента показатель концентрации вируса, тем больше вероятность риска передачи его другим людям. К примеру, при половых контактах с больным человеком, либо вертикальным путем. Такой количественный показатель также помогает определить эффективность проведения лечения больного.

Проведение количественного анализа ПЦК важно для противовирусной терапии, оценивания ее успешности и планирования сроков продолжительности курса. Так, при быстром ответе организма на лечение и низкой степени виремии, срок терапии может быть и сокращен.

При медленном снижении параметра количественного ПЦР противовирусную терапию следует продлить либо модифицировать. Если уровень вирусной нагрузки низкий, то это благоприятный фактор проведения терапии, если же повышенный, то применяемый метод лечение неэффективен и следует менять препараты или методы их использования.

veneradoc.ru

Количественный анализ ПЦР на гепатит B: расшифровка, норма

Наличие современных препаратов против гепатита B (HBV) с четкими показаниями для их назначения требует точной и быстрой верификации диагноза. Однако ввиду скудных клинических данных на первых неделях болезни и ограниченности иммуноферментных методов анализа, скорость постановки диагноза снижается.

Присутствие маркеров анти-HBc IgM, HBsAg, анти-HBc, HBeAg, анти-HBe позволяют подтвердить HBV или установить факт перенесенной болезни. Но определить присутствие активных вирусных частиц в крови и посчитать их число на момент проведения исследования можно посредством ПЦР — количественного real-time теста по выявлению гепатита B. Метод, в сравнении с иммуноферментными способами диагностики, решает диагностические проблемы и позволяет прогнозировать течение болезни на фоне приема противовирусных препаратов.

Основы диагностики заболевания

Диагностика гепатита B основывается на оценке клинических проявлений, иммуноферментных и инструментальных методов исследований. Заболевание протекает в острой фазе после инкубационного периода и, в зависимости от дозы инфекции и эффективности лечения, переходит в хроническую стадию. Главной целью лечения остается предотвращение хронизации, то есть элиминация всех вирусных частиц из крови. Клиническая норма течения болезни — излечение без последующей виремии.

Факт устранения инфекции необходимо доказать количественным методом исследования.

Поскольку любой качественный иммуноферментный анализ позволяет диагностировать HBV косвенно, то есть не показывают наличие возбудителя во внутренней среде организма, а характеризует иммунный ответ на инфекцию, то контроль эффективности терапии и факт излечения становится труднодоказуемыми. Потому пациенту с гепатитом B или с наличием диагностических критериев в его пользу должна проводиться полимеразная цепная реакция с целью количественного определения числа вирусных частиц в крови. Диагностическая норма — это отсутствие копий ДНК инфекта.

Описание диагностического метода

Высокочувствительный метод ПЦР-диагностики гепатита В относится к категории генно-инженерных молекулярно-биологических исследований. Посредством него определяется количество вирусной ДНК в биологическом материале пациента и допустимая норма. По полученным результатам устанавливается число вирусных частиц в единице объема. Материалом для диагностического теста является венозная кровь пациента. Забор желателен натощак из-за возможного влияния хилезной сыворотки на результат исследования.

Полученные результаты необходимо предоставить врачу для интерпретации и определения дальнейшей тактики. Самостоятельная расшифровка не представляет диагностической ценности.

Значимость результата числа вирусных частиц, полученного метода ПЦР, превышает значение иммуноферментных исследований. Поскольку анализ в режиме real-time показывает присутствие возбудителя заболевания в крови, его информативность выше прочих. Если ИФА свидетельствуют только о наличии антител, что наблюдается с 4-х недель инкубационного периода и сохраняется более 8 недель после элиминации вируса из крови, то полимеразная цепная реакция однозначно подтверждает активное течение заболевания или его излечение, характеризует динамику назначенной терапии.

Полимеразная цепная реакция с количественным определением частиц возбудителя решает диагностические вопросы в пользу прекращения лечения в связи с выздоровлением или продолжения терапии из-за ее недостаточной эффективности. Метод максимально специфичен в отношении вируса HBV и отличается приемлемой погрешностью.

Показания и цели выполнения

Количественный анализ гепатита B является наиболее достоверным и позволяет подтвердить данные, полученные иммуноферментными методами. Он назначается при:

  1. получении положительного диагностического результата ИФА;
  2. лечении пациента с установленным диагнозом вирусного поражения печени;
  3. при диагностике гепатитов смешанной этиологии;
  4. при необходимости определения вирусной нагрузки у пациента.

Поскольку более широко в практике инфекциониста применяется метод иммуноферментного анализа, то часть пациентов с легким течением болезни можно лечить и не прибегая к необходимости подсчета вирусной нагрузки. Но ПЦР общепринято считается «золотым стандартом» диагностики в гепатологии, так как из-за однозначности своего результата снимает ряд организационных вопросов. Поэтому направление пациента на количественный анализ преследует следующие цели:

  • получение данных о числе вирусных частиц в крови пациента;
  • подтверждение острого течения гепатита и своевременной верификации хронизации заболевания;
  • постоянное выявление латентных вирусоносителей с положительными ИФА-тестами, мониторинг их виремии;
  • принятие решения о назначении антивирусного лечения, его комбинирования и прекращения.

Наиболее значимой целью применения количественного ПЦР-теста на выявление HBV является определение возможных комбинаций лечения. В случаях с высокой вирусной нагрузкой результат анализа дает специалисту возможность приступить к комбинированию препаратов. В ходе терапии на основании результата ПЦР легко определить эффективность назначенного фармакологического лечения. Руководствуясь только данными иммуноферментных методов, нельзя своевременно определить факт излечения и его текущую эффективность. Поэтому количественный real-time тест — необходимый анализ перед началом лечения острого гепатита, латентного вирусоносительства с высокой виремией и хронического HBV.

Интерпретация результатов количественного ПЦР-теста

Расшифровка результатов количественного ПЦР-теста должна проводиться лечащим врачом пациента. Необходимо дать оценку диагностического показателя и определить терапевтическую тактику.

Стандартный анализатор способен выдавать количественный показатель, который отражает число копий вирусной ДНК, присутствующих в исследуемой венозной крови. Единицы измерения — копии/мл, МЕ/мл (копии на миллилитр, международные единицы на миллилитр). Расшифровка результатов приведена в таблице с указанием разных единиц измерения.

Копии/млМЕ/млХарактеристикаТактика лечения
Концентрация вируса ниже диапазонного показателя, нормаОпределение тактики по клиническим данным, результатам биохимического, иммуноферментного, инструментального обследования.
54Умеренная виремияТактика определяется результатами биопсии печени, биохимического анализа.
>105>2*104Высокая виремияПоказана противовирусная терапия, умеренный риск хронизации.
>1*108>4,8*107Показатель выше диапазона значений анализатораПроведение комбинированной противовирусной терапии с мониторингом виремии. Высокий риск хронизации HBV.

Анализатор способен выдавать один качественный показатель «не обнаружено». Он означает, что ДНК вируса в исследуемом материалы не были определены, либо их число находится ниже чувствительности аппарата (диагностическая норма).

Анализатор распределяет значения в линейном диапазоне концентраций. У современных аппаратах он определен детектирующим амплификатором и находится в пределе от 750 до 1*108 копий на миллилитр. В международных единицах на миллилитр — от 360 до 4.8*107.

Спорные моменты интерпретации результатов

Расшифровка показателей, которые определяет количественный ПЦР-анализатор, позволяет сделать единственно возможное заключение о состоянии пациента. Однако существует значение, вызывающее неоднозначные трактовки. Результат «не обнаружено» может свидетельствовать как о полном отсутствии вирусных частиц гепатипа В, так и о их низком числе, то есть ниже линейного диапазона, улавливаемого детектирующим амплификатором. Поскольку анализ проводится после положительного иммуноферментного теста, то вероятность контакта с вирусом велика. Это либо условная норма (поствакцинальная реакция), либо малая виремия после заражения. Тактика наблюдения, как и при умеренной виремии, должна включать анализ аминотрансфераз и ультрасонографию печени с повторным проведением ИФА.

В прочих клинических ситуациях расшифровать количественный тест ПЦР — значит решить диагностические сложности, возникшие из-за недостатков ИФА-исследований. Это — окончательный метод, позволяющий решить, присутствует ли вирус в крови пациента, способен ли он вызвать развитие хронического гепатита, или это норма клинического течения. При этом возможность выявления ДНК HBV в инкубационном периоде до момента синтеза антител гарантирует раннее выявление. Это важное диагностическое преимущество, которое в значительной степени влияет на прогноз при неосторожном очевидном заражении. Подобное может наблюдаться при заражении оперирующего хирурга или пациента при переливании крови.

propechen.com

расшифровка количественного и качественного анализа, норма

Диагностика гепатита включает целый комплекс анализов для определения наличия вируса в крови. Одним из способов обнаружения заболевания является такой метод исследования, как ПЦР на гепатит С. Что это такое, почему анализ ПЦР на гепатит так важен, как его проводят и расшифровывают?

Что это такое

Полимеразная цепная реакция, или ПЦР, используется для диагностики язвы желудка, колита, энтерита. Но главное ее преимущество заключается в том, что она помогает обнаружить в организме как сам вирус гепатита C, так и антитела к нему, которые обладают способностью не вызывать реакции иммунной системы из-за их способности к мутации.

Исследование и его суть заключаются в создании определенных условий, при которых происходит цепная реакция РНК гепатита. Если при их сопоставлении с нуклеотидной последовательностью вируса гепатита C выявляются совпадения, это свидетельствует о том, что в крови имеются вирусные частицы, а в печени происходят процессы распада. Если количество вируса ниже определенного уровня, выносится отрицательный диагноз, если выше – положительный.

Важно понимать, что в первом случае не исключается недавнее инфицирование или мощная противовирусная терапия, являющиеся факторами, снижающими концентрацию опасных частиц, и анализ ПЦР на гепатит не работает. Высокий же уровень содержания вируса в организме в большинстве случаев сигналит о том, что в печени вот-вот начнется инфекционный процесс. Не исключено, что заболевание находится в запущенном состоянии и понадобится серьезная терапия, вплоть до пересадки органа.

Существует два вида исследования крови методом ПЦР при гепатите: количественный анализ и качественный анализ.

Вирус гепатита Враг печени номер один

Количественный ПЦР, как упомянуто выше, определяет концентрацию РНК вируса гепатита. Кроме того, он способен дать информацию об интенсивности, с которой развивается патология, и эффективности назначенного лечения. Количественный анализ на гепатит C крайне важен, поскольку фиксирует резистентность к действию противовирусных препаратов и позволяет скорректировать терапию.

После того как больной пройдет курс лечения, ПЦР помогает определить дальнейший порядок назначений. В некоторых случаях выявляется необходимость дополнительных обследований. Например, если уровень АЛП повышен (но не более, чем в 2 раза в течение полугода), а расшифровка анализа указывает на вирусную нагрузку выше 105 МЕ/мл, пациенту назначается биопсия. Если количественный анализ на ПЦР выявляет сильное воспаление и фиброз, больному прописывают курс лечения противовирусными препаратами.

В ситуациях, когда большое количество вирусных частиц сочетается с высоким показателем АЛТ, пациенту незамедлительно должно быть назначено лечение без проведения дополнительных диагностическим мероприятий.

ТЕСТ: В каком состоянии ваша печень?

Пройдите этот тест и узнайте есть ли у вас проблемы с печенью.

Начать тест

Качественно расшифровать показатели при количественном анализе крови на гепатит могут только квалифицированные и опытные специалисты, а современные технологии помогают сделать это при низкой концентрации вируса в крови.

Качественный анализ ПЦР направлен на определение и подтверждение фактического присутствия вируса в организме. Его проводят при обнаружении в крови антител к гепатиту. Именно качественный анализ на гепатит гарантирует точность результата на 100% и позволяет поставить диагноз на ранних стадиях заболевания, что дает возможность начать борьбу с гепатитом уже в течение первых недель после заражения и повышает шансы на полное выздоровление (в случае с заболеванием типа B).

Печень Страдает не только печень, но и соседние органы

Преимущества ПЦР

При исследовании методом ПЦР и расшифровке анализа крови на гепатит можно также определить генотип возбудителя заболевания. Всего существует 6 генотипов вируса и большое количество субтипов, однако в нашем регионе распространение получили 1, 2 и 3 генотипы.

Другими преимуществами данного вида диагностики являются:

  • высокая точность полученных показателей и низкая вероятность ошибки в них;
  • высокий уровень чувствительности к вирусным частицам в крови;
  • возможность выявления сразу нескольких возбудителей;
  • диагностика болезнетворных внутриклеточных микроорганизмов, обладающих высокой антигенной изменчивостью;
  • работа с расшифровкой анализа на гепатит позволяет обнаружить скрытые текущие инфекции.

Кому назначают

Анализ ПЦР на гепатит обязательно сдают следующие категории людей:

  • беременные женщины;
  • сотрудники учреждений здравоохранения;
  • потенциальные доноры крови и органов;
  • те, кто имеют характерные признаки заболевания;
  • ВИЧ-инфицированные лица;
  • наркозависимые;
  • лица, ведущие беспорядочную половую жизнь.
Беременная женщина на приеме у врача Планируя ребенка, необходимо сделать анализ на гепатит

Как проводится анализ и требуется ли к нему подготовка

Забор крови для ПЦР-исследования производится из вены. Как правило, это происходит утром до того, как человек поел, поскольку после приема пищи должно пройти минимум 8 часов. В крайних случаях кровь могут взять на исследование днем или вечером, но временной зазор между анализом и приемом пищи должен составлять не менее 5 часов.

Человеческий фактор может количественно отразиться на результатах: их точность в некоторых случаях снижается со 100% до 95%, поэтому к сдаче крови необходимо заблаговременно готовиться. Качество биоматериала для анализа будет соответствующим при следовании пациентом следующим правилам:

  • перед сдачей крови можно пить только чистую воду;
  • за двое суток до проведения исследования нужно отказаться от приема жареной и жирной пищи, а также алкогольных напитков;
  • за сутки до посещения лаборатории следует прекратить прием лекарственных средств. В случае если это не представляется возможным, об этом в обязательном порядке необходимо предупредить лаборанта и лечащего врача;
  • накануне нужно избегать стрессовых ситуаций и физических нагрузок;
  • не следует проходить ультразвуковое, рентгенологическое и инструментальное исследования незадолго до сдачи крови;
  • в течение часа до анализа необходимо воздержаться от курения;
  • за 20 минут до сдачи крови нужно отвлечься, успокоиться и выровнять дыхание.

Если исследование проходит ребенок до 5 лет, родители должны проследить, чтобы он пил кипяченую воду каждые 10 минут в течение получаса до забора биоматериала.

Расшифровка полученных данных

Расшифровка анализа может быть представлена словами (в случае качественного исследования), например, «не обнаружено» или «ниже диапазона изменений». В первом случае, это свидетельствует о том, что инфекция не обнаружена. Во втором – что вирус присутствует, но в незначительном количестве. Такая ситуация требует проведения повторного исследования.

Вирус Вирус типа С

Вирусная нагрузка определяется по количеству инфекционного РНК и обозначается как МЕ/мл или копии/мл.

Нормальным показателем (нормой) количественного анализа на гепатит C является диапазон от 1,8х102 до 2,4х107 МЕ/мл.

Концентрация вируса в крови может быть:

  • низкой: от 600 МЕ/мл до 3х104/мл;
  • средней: от 3х104 МЕ/мл до 8х105 МЕ/мл;
  • высокой: более 8х105 МЕ/мл.

Количественны и качественны анализ ПЦР на гепатит позволяет определить наличие вируса в организме и уровень его концентрации. Полиразмерная цепная реакция способна диагностировать заболевание на ранних стадиях, но для этого необходимо, чтобы больные как можно раньше обращались в медицинские учреждения за помощь и строго следовали рекомендациям лечащего врача.

zpechen.ru

Анализ ПЦР на гепатит С: количественный и качественный

Главная » Гепатит » Как расшифровывается анализ ПЦР на гепатит С и где его можно сдать?анализ ПЦР на гепатит С

Медики недаром называют гепатит С «ласковым убийцей», поскольку характерные симптомы этого заболевания проявляются очень поздно, когда патологический процесс зашёл уже очень далеко. Но жизнь пациента можно значительно продлить, если вовремя выявить вирус с помощью метода диагностики  – ПЦР анализ на гепатит С.

Это самый надёжный и точный метод обнаружения вирусной инфекции. Анализ ПЦР (полимеразная цепная реакция)позволяет с высокой точностью определить конкретный тип вируса, тем самым подтвердив или опровергнув диагноз вирусного гепатита.

Существует два варианта ПЦР – анализ количественный и качественный. Количественное определение вирусов предполагает отдельную методику, отличающуюся от качественного определения вирусов тем, что в этом случае исследование ПЦР строится на искусственном увеличении количества вирусов в исследуемом материале.

Что это за анализ – ПЦР на гепатит С?

анализ ПЦР на гепатит С

Для выполнения анализа на гепатит методом ПЦР необходим исследуемый материал, в случае вирусного гепатита – кровь пациента, которую подвергают определённым воздействиям.

Суть этих воздействий в том, что в кровь добавляют специальным образом помеченный генетический материал и ферменты. Если искомый вирус присутствует в материале, то ферменты вступают в реакцию, и количество вирусной РНК постепенно нарастает. Методика подготовки исследуемой крови к анализу позволяет значительно ускорить этот процесс.

Результаты анализа определяются с помощью химической реакции, которая позволяет визуально отобразить появление в материале большого количества вирусной РНК. Если же искомой РНК в крови нет, то будет отрицательный результат анализа ПЦР – гепатит С не обнаружен. В этом случае никаких изменений на финальном этапе не произойдёт.

Количественный анализ предполагает отдельную методику исследования, позволяющую выявить вирусную нагрузку. Следует сразу сказать, что количество вирусов в определённом объёме крови не влияет на тяжесть заболевания, но влияет на вероятность заражения вирусом других людей. Поэтому так важно соблюдать меры профилактики, чтобы исключить заражение вирусом и предотвратить развитие гепатита и тяжелых последствий для здоровья. Медики рекомендуют периодически проверять кровь на вирусы гепатита (1 раз в год), чтобы своевременно распознать инфекцию и начать лечение.

Лаборатории, проводящие анализ ПЦР на вирус гепатита С и другие вирусные заболевания есть во всех крупных городах, поэтому доступность анализа не является проблемой. Сегодня анализ ПЦР можно в короткие сроки сделать не только в поликлинике, но и в лаборатории, оказывающей подобные услуги населению на коммерческой основе. Причем в этом случае, обойдется без потери времени в длинных очередях, да и результат можно получить гораздо быстрее.

Как он сдаётся?

К какому врачу нужно обращаться при заболеваниях печени

Чтобы провести анализ необходимо сдать кровь из вены. От пациента требуется уведомить врача о сопутствующих заболеваниях – это может повлиять на время назначения анализа. Женщинам необходимо назначить сдачу анализа так, чтобы она не выпадала на месячные. Подготовка к обследованию может занять определенное время и состоять из следующих этапов:

  • Анализ на ПЦР можно назначать только через две недели после окончания курса лечения антибиотиками или противовирусными препаратами.
  • За 3-4 дня до анализа необходимо отказаться от физиопроцедур и диагностических манипуляций. Если необходим курс лечения, то анализ крови ПЦР на гепатит С проводится после его окончания. Также необходимо на это время отказаться от курения и продуктов, содержащих каротин (жёлтые овощи и фрукты).
  • За сутки до анализа следует ограничить физическую нагрузку до необходимого минимума, отказаться от жирной, острой, солёной и копчёной пищи, алкоголя, крепкого кофе.
  • Последний приём пищи перед сдачей анализа допустим не более чем за 8-9 часов до процедуры, кровь сдают натощак. Именно поэтому забор крови обычно назначают утром до завтрака.

Правильная подготовка к анализу необходима для того, чтобы его результаты получились достоверными, при нарушении этих правил возможны диагностические ошибки.

Расшифровка анализа

Расшифровка анализа ПЦР на гепатит С

Для точной диагностики очень важно правильно интерпретировать результат. Знать, как расшифровывается анализ, важно не только врачу, но и пациенту. Это поможет правильно подготовиться к анализу, избежать диагностических ошибок, сделает лечение более понятным для пациента.

Если речь идёт о качественном анализе ПЦР на гепатит С, то здесь всё просто.

  • В норме вирусы в крови не обнаруживаются, и результат отрицательный.
  • Положительный результат означает наличие вируса, и, следовательно, подтверждает заболевание гепатитом.
  • Ложноположительный результат возможен при нарушении методики забора и хранения крови, ложноотрицательный – на ранних стадиях заболевания, когда количество вирусных тел ниже, чем позволяет определить чувствительность метода.

В сомнительных случаях ПЦР могут назначить повторно через 2-3 недели.

Количественный анализ ПЦР на гепатит С определяет не только наличие или отсутствие вируса, но и вирусную нагрузку. Диапазон результатов здесь гораздо шире. Значение «ниже уровня диагностических измерений» означает, что вирус отсутствует или присутствует в очень малых количествах. Такой результат в сочетании с отрицательным показателем качественного анализа считается нормой.

Шкала перевода количества вирусных тел в международные единицы может отличаться в разных лабораториях. Поэтому лучше всего поинтересоваться, где сдать анализ ПЦР на гепатит С у своего лечащего врача. Если врач знает, какой именно шкалой пользуется лаборатория, это значительно облегчит ему интерпретацию результатов и назначение лечения.

На достоверность результатов во многом влияет степень повреждения печени непосредственно перед анализом, уровень сахара в крови на момент сдачи анализа, соблюдение медицинским персоналом правил забора и хранения крови.

Количественный тест необходим в первую очередь для оценки эффективности лечения, а качественный – для определения самого факта наличия болезни. Чувствительность качественного теста выше, поэтому его нужно делать для подтверждения отрицательного результата количественного теста.

Расшифровка анализа ПЦР на гепатит С достаточно проста – при эффективном лечении вирусная нагрузка постепенно снижается. Её повышение говорит о неэффективности лечения, несоблюдении режима или очень высокой активности вируса. Если вирусная нагрузка оказалась ниже диагностического диапазона, то качественный анализ подтвердит или опровергнет отсутствие вируса в крови. К сожалению, полное излечение от вирусного гепатита С на сегодняшний день невозможно.

Средние цены

Цена на анализ ПЦР может очень сильно варьироваться в зависимости от используемой диагностической системы, уровня подготовки персонала, престижности лаборатории, места проживания пациента и прочих факторов. В среднем цена качественного анализа начинается от 500р, количественного – от 2000. Учитывая, что делать количественный анализ необходимо раз в несколько месяцев, только на определение эффективности лечения может уйти достаточно большая сумма.

pechenzdrav.ru

ПЦР-исследование на гепатит С: виды, показания, расшифровка

анализ крови на гепатит С

Вирусный гепатит С — тяжелое заболевание, которое протекает с поражением печени. У восьмидесяти процентов больных оно переходит в хроническую форму. Вирус размножается в клетках печени — гепатоцитах — и вызывает их гибель. Отмершая ткань замещается очагами соединительной ткани, развивается фиброз.

По мере развития фиброза печень оказывается неспособна выполнять свои функции, начинается цирроз печени, который опасен своими осложнениями: повышением давления в системе портальной вены, желудочно-кишечными кровотечениями, нарушением свертывания крови, изменениями психики из-за повреждения ядер головного мозга токсическими продуктами.

Причина заболевания — заражение вирусом из семейства Flaviviridae, который относится к типу РНК-вирусов. Это значит, что генетический материал, по которому синтезируются белки возбудителя, закодирован в молекуле рибонуклеиновой кислоты. Заражение происходит через кровь, половым путем, и от беременной женщины к плоду. К сожалению, между инфицированием и началом выработки антител может пройти достаточно большое количество времени — от двух недель до шести месяцев. Это не дает определить заражение методом иммуноферментного анализа и начать лечение на ранних стадиях.

Что такое анализ ПЦР?

Взятие крови из вены

ПЦР — метод молекулярного анализа, который позволяет обнаружить генетический материал возбудителя уже на первой неделе после инфицирования с помощью полимеразной цепной реакции. Исследование обладает высокой специфичностью, точностью, и позволяет не только определить наличие или отсутствие вируса, но и его концентрацию и генотип.

Для исследования берут кровь пациента, в которой потенциально может находиться РНК вируса. В кровь добавляют праймеры — искусственно синтезированные участки искомого гена малой длины, и РНК-полимеразу — специальный фермент, который многократно увеличивает количество генетического материала возбудителя. С помощью специального аппарата проводят несколько циклов нагревания и охлаждения. Затем материал анализируют и сопоставляют с известными генами вируса, на основе чего делают заключение о наличии или отсутствии заражения.

Виды ПЦР-анализа на гепатит С

молекула ДНК

Различают три вида ПЦР-анализа:

  1. Качественный анализ ПЦР. Первая стадия исследования. Он позволяет выявить генетический материал вируса в крови.
  2. Количественный анализ ПЦР. Позволяет определить вирусную нагрузку — концентрацию генетического материала возбудителя в одном миллилитре крови. Это исследование проводят перед началом терапии, а затем на первой, четвертой, двенадцатой и (если курс длительный) двадцать четвертой неделе лечения, чтобы оценить его эффективность.
  3. Генотипирование. Возбудитель гепатита С часто и быстро мутирует. На планете было обнаружено семь вариантов генотипа этого вируса. В России распространены первой, второй и третий тип. Каждый из генотипов обладает различной устойчивостью к терапии, например эффективность лечения первого типа составляет шестьдесят процентов, а для второго и третьего этот показатель достигает восьмидесяти пяти. Поэтому, для того чтобы подобрать подходящие препараты и назначить курс лечения достаточной длительности необходимо точно определить, каким типом вируса заражен пациент.

Показания к ПЦР-анализу на гепатит С

гепатолог с фонендоскопом

ПЦР-исследование назначают в следующих случаях:

  • контакт с больным человеком, при котором могло произойти заражение;
  • положительный результат иммуноферментного анализа;
  • признаки цирроза печени: изменение размеров печени, увеличение селезенки, появление на животе подкожного венозного сплетения;
  • появление симптомов поражения печени: боли в правой части живота, пожелтение кожных покровов;
  • повышение активности АЛТ и АСТ в биохимическом анализе крови;
  • перед началом лечения для определения вирусной нагрузки;
  • с целью контроля за эффективностью антивирусной терапии;
  • после окончания лечения для контроля за рецидивами;
  • при наличии диагностированного гепатита B, для исключения смешанного поражения печени.

Расшифровка ПЦР-исследования на гепатит С

образцы крови

Расшифровкой ПЦР-анализа и иммуноферментного анализа на гепатит С должен заниматься гепатолог или инфекционист. Анализировать результаты ПЦР необходимо в комплексе с данными биохимического анализа крови, биопсии и УЗИ. Только квалифицированный врач сможет проанализировать результаты исследований и, основываясь на них, назначить правильное лечение.

  • Расшифровка качественного анализа.

Обнаружено

В анализируемом биологическом материале обнаружен генетический материал возбудителя. Инфицирование подтверждено.

Не обнаружено

Инфицирование отсутствует, либо количество РНК возбудителя ниже границы чувствительности.

 

  • Расшифровка количественного анализа.

Не обнаружено

Нормальный показатель для здоровых людей. Означает, что в исследуемом материале отсутствует РНК гепатита С, либо его концентрация ниже порога чувствительности исследования.

До 1,8*10^2 МЕ/мл

Концентрация РНК ниже диапазона количественного определения. Такие результаты интерпретируют очень осторожно, соотносят их с данными других исследований, часто проводят повторное исследование.

До 8*10^5 МЕ/мл

Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается низким. Обычно снижение количества вируса означает, что терапия идет успешно.

Больше 8*10^5 МЕ/мл

Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается высоким.

Больше 2,4*10^7 МЕ/мл

Количество РНК выше верхнего предела диапазона количественного определения. Делать выводы о степени вирусной нагрузки при таком результате нельзя. Обычно в таких случаях тест повторяют с разведением образца крови.

 

  • Расшифровка генотипирования.

Обнаружена РНК определенного генотипа

В биоматериале обнаружен вирус гепатита С определенного генотипа и субтипа. Результат кодируется римскими цифрами и латинскими буквами, например — 1а, 2b. Всего существует семь генотипов и шестьдесят семь субтипов, однако в России встречаются только три первых типа.

Обнаружена РНК вируса гепатита С

В крови обнаружена РНК редкого для России генотипа, который нельзя отнести к первому, второму или третьему типу. Необходимы дополнительные исследования.

Не обнаружено

Данный результат говорит о том, что пациент здоров, или о том, что колчество РНК возбудителя слишком мала.

 

Возможна ситуация, когда ПЦР-анализ на гепатит С отрицательный, а иммуноферментный анализ распознает антитела против вируса. Это значит, что пациент переболел гепатитом С в острой форме и излечился самостоятельно. Примерно двадцать случаев инфицирования заканчиваются самопроизвольным излечением, если организм пациента оказывает достаточное сопротивление инфекции.

Несмотря на то, что ПЦР — высокоточный анализ, его результаты могут быть искажены в следующих ситуациях:

  • кровь транспортировалась в лабораторию в ненадлежащих условиях, был нарушен температурный режим;
  • образец биоматериала был загрязнен;
  • в крови находились остаточные следы гепарина и других антикоагулянтов;
  • в исследуемом веществе оказались ингибиторы — вещества, которые замедляют или останавливают полимеразную цепную реакцию.

Преимущества ПЦР перед другими методами

исследование состояния печени

  1. Диагностика на ранних стадиях. ПЦР обнаруживает генетический материал возбудителя заболевания. С помощью иммунофлюоресцентного анализа можно определить только иммуноглобулины — вещества, которые организм вырабатывает в ответ на инфекцию. В случае заражения гепатитом С промежуток между заражением и началом иммунного ответа может составлять несколько недель и месяцев, в это время ИФА будет неэффективна. ПЦР даст ответ уже на первой неделе после заражения.
  2. Низкая вероятность ошибки. В исследуемом материале определяют участок генетического материала, который характерен только для одного вида возбудителей. Это позволяет исключить ложные результаты. При ИФА возможны ошибки, так как один и тот же вид антител может выделяться против разных вирусов — такие антитела называют перекрестными.
  3. Высокая чувствительность. ПЦР позволяет обнаружить РНК возбудителя даже в минимальных количествах. Это дает возможность выявить скрытые инфекции.

Как подготовиться к сдаче крови для ПЦР-исследования

кровь на исследование ПЦР на гепатит С

Для ПЦР-анализа на гепатит С собирают венозную кровь. Обычно из вены пациента за один раз берут две порции крови: первую отправляют на ПЦР, а вторую на ИФА. Это делают для того чтобы более точно оценить, насколько сильно пациент заражен вирусом, и как иммунитет борется с ним.

Обычно от пациента требуют соблюдения следующих правил:

  • анализ крови сдают с утра;
  • перерыв между последним приемом пищи и сдачей крови должен составлять восемь-десять часов;
  • за два-три дня до анализа нужно отказаться от жареной и жирной пищи, и алкоголя;
  • в течение двадцати четырех часов перед анализом пациент должен избегать физических нагрузок: не переносить тяжестей, не посещать спортзал или бассейн.

hepatit.care

Анализ на гепатит в методом пцр. Анализ на гепатит. LuchshijLekar.ru

Гепатит В

ГЕПАТИТ В - острое или хроническое заболевание печени, вызываемое вирусом гепатита В (Hepatitis В virus, HBV) и протекающее в различных клинико-морфологических формах: от бессимптомных до злокачественных (цирроз печени, гепатоцеллюлярная карцинома). Заражение ВГВ происходит от «здоровых» вирусоносителей с нераспознанными хроническими или острыми формами гепатита В при переливании крови и ее компонентов, при медицинских манипуляциях и сексуальных контактах, во время тесных бытовых контактов. Реже вирус может передаваться от инфицированной матери к ребенку во время родов или после.

Вирус гепатита В отличается чрезвычайно высокой устойчивостью к различным физическим и химическим факторам: низким и высоким температурам, многократному замораживанию и оттаиванию, длительному воздействию кислой среды. Он сохраняется при комнатной температуре в течение 3 мес. а в заморожен-ном виде - 15-20 лет.

Диагностика гепатита В включает в себя ряд анализов крови. При положительных результатах на опреде-ление серологические маркеров вирусного гепатита В (HBsAg) методом иммуноферментного анализа необходимо сдать кровь на гепатит В для обнаружения ДНК вируса методом полимеразно-цепной реакции (ПЦР).

В медицинском центре «Биомедика» можно сдать анализы на гепатит В метотом ПЦР:

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДНК ГЕПАТИТА В методом ПЦР - это основной метод диагностики гепатита В, который подтверждает наличие вируса гепатита В в исследуемом материале (цельная кровь, сыворотка, плазма, биоптаты печени) и устанавливает патогенез заболевания.

  • Для ранней диагностики острого вирусного гепа­тита В (ДНК вируса гепатита В - самый ранний маркёр при острой инфекции).
  • Исследования при HBsAg-негативной инфекции.
  • Обследования лиц, входящих в группу риска.
  • Для выявления ведущего вируса при смешанной этиологии.
  • Выявление стадии активной репликации вируса при хроническом состоянии.
  • Контроль проводимой терапии.
  • Цирроз печени.
  • Слабость, недомогание, быстрая утомляемость, снижение аппетита, тошнота, тяжесть в правом подреберье, увеличение печени, а также боли в мышцах, суставах.
  • Желтуха, кожный зуд, увеличение селезёнки, сосудистые «звездочки».

После проведения анализа крови на определение ДНК вируса гепатита В в нашем медицинском центре пациенту выдается заключение. «ДНК вируса гепатита В обнаружена» или «ДНК вируса гепатита В не обнаружена». Определение ДНК HBV в материале является важнейшим анализом, который наряду с другими лабораторными исследованиями позволяет диагностировать инфекцию, определять характер инфекционного процесса, выступать в качестве критерия в проведении терапии и оценки ее эффективности.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДНК ГЕПАТИТА В (вирусная нагрузка) - это тест на определение количества единиц ДНК вируса гепатита В, которые присутствуют в определенном объеме крови (обычно это 1 мл, что соответствует 1 кубическому сантиметру). Это количество выражается в цифрах, единицы измерения - копии/мл.

  • Положительный качественный тест на наличие ДНК вируса гепатита В в сыворотке крови.
  • Определение тактики лечения пациентов.
  • Мониторинг эффективности противови­русной терапии.

Количественный метод определения содержания ДНК вируса в плазме дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к антивирусным препаратам. Снижение концентрации ДНК вируса гепатита В в течение недели после начала курса лечения не менее чем на треть является быстрым и точным параметром для предсказания эффективности терапии, приводящей к раннему вирусологическому ответу.

Ищете где сдать анализ на гепатит В? Наша современная ПЦР-лаборатория в режиме «реального времени» позволяет провести диагностику гепатита В в качественном и количественном формате. Сдать кровь на гепатит В можно в любое удобное для Вас время. Предлагаем Вам получить консультацию у высококвалифицированных врачей-инфекционистов.

Анализ ПЦР

Благодаря современным методам диагностики специалисты имеют возможность определять широкий спектр возбудителей различных инфекций, что гарантирует в дальнейшем быстрое и эффективное лечение болезни. Одним из уникальных методов выявления инфекции в организме является анализ ПЦР, позволяющий определить не только тип инфекционного возбудителя, но также и количественное присутствие его в организме. Что собой представляет анализ ПЦР, и какие инфекции могут определяться с его помощью?

Что такое анализ ПЦР?

Анализ методом ПЦР (полимеразная цепная реакция) представляет собой метод определения различных инфекций высокой точности. Для проведения анализа методом ПЦР используется генетический материал, а именно ДНК или РНК, которые присутствуют в пробах, взятых на анализ.

Для проведения анализа, в зависимости от типа определяемого заболевания, может использоваться биологический материал разного типа, включая кровь, выделения из половых органов, мазок из зева и пр.

Исследуемый материал для анализа ПРЦ помещается в специальный реактор, куда также добавляют ферменты, способные связывать ДНК микроба и создают его копию. В результате нескольких проведенных циклов полученного материала ДНК микроба становится достаточно для того, чтобы определить возбудителя инфекции с высокой точностью. Анализ методом ПЦР позволяет также оценивать эффективность лечения многих хронических инфекций.

Какие заболевания можно определить с помощью анализа на инфекции ПЦР?

Анализ на инфекции ПЦР позволяет диагностировать множество инфекций, причем по результатам анализа ПЦР можно определить и степень распространения инфекции, что очень важно для правильного назначения лечения. Анализ ПЦР назначается для определения возбудителей следующих заболеваний:

  • гепатит В и С, выявляется путем обнаружения в биологическом материале ДНК соответствующего вируса;
  • хламидиоз, выявляется путем обнаружения ДНК Chlamydia trachomatis;
  • уреаплазмоз, выявляется путем обнаружения ДНК Ureaplasma urealiticum и Ureaplasma parvum;
  • микоплазмоз, выявляется путем обнаружения ДНК Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium;
  • кандидоз, выявляется путем обнаружения ДНК Candida albicans;
  • бактериальный вагиноз, выявляется путем обнаружения ДНК Gardnerella vaginalis;
  • трихомониаз, выявляется путем обнаружения ДНК Trichomonas vaginalis;
  • инфекционный мононуклеоз, выявляется путем обнаружения ДНК вируса Эпшетейна-Барра;
  • туберкулез, выявляется путем обнаружения ДНК микобактерии туберкулеза;
  • папилломавирусная инфекция, выявляется путем обнаружения ДНК вируса папилломы человека;
  • ВИЧ (СПИД), выявляется путем обнаружения ДНК вируса иммунодефицита человека;
  • герпесная инфекция, выявляется путем обнаружения ДНК вирусов простого герпеса 1 и 2 типов;
  • хеликобактериоз, выявляется путем обнаружения ДНК Helicobacter pylori.

Анализ ПЦР на гепатит С

Анализ ПЦР на гепатит С позволяет точно определить наличие вируса в крови, из чего делается заключение о наличии данного заболевания у пациента. Сегодня это один из наиболее эффективных методов определения гепатита С. Анализ ПЦР на гепатит С может быть качественным и количественным.

Качественный анализ на гепатит С прямо указывает на наличие вируса в крови пациента. Качественным результатом анализа ПЦР в данном случае может быть «обнаружено» или «не обнаружено». Данный вид теста имеет определенную чувствительность, в пределах 10-500 МЕ/мл. Это означает, что если концентрация вируса в крови будет ниже, то результатом качественного анализа будет «не обнаружено».

Количественный анализ ПЦР на гепатит С позволяет определить концентрацию вируса в крови. Данный показатель обозначают как «вирусная нагрузка», и он представляет собой количество единиц вирусной РНК, обнаруженной в определенном объеме крови. Расшифровка анализа ПЦР в данном случае может выражаться по-разному. В некоторых лабораториях будет указано, например, 1,5 млн МЕ/мл, что соответствует 1.500.000 МЕ/мл или 1.5* 106 МЕ/мл. Также могут использоваться и другие единицы изменения #8212; копии/мл. Пересчитать копии в международные единицы (МЕ) можно по формуле: 1 МЕ/мл = 4 копии/мл.

Для определения степени распространения вируса в организме, можно принять следующие показатели. Если в расшифровке анализа ПЦР присутствует значение вирусной нагрузки в 800 *10 3 или 800.000 ME/мл, то это говорит о высоком содержании вируса в крови. Очень высокой считается нагрузка, значение которой превышает 1*10 7 ME/мл.

Анализ ПЦР на хламидии

Для проведения анализа ПЦР на хламидии используется биологический материал в виде соскобов из уретры, осадка мочи, секрета простаты, спермы, соскобов с конъюнктивы. Анализ ПЦР на хламидии подразумевает качественное определение присутствия возбудителя инфекции в материале. Расшифровка анализов ПЦР на хламидии может свидетельствовать о наличии инфекции либо об ее отсутствии. Нормальный результат анализа ПЦР на хламидии должен быть отрицательным. Положительный результат свидетельствует о наличии инфекции в острой стадии заболевания.

Для того чтобы результат анализа ПЦР был достоверным, исследуемым пациентам рекомендуется в течение 3-х дней до сдачи биоматериала воздерживаться от применения любых лекарств, а также от применения средств гигиены, в которых содержатся бактерицидные добавки. Кроме того, до сдачи анализа необходимо воздерживаться от опорожнения мочевого пузыря в течение 2-х часов.

Метод ПЦР на страже здоровья

Сегодня анализ методом ПЦР позволяет ставить точные диагнозы там, где другие анализы дают неточную картину заболевания. На сегодняшний день это самый быстрый и, главное, самый точный метод диагностики. Метод хорош тем, что позволяет находить различных по своей природе возбудителей в разном биологическом материале. При этом точность выявления не страдает от того, на наличие какого именно возбудителя проводится исследование. В расшифровке анализа ПЦР содержится достаточно информации о том, какая инфекция и в каком количестве присутствует в организме.

ПЦР-анализ на вирус гепатита В

Возбудитель гепатита В — ДНК-содержащий вирус семейства Hepadnaviridae .

ПЦР позволяет обнаружить в крови инфицированного ДНК вируса гепатита В (ДНК HBV). Положительный результат на ДНК HBV свидетельствует о наличии инфекции. Этот анализ называется качественная ПЦР. ПЦР также позволяет определить вирусную нагрузку, т.е. количество копий ДНК в 1 мл крови инфицированного, этот анализ называется количественная ПЦР. Количество вируса в 1 мл крови позволяет судить об активности вируса.

Ка­чественный ПЦР-анализ используется для выявления наличия и репликации вируса гепатита В.

Метод определения вируса гепатита В

Нормальный результат анализа на вирус гепатита В

ДНК вируса гепатита В не обнаружена.

Папилломы - ПРИЗНАК наличия паразитов в теле! На ночь нужно пить кружку.

Этот червь живет у каждого ВТОРОГО человека и разрушает органы.

Материал для анализа на вирус гепатита В

Забор крови необходимо проводить с учетом локализации и стадийности клинического процесса.

24 часов при температуре 2-8 °С;

7 дней при температуре -20 °С.

Забор крови производится в пробирку с ЭДТА с разделительным гелем.

Образцы с биологическим материалом помещают в пробирки с транспортной средой, предоставляемой ПЦР-лабораторией.

Подготовка пациента к анализу на вирус гепатита В

Забор крови необходимо производить спустя 10-14 дней после прекращения приема химиопрепаратов и лечебных процедур.

Факторы, влияющие на результат анализа

Расшифровка анализа

Положительный результат: наличие ДНК вируса гепатита В в биологическом материале.

Отрицательный результат: отсутствие ДНК вируса гепатита В в биологическом материале.

Источники: http://biomedica.by/pcr-gepatit-b.html, http://www.wjtoday.ru/analiz-pcr/, http://pro-analizy.ru/pcr-analiz-na-virus-gepatita-b/

Комментариев пока нет!

luchshijlekar.ru


Смотрите также