Пцр диагностика что это такое при гепатите. Пцр гепатита в


Что такое анализ пцр при гепатите в

ПЦР гепатита B

HBV в материале в норме отсутствует.

Примерно 5-10% случаев цирроза и других хронических заболеваний печени обусловлено хроническим вирусным гепатитом В. Маркёрами активности таких заболеваний служат HBe Ag и ДНК вируса в сыворотке крови.

ПЦР позволяет определять в исследуемом материале (крови, пунктате печени) ДНК HBV как качественно, так и количественно. Качественное определение HBV в материале позволяет подтвердить наличие вируса в организме больного и тем самым устанавливает патогенез заболевания. Количественный метод определения содержания ДНК HBV в исследуемом материале даёт важную информацию об интенсивности развития заболевания, эффективности лечения и развитии резистентности к антивирусным препаратам. Для диагностики вирусного гепатита методом ПЦР в сыворотке крови в настоящее время применяют тест-системы, их чувствительность составляет 50-100 копий в пробе, что позволяет детектировать вирус при его концентрации 5×10 3 -10 4 копий/мл. ПЦР при вирусном ВГВ безусловно необходима для суждения о вирусной репликации. Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBe Ag. Материалом для выявления ДНК HBV может служить сыворотка крови, а также лимфоциты и гепатобиоптаты. Оценка результатов исследования на ДНК HBV во многом аналогична описанному для вирусного гепатита С.

Обнаружение ДНК HBV в материале с помощью ПЦР необходимо в следующих случаях:

  • разрешение сомнительных результатов серологических исследований;
  • выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесённой инфекцией или контактом;
  • контроль эффективности противовирусного лечения.

Существует зависимость между исходом острого вирусного гепатита В и концентрацией ДНК HBV в крови больного. При низком уровне виремии (менее 0,5 пг/мкл) процесс хронизации инфекции близок к нулю, при концентрации ДНК HBV от 0,5 до 2 пг/мл хронизация процесса происходит у 25-30% больных, а при высоком уровне виремии (более 2 пг/мл) острый вирусный гепатит В чаще всего переходит в хронический.

Показаниями для лечения хронического вирусного гепатита В интерфероном альфа следует считать наличие маркёров активной репликации вируса (выявление HBs Ag, HBe Ag и ДНК HBV в сыворотке крови в течение предшествующих 6 мес). Критерием оценки эффективности лечения служит исчезновение HBe Ag и ДНК HBV в крови, что обычно сопровождается нормализацией активности трансаминаз и долговременной ремиссией заболевания.

ПЦР-анализ на вирус гепатита В

Возбудитель гепатита В — ДНК-содержащий вирус семейства Hepadnaviridae .

ПЦР позволяет обнаружить в крови инфицированного ДНК вируса гепатита В (ДНК HBV). Положительный результат на ДНК HBV свидетельствует о наличии инфекции. Этот анализ называется качественная ПЦР. ПЦР также позволяет определить вирусную нагрузку, т.е. количество копий ДНК в 1 мл крови инфицированного, этот анализ называется количественная ПЦР. Количество вируса в 1 мл крови позволяет судить об активности вируса.

Ка­чественный ПЦР-анализ используется для выявления наличия и репликации вируса гепатита В.

Метод определения вируса гепатита В

Нормальный результат анализа на вирус гепатита В

ДНК вируса гепатита В не обнаружена.

Папилломы - ПРИЗНАК наличия паразитов в теле! На ночь нужно пить кружку.

Этот червь живет у каждого ВТОРОГО человека и разрушает органы.

Материал для анализа на вирус гепатита В

Забор крови необходимо проводить с учетом локализации и стадийности клинического процесса.

24 часов при температуре 2-8 °С;

7 дней при температуре -20 °С.

Забор крови производится в пробирку с ЭДТА с разделительным гелем.

Образцы с биологическим материалом помещают в пробирки с транспортной средой, предоставляемой ПЦР-лабораторией.

Подготовка пациента к анализу на вирус гепатита В

Забор крови необходимо производить спустя 10-14 дней после прекращения приема химиопрепаратов и лечебных процедур.

Факторы, влияющие на результат анализа

Расшифровка анализа

Положительный результат: наличие ДНК вируса гепатита В в биологическом материале.

Отрицательный результат: отсутствие ДНК вируса гепатита В в биологическом материале.

Hepatitis B virus (HBV, гепатит B), генотипирование, ДНК (ПЦР), кровь

Подготовка к исследованию: Исключение курения за 30 минут до забора крови Исследуемый материал: Взятие крови

Гепатит В - воспалительное заболевание печени, вызванное инфицированием вирусом гепатита В. Около одной трети мировой популяции являются носителями вируса.

Геном вируса гепатита В состоит из кольцевой ДНК. Существуют четыре основных серотипа, которые имеют разное строение эпитопа - части молекулы антигена, распознаваемой иммунной системой. Кроме того, известны 10 генотипов (от А до J) вируса. Генотипы имеют четкое географическое распределение.

Путь передачи вируса - парентеральный, чаще всего реализуемый при взаимодействии с инфицированной кровью (переливание крови, повторное использование зараженных шприцев). Возможна передача инфекции при сексуальном контакте, а также от матери к ребенку во время родов. Гепатит В может передаваться при контакте поврежденных кожных покровов и слизистых оболочек с выделениями или слюной, содержащими вирус.

Инкубационный период длительный - от одного месяца до шести, в среднем - 12 недель.

Симптомы острого гепатита В - общее недомогание, потеря аппетита, тошнота, рвота, умеренное повышение температуры. Характерно нарастание желтухи - пожелтения кожных покровов и белков глаз, а также потемнение мочи. Одним из симптомов острого гепатита может быть кожный зуд. Иногда гепатит В протекает практически бессимптомно.

Инфекция гепатита В варьируется от легкой, длящейся несколько недель, до тяжелой хронической формы заболевания, которая развивается в течение многих лет.

Различают несколько стадий или форм гепатита В. Острая инфекция сопровождается типичными симптомами и позитивными результатами исследований. Хроническая (персистирующая) форма гепатита В характеризуется воспалительными процессами в печени. Хронический гепатит может протекать бессимптомно, но в течение нескольких лет приводить к циррозу или раку печени. Неактивная форма заболевания - персистирующая инфекция, которая не сопровождается воспалением печени. Иногда после излечения вирус гепатита В присутствует в неактивном состоянии в гепатоцитах - клетках печени. При этом отсутствуют клиническая картина гепатита и изменения печени, а результаты лабораторных исследований отрицательные.

Хронизация вирусного гепатита В происходит у 90% младенцев, инфицированных внутриутробно или в родах, и у 30-50% детей, заболевших в возрасте от одного до пяти лет. У иммунокомпетентных взрослых больных хронизация гепатита наблюдается лишь в 4% случаев.

В 80-х годах прошлого века была впервые синтезирована вакцина против гепатита В, которая успешно применяется и сейчас. Поствакцинальный иммунитет длится до 10 лет, а у некоторых лиц сохраняется пожизненно.

ДНК вируса гепатита В при активном течении заболевания можно обнаружить в крови уже через несколько недель после инфицирования. Генотипирование позволяет определить точный тип генотипа вируса гепатита В.

Данный анализ позволяет выявить ДНК вируса гепатита В в крови и определить его генотип. Анализ помогает оценить прогноз течения заболевания.

Метод

Метод ПЦР – полимеразная цепная реакция, позволяющая идентифицировать наличие в биологическом материале искомый участок генетического материала.Подробнее о методе ПЦР - его разновидностях, преимуществах и области применения в медицинской диагностике.

Референсные значения - норма(Hepatitis B virus (HBV, гепатит B), генотипирование, ДНК (ПЦР), кровь)

Информация, касающаяся референсных значений показателей, а также сам состав входящих в анализ показателей может несколько отличаться в зависимости от лаборатории!

В норме результат анализа отрицательный, то есть ДНК вируса гепатита В не обнаружена. В случае положительного результата определяется генотип вируса гепатита В.

Источники: http://ilive.com.ua/health/pcr-gepatita-b_75251i15983.html, http://pro-analizy.ru/pcr-analiz-na-virus-gepatita-b/, http://www.analizmarket.ru/tests/id/78720/

Комментариев пока нет!

www.dolgojiteli.ru

Маркеры на гепатит в положительный а пцр отрицательный

Анализ маркеров гепатита В

В организме человека, больного вирусным гепатитом В, обнаруживаются следующие маркеры вирусных гепатитов:

  • Вирусные антигены HBeAg и HBsAg.
  • Антитела к антигенам и HBcore-белку: анти-HBe, анти-HBcore и анти-HBs.

Совокупность этих антител и антигенов и называют комплексным определением маркеров вирусного гепатита. Этот комплекс постоянно динамически изменяется и позволяет отслеживать активность вируса и реакцию иммунитета больного. Маркеры, определяемые комплексно, позволяют также грамотно выявить стадию заболевания и спрогнозировать его последующее развитие.

Заражение вирусным гепатитом В происходит в результате проникновения вируса в кровь пациента различными путями:

  • Манипуляции, при которых нарушается целостность органов и тканей – уколы, операции.
  • Незащищенный половой акт.
  • Грудное кормление ребенка на определенных стадиях болезни и т.д.

Для того чтобы определить форму вирусного гепатита В, необходима расшифровка следующих маркеров инфекции, содержащихся в лимфе, крови и прочих биологических жидкостях, а также тканях и клетках органов:

  • Специфические маркеры – антигены HBe, HBc и HBs.
  • Иммунологические – антитела к указанным антигенам класса IgG и IgM.
  • Генетические в виде нуклеотидных последовательностей ДНК вируса.

Расшифровка маркеров, являющихся антигенами:

  • Антиген HbsAg представляет собой наиболее ранний маркер острой формы вирусного гепатита В, обнаруживаемый в сыворотке крови через 4–6 недель с момента заражения, то есть в течение периода инкубации (за 25–30 суток до появления клинических симптомов), а также во время преджелтушной и всей острой стадии гепатита. Обнаружение этих маркеров также возможно в случае бессимптомного носительства вируса.
  • Антиген HbeAg образуется в крови во время преджелтушного периода и на ранних стадиях болезни. Обнаружение маркера говорит о размножении частиц вируса и является свидетельством активного процесса. На этом этапе кровь больного является особенно заразной. Обнаружение маркеров HbeAg в течение четырех и более недель может означать переход болезни в хроническую стадию.
  • HbcAg является ядерным антигеном вируса, который может быть обнаружен только в клетках печени в процессе биопсии, не определяясь в свободном виде в плазме и сыворотке крови. Представляет собой сильный иммуноген, провоцирующий производство специфических антител.

Расшифровка маркеров вирусного гепатита В в виде антител включает в себя:

  • Анти-Hbs – маркеры, появляющиеся в конце острой стадии заболевания. Могут обнаруживаться в крови человека на протяжении десяти и более лет. Наличие маркера является признаком формирования иммунитета для защиты от вируса.
  • Анти-Hbe – антитела, являющиеся признаком динамики процесса заражения. Соотношение параметров anti-Hbe и HbeAg используется для контроля течения вирусного и прогнозирования его исхода.
  • Анти-Hbc IgM представляют собой антитела к маркерам HbcAg, относящиеся к классу IgM. Возникают при острой форме гепатита В еще до появления желтухи или на начальном этапе обострения болезни. Способны циркулировать в крови в течение 3–5 месяцев. Выявление маркеров анти-HBc IgM служит подтверждением того, что у больного гепатит В в острой форме.
  • Анти-Hbc IgG являются антителами класса IgG к маркерам HbcAg. Чаще к всего обнаруживаются примерно в то же время или немного позже, способны в течение длительного времени сохраняться в организме. Являются признаками того, что гепатит присутствует в настоящее время или был перенесен в прошлом.

Диагностика и лечение

Для того чтобы диагностировать вирусный гепатит В, как и в случае любых других инфекционных болезней, необходимо выявить сам возбудитель, то есть вирус или его частицы, присутствующие в крови. Для этого требуется расшифровка маркеров, антител и антигенов. В процессе диагностирования гепатита В могут проводиться перечисленные ниже исследования.

Анализ крови на наличие маркеров вируса позволяет выяснить статус инфекции. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) обеспечивает обнаружение ДНК вируса в крови, то есть положительный результат наличия вирусной ДНК сигнализирует о присутствии искомой инфекции. Данное исследование получило название качественной ПЦР. Существует также метод количественной ПЦР, с помощью которого можно выяснить вирусную нагрузку – содержание копий ДНК в миллилитре крови пациента, позволяющее оценить активность возбудителя.

Приведем в качестве примера результаты анализа и расшифровку результатов:

  • HBsAg – положительный;
  • Аnti-HBcorIgG, HBcorAb IgG или anti-HBcor IgG – положительный;
  • HBeAg – отрицательный;
  • HBeAb – положительный;
  • ДНК вируса – положительный.

Расшифровка результата позволяет диагностировать хроническую форму HBeAg-негативного вирусного гепатита В или носительство неактивного вируса. Для того чтобы выбрать из двух вариантов точный диагноз, необходимо провести дополнительные обследования, такие как АЛТ и количественная ПЦР. Кроме того, может потребоваться биопсия печени.

Биохимическое исследование крови, включающее в себя определение уровня ферментов печени АЛТ (аланинаминотрансфераза) и АСТ (аспартатаминотрансфераза), позволяет оценить уровень активности воспалительного процесса в печени. АСТ и АЛТ представляют собой ферменты, содержащиеся внутри гепатоцитов.

В случае повреждения клеток эти ферменты оказываются снаружи, что приводит к повышению их содержания в крови. В печени присутствуют и другие ферменты, но АЛТ является основным показателем цитолиза, а АСТ ему немного уступает с точки зрения важности. Соответственно, если расшифровка количественной ПЦР указывает на активность вируса, уровни АСТ и АЛТ указывают на активность воспалительного процесса печени, спровоцированного вирусным гепатитом.

Перечисленные выше методы исследования являются основополагающими при диагностировании вирусного гепатита В. Расшифровка лабораторных анализов крови позволяет оценить уровень активности вируса, стадию заболевания, а также получить косвенные данные о степени поражения печени.

Во многих случаях этих данных оказывается недостаточно для постановки точного диагноза, поэтому приходится получать более точную информацию о состоянии тканей печени, активности вирусного гепатита и стадии фиброза. В таком случае осуществляют биопсию печени или применяют неинвазивные методы оценки ее состояния.

Биопсия печени представляет собой забор ткани органа при помощи специальной иглы, чаще всего осуществляемый через кожные покровы. Процедуру выполняют под местным наркозом. Вес извлекаемого образца ткани составляет приблизительно 0,5 грамма. По окончании извлечения образец изучается под микроскопом.

Биопсию можно назвать своеобразной последней инстанцией, обеспечивающей получение наиболее точной информации о степени активности гепатита В и фиброзе печени, то есть уровне повреждений ее тканей. Даже с учетом высокой информативности исследования, важно понимать, что данная процедура в редких случаях приводит к определенным осложнениям.

Похожие записи:

О гепатите С

О гепатите С и методах лечения в странах СНГ.

В настоящее время признанным в мире и самым оптимальным по сочетанию цена-эффективность методом лечения является комбинированная терапия с использованием препаратов интерферона и рибавирина. Эффективность такой терапии примерно от 40% до 85%. Эффективность терапии зависит от: генотипа вируса, генотипа больного, веса, пола, возраста, давности инфицирования, применяемых препаратов и др.

О Гепатите С #8212; обычно он вызывается вирусом, попавшим в организм с половым контактом или кровью зараженного человека.

Заболевание протекает в двух вариантах #8212; если вирус активно размножается, он при этом повреждает клетки печени,а печень не успевает восстановится (регенерировать). т.к. скорость повреждения выше скорости восстановления,при этом клетки замещаются рубцами, страдают функции печени. Если репликация (размножение вируса) медленное, печень успевает регенерировать.

Анализы

При заболевании необходимо контролировать Трансаминазы- маркеры повреждения гепатоцитов. ALT (АЛТ, АлАТ), AST (АСТ, АсАТ)- катализируемые ими реакции осуществляют связь между белковым и углеводным обменом. Не понятно что побуждает перейти гепатиту С из вялотекущей в активную форму, которая является смертельно опасной и полностью разрушает печень за 10-20 лет. Поэтому считается, что опасность представляет именно гепатит, который протекает с повышением трансаминаз

Пациентам с положительным анализом крови на наличие РНК (Рибонуклеиновые кислоты) вируса гепатита С в крови методом Полимеразной цепной реакции (ПЦР. PCR) и Иммуноферментным анализом, ИФА (Enzyme immunoassay) необходимо контролировать активность вирура по уровню АЛТ (Аланин #8212; аминотрансфераза). АЛТ считается индикаторным ферментом, и к его определению постоянно ссылаются при постановке диагноза различных гепатитов.

Если уровень АЛТ в пределах нормы, то противовирусная терапия обычно не рекомендуется.

Необходимо повторять биохимический анализ крови один раз в 3-6 месяцев. А также регулярное обследование состояния печени. Рекомендуется биопсия печени (извлечение фрагмента-биоптата печеночной ткани) которая покажет полную картину в печени на текущий день, а также поможет определить стадию развития фиброза (рубцевания) печени. Также возможно проведение других анализов на фиброз, или применение неинвазивного метода эластографии печени с аппаратом Фиброскан.

Различают 5 стадий (от 0 до 4) развития поражения печени (стадий фиброза печени). последней стадией является цирроз печени (сильное поражение печени, при котором она утрачивает свои функции). По этим обследованиям и результатам анализов принимается решение о необходимости лечения.

Для стадий 0-1 лечение не обязательно. Возможно начало лечения при персональной рекомендации врача при внепеченочных проявлениях вируса.

Для стадий 2 и выше рекомендуется безотлагательно начинать терапию.

В любом случае, даже при откладывании лечения необходимо пациенту находиться под контролем гепатолога. Один раз в полгода проводить тесты на трансаминазы, один раз в 3-4 года контролировать стадию развития фиброза печени.

ИТОГО: АЛТ + ИФА + ПЦР #8212; для диагностики гепатита С. К лечению вируса гепатита С мы обычно переходим при повышенной АЛТ, положительном ПЦР анализе и наличии маркеров ИФА. Лечение начинается после:

  • получения ИФА-маркеров (когда выявлены антитела к вирусу гепатита С)
  • методом ПЦР в крови выявлено наличие РНК вируса гепатита С

Желательно это сделать в двух разных лабораториях.

Гепатита С без ИФА маркеров не бывает! Но они появляются по завершении, инкубационного периода, и сохраняются в дальнейшем вне зависимости от результатов лечения. Обычно, после срока инкубационного периода, если нет маркеров #8212; нет гепатита!

Внимание. По последним исследованиям, если говорить о гепатите С у коинфицированных ВИЧ / ВГС могут отсутствовать антитела к вирусу. Соответственно ИФА маркеры отсутствуют, а вирус гепатита С есть, который подтверждается положительным результатом при анализе методом ПЦР.

Метод ПЦР- Полуколичественный анализ крови для прогноза гепатита С #8212; это уже устаревший вид анализа, дающий очень расплывчатый результат. Лучше используйте количественный анализ крови методом ПЦР для определения вирусной нагрузки.

Качественный ПЦР анализ может быть только либо положительным, либо отрицательным (анализ, котторый устанавливает факт наличия РНК вируса гепатита С). #171;полуположительный и полуотрицательный#187;, не имеет никакого смысла.

Активность гепатита и внепеченочные проявления

Смотрим на результаты биохимического анализа крови и трансаминазы. Но надо учитывать, что эти показатели, по оценке активности гепатита С, имеют погрешность около 20%.

Самую точную картину сможет дать биопсия печени. Но это тяжело и она доступна не везде. Также сужествуют другие методы обследования, они менее точные, но безболезненные, например фибросканирование (эластометрия) печени и фибротест.

Внепеченочные проявления #8212; результаты исследований с участием мед.работников, с гепатитом С, показали, что 74% больных испытывали различные формы. Наиболее часто наблюдались боли в суставах -74%; нечувствительность или покалывание #8212; 17%; боли в мышцах – 15%; нестерпимый зуд #8212; 15%; сухость слизистых рта и глаз – 11%.

Схемы лечения (выбор препаратов, дозировка и частота приема) подбирается в соответствии с генотипом вируса гепатита С. Сейчас существует 6 основных генотипов вируса, которые дают более детальную информацию о гепатите С (обозначаемых цифрами: 1,2,3,4,5,6), а также обозначаются подтипы/субтипы ( которые обозначаются латинскими буквами, присоединенными к цифре генотипа: 1b, 3a,#8230;). Вирусы с разными генотипами-субтипами отличаются по чувствительности к терапии интерфероном, по содержанию вируса в крови (виремии ), по распространению в теле.

Генотипирование диктует длительность терапии и ее интенсивность.

Первый и четвертый генотип ( которые встречающийся редко), примерно вдвое устойчивее при антивирусной терапии. Подтип генотипа вируса #8212; при этом не существенен.

Количественная оценка вирусной нагрузки (наличие вируса) #8212; относительно новое понятие,введеное европейскими гепатологами. Суть сравнения показателей вирусной нагрузки до лечения и через 4, 8, 12 недель терапии, соответственно, это сравнение позволяет уточнять схему терапии, а также рекомендовать отмену или продолжение терапии (при снижении загрузки в 100 и более раз) с большой вероятностью на успех.

Плюс такой оценки #8212; если терапия не работает пациент узнает об этом быстро.

Минусы- нужны качественные и постоянные анализы.

Это все относится к стандартной интерфероновой терапии.

Контрацепция в период терапии, а также в течение 6 месяцев после окончания терапии обязательна для обоих партнеров. ***

Гепатит С: положительный ИФА+повторный и отрицательный ПЦР?

Здравствуйте!Беременность 14 недель.Анализ на гепатит С в поликлинике - положительный. Повторный - тоже положительный. Самих данных на руках нет, все в карточке. Как я поняла, использовался метод ИФА.ПЦР гепатит С - не обнаружен (сдали с мужем в независимой лаборатории, пока ждала результатов повторного анализа).У мужа ПЦР гепатит С - не обнаружен.Биохимия крови (март ) - хорошая (со слов инфекциониста, результаты в карточке). Биохимия пол года назад (сдавала по другому поводу):АлАТ 14,82 (норма 5-40 Е/л)АсАТ 17,46 (-//-)Билирубин 13,11 (норма 8,55 - 20,52 мкмоль/л)Не знаю, что еще важно в биохимическом анализе крови для диагностики гепатита С.

Хотела бы спросить у специалистов:1. У меня гепатит С?

2. Есть ли необходимость сдавать анализ методом ИФА в другой лаборатории для подтверждения или две ошибки подряд быть не может?

3. Нужно ли мужу сдавать анализ методом ИФА?

4. Инфекционист сказала, что повторный положительный является основанием для постановки на учет с гепатитом С. ПЦР отрицательный значит, что вирус пока неактивен. Я на приеме растерялась и не спросила: пока - это значит, что в любое время может активизироваться?

5. Есть ли риск заразить ребенка?

Здравствуйте!Беременность 35 недель.Вскоре после предыдущего сообщения сдали с мужем кровь на анализ методом ИФА (не в поликлинике, в одной из независимых лабораторий):ИФА-диагностика anti HCV - отрицательноИФА-диагностика (муж) anti HCV - отрицательно .В поликлинике меня направили на повторный анализ в 25 недель беременности:анализ на гепатит С в поликлинике - положительный (там тоже наличие антител определяют, как я поняла, не ПЦР).На 33 неделе снова сдала кровь на анализ в другой независимой лаборатории. Результаты:Иммунохимия: антитела к гепатиту С - 0.43 (диапазон нормы: до 0.9 отрицательный. от 0.9 до 1.0 серая зона, от 1.0 положительный)ПЦР, РНК вируса гепатита С (качественный метод) - не обнаружено .Да, еще кровь на биохимию каждый месяц сдаю - все хорошо (со слов доктора).В моей обменной карте записано, что я носитель вирусного гепатита С. У этого диагноза есть последствия: трудно получить разрешение рожать в другом РД, кроме того, где меня обязаны принять; ну и там обсервация, конечно.

Как Вы считаете, учитывая новые данные,

1) носитель ли я вирусного гепатита С?

2) если нет, то могу ли я настаивать на том, чтобы эту запись из обменки убрали, или инфекционист не может опираться на данные других лабораторий, кроме той, в которую поликлиника отправляет материалы (что-то же там плюсует!)?

Здравствуйте! Я снова к Вам за советом. Инфекционист в поликлинике диагноз не сняла, аргументируя тем, что не может игнорировать три положительных результата ИФА. Согласилась только дать направление в городской центр инфекционной гепатологии на базе инфекционной больницы (кстати, оказалось, что именно в лабораторию инфекционной больницы и направляют материалы из нашей поликлиники). В консультативном заключении специалиста Центра в графе диагноз записано, что убедительных данных за хронический вирусный гепатит С на момент осмотра нет, возможен вариант постинфекции . При этом снять диагноз данный специалист тоже не может, потому что три положительных результата и на их реактивы пока никто не жаловался, а рекомендует снятие с учета у инфекциониста только после 3-х последовательных отрицательных результатов обследований на anti HCV (я так поняла, что имеются в виду результаты именно их лаборатории). Получается, что теперь я должна доказать, что у меня нет заболевания, за наличие которого у меня нет убедительных данных!

Подскажите, пожалуйста, есть ли документ, регламентирующий постановку и снятие диагноза при вирусном гепатите С, а также (даже - особенно) постановку на учет и снятие с этого учета? Неужели действительно три отрицательных ИФА?

Я понимаю, что состоять на учете - это не страшно, а в моем случае, по-моему, вообще ничего не значит. Я просто хочу успеть убрать запись носитель вирусного гепатита С из обменной карты, чтобы была возможность выбрать РД по желанию. Можете ли Вы что-нибудь посоветовать?

P.S. Еще было рекомендовано не кормить ребенка грудью после появления у него зубов ))

Источники: http://veneradoc.ru/gepatity/markery-gepatita-v.html, http://www.hepcinat.in.ua/o-gepatite-c, http://forums.rusmedserv.com/showthread.php?t=19

Комментариев пока нет!

www.dolgojiteli.ru

Пцр диагностика что это такое при гепатите. Что делать при гепатите. IzlechiSebya.ru

Главная » Что делать при гепатите

ПЦР и гепатит

Чтобы вылечить заболевание, сначала его нужно правильно диагностировать. И чем быстрее и точнее будет поставлен диагноз, тем больше шансов на выздоровление.

Один из главных прорывов медицины в быстрой и точной диагностике инфекционных заболеваний был совершен 1983г, когда Кэрри Мюллис изобрел полимеразно-цепную реакцию (ПЦР), которая позволяет легко определить, какая инфекция вызвала заболевание. В случае гепатита, к примеру, ПЦР не только позволяет за считанные минуты узнать, какой тип вируса вызвал болезнь, но при помощи ПЦР можно определить, к каким лекарствам вирус устойчив, а какие смогут полностью уничтожить болезнь.

ПЦР, зачем она нужна?

До появления ПЦР существовал единственный способ получить генетический материал – вырастить живое существо, содержащее нужный ген. Открытие ПЦР позволило размножать , или как говорят биологи – амплифицировать необходимый ген без участия всего остального организма.

Еще сложнее было с определением того, содержит ли живой организм тот или иной ген, или нет. К примеру, одним из лучших лекарств против гепатита В считается ламивудин (Lamivudine). Однако некоторые штаммы вируса, вызывающего гепатит В обладают резистентностью к этому препарату.

Чтобы узнать методами классической вирусологии, поможет ли лавимудин конкретному пациенту, нужно взять образец крови больного, выделить из него чистый вирус, вырастить в куриных эмбрионах культуру вируса, снова очистить его, опять провести тест на куриных эмбрионах, уже с добавкой препарата, снова выделить вирус, определить его количество

Для проведения подобного исследования требовалось несколько месяцев работы целой лаборатории. К тому же, из-за опасностей работы с живыми вирусами, подобными исследованиями могли заниматься лишь специально оснащенные институты.

Все что оставалось врачам, это наугад подбирать препараты, пока один из них не помогал. Из-за этого уходило драгоценное время, а побочные эффекты от лекарств еще сильнее ослабляли печень.

Появление ПЦР позволило выявлять искомый ген за несколько часов, при помощи аппаратуры, которая вполне поместится на одном столе. К тому же, для проведения ПЦР нужен лишь соответствующий участок генома, поэтому можно деактивировать вирус, что существенно упрощает транспортировку инфекционного материала и работу с ним.

ПЦР, что это такое?

В самых общих чертах ПЦР выглядит следующим образом. В пробирку вносят генетический материал, который потенциально может содержать искомый ген, праймеры – химически синтезированные отрезки искомого гена небольшой длины, особый фермент: ДНК-полимеразу (или РНК полимеразу в случае некоторых вирусов гепатита), который способен выстроить цепочку нуклеиновой кислоты, полностью идентичную первоначальной и набор из 4 видов свободных нуклеотидов – строительного материала для ДНК или РНК, один из которых содержит радиоактивный фосфор.

Затем смесь нагревают до 94-96 С (при этой температуре две спирали ДНК, обычно плотно переплетенные между собою, расплетаются). Затем следует охлаждение. При этом праймеры прикрепляются к искомому участку генома, не давая ДНК (или РНК) вновь образовать двойную спираль. После этого полимераза находит свободную цепочку нуклеотидов. (Для работы этого фермента нужна одиночная цепочка нуклеотидов. Так как полимераза скользит по цепи ДНК, как блок по тросу, на двойных спиралях она работать не способна).

Затем следует повторный цикл нагрева, в результате чего цепочки нуклеотидов разделяются между собой.

При каждом цикле ПЦР количество искомого гена увеличивается в геометрической прогрессии, тогда как количество остального генетического материала растет линейно.

Очистив раствор от остатка нуклеотидов и разделив цепочки ДНК по молекулярной массе при помощи электрофореза, можно без проблем узнать, содержится ли искомый ген в образце, или нет.

Более того, определив уровень радиоактивного излучения, можно узнать, какое количество генетического материала содержалось в образце (в случае гепатитов – определить уровень вирусной нагрузки).

Еще одно достоинство ПЦР – очень высокая чувствительность реакции ПЦР, гораздо выше, чем при классических методах определения вирусов. В идеале, чтобы выявить искомый ген – для ПЦР нужен всего один вирус.

Кроме того, ПЦР полностью специфична – праймеры создают таким образом, чтобы они соответствовали уникальным участкам искомого гена, которых нет ни у какой другой последовательности (как у каждого человека существует уникальный отпечаток пальцев, так и у каждого гена есть участки с уникальной последовательностью нуклеотидов).

ПЦР и диагностика гепатитов

Сегодня известно по меньшей мере пять вирусов, которые способны поражать печень. Хотя по строению и происхождению эти вирусы существенно различаются, но они вызывают сходные клинические симптомы поражений печени. Поэтому их объединили в искусственную группу: вирусы гепатита А, В, С, D, Е.

Но, так как лечить надо не симптомы, а саму болезнь, а подходы к лечению разных типов вирусов, вызывающих гепатит, существенно различаются, одна из главных задач диагностики гепатита – это определение типа вируса, вызвавшего болезнь.

При помощи ПЦР это можно сделать в самом начале заболевания. Не дожидаясь симптомов, которые позволяют различать гепатиты по клинической картине.

ПЦР и гепатит А

ПЦР с успехом применяют для выявления носителей гепатита А в очагах инфекции (к примеру, если в детском саду заболело гепатитом А несколько детей). Непосредственно генетический материал вируса в крови можно выявить гораздо раньше появления антител, еще до начала заболевания.

ПЦР и гепатит В

ПЦР – это самый ранний способ выявления гепатита В. ДНК вируса появляется в крови на 20 дней раньше, чем так называемый австралийский антиген, по которому определяют гепатит В иммунологическими методами.

Кроме того, ПЦР позволяет выявить хронический бессимптомный гепатит и мониторить вирусную нагрузку у больных хроническим гепатитом В – то есть оценить эффективность лечения.

ПЦР и гепатит С

ПЦР при выявлении гепатита С просто неоценима! Этот тип гепатита часто протекает вообще без симптомов, но у 85% пациентов переходит в хроническую форму и приводит к циррозу печени. Поэтому ПЦР позволяет выявить вирус еще до того, как заболевание стало неизлечимым.

Также, ПЦР помогает выбрать наиболее эффективную схему противовирусного лечения и оценить ее результативность ее применения.

Тесты
Здравые решения

Современная диагностика гепатита В. Выявление HBsAg

Серологическая диагностика гепатита В в настоящее время строится на основании определения маркеров НВ-вирусной инфекции, как правило, с помощью имуноферментного анализа, то есть антигенов вируса гепатита В или антител к ним в биологических субстратах, главным образом, в сыворотке крови. В качестве основных маркеров гепатита В, имеющих самостоятельное значение для серологической диагностики, сегодня признаны:

HBsAg (поверхностный антиген вируса гепатита В) — основной маркер, свидетельствующий о наличии вируса гепатита В. При остром гепатите В HBsAg можно обнаружить еще в продромальном периоде, и длительность его персистенции при неосложненном течении составляет до 10 недель;

HBeAg — показатель высокой степени активности инфекционного процесса. Маркер репликации HBeAg определяется, как правило, при наличии HBsAg, однако циркулирует в крови менее продолжительное время — в среднем 4 недели;

anti-HBc класса IgM — показатель острого инфекционного процесса или, при хронических формах гепатита В, косвенный показатель активной репликации HBV. Возможна их длительная циркуляция;

anti-HBc (суммарные) — так называемые «анамнестические» антитела, образующиеся в результате перенесенного гепатита В, также присутствуют при хроническом гепатите В в комплексе с другими маркерами. В ряде случаев отмечена пожизненная циркуляция; anti-HBs — свидетельство перенесенной ранее инфекции или поствакцинального иммунитета:

anti-HBe — не являются показателем, характеризующим какое-либо конкретное состояние при гепатите В. Эти антитела могут быть и в конце острого гепатита В и при хроническом гепатите и в случаях, так называемого здорового носительства HBsAg.

Хронический гепатит В. в фазу обострения наблюдается следующий профиль маркеров: HBsAg, HBeAg, DNA HBV, anti-HBc IgM и суммарные. В период стихания процесса обнаруживаются HBsAg, anti-HBc IgG (суммарные), возможна сероконверсия HBeAg на anti-HBe.

В основе всей серологигеской диагностики гепатита В. как острых, так и хронигеских форм—лежит определение HBsAg. Современные иммуноферментные тест-системы позволяют выявлять HBsAg в концентрациях до 0,1 нг/мл. Схема определения у разных тест-систем, как правило, одна и та же. В качестве иммуносорбента используются антитела к HBsAg. Как правило, применяются моноклональные антитела.

Именно они обеспечивают строгую специфичность применяемых в настоящее время диагностических наборов.

Сравнительные исследования чувствительности зарегистрированных во Франции иммуноферментных тест-систем различных производителей, проведенные Французским обществом переливания крови, позволили определить, что лучшие показатели могут быть достигнуты в результате длительной ночной инкубации при комнатной температуре.

Соблюдение таких условий постановки позволило определять HBsAg в концентрации 0,08 нг/мл («Wellcozyme HBsAg», производства «Murex»). Необходимо отметить, что наличие или отсутствие отдельных маркеров HBV может быть обусловлено не только особенностями иммунной системы человека, но и инфицированием мутантным штаммом HBV. Существует значительное количество мутаций вируса, при которых могут отсутствовать маркеры, обязательные при инфицировании дикими штаммами HBV.

ПЦР (полимеразная цепная реакция) в диагностике гепатита В

Метод полимеразной цепной реакции используют для подтверждения НВ-вирусной инфекции, наличия репликации вируса при остром и хроническом гепатите В, а также определения эффективности курса лечения. Наибольшей чувствительностью обладает двойной нестед-метод, который предполагает использование двух пар праймеров. Чувствительность нестедметода весьма высока и позволяет выявлять несколько копий DNA HBV в образце, что существенно превосходит возможности ИФА.

Сегодня разработаны соответствующие технологии производства отечественные тест-системы для детекции DNA HBV с помощью ПЦР, которые активно применяются в практическом здравоохранении. Высокая чувствительность ПЦР-диагностики при гепатите В расширила возможности раннего определения вируса гепатита В при острой инфекции. Длительность инкубационного периода при гепатите В достигает 6 месяцев, а в ряде случаев и больше. В это время вирус попадает в кровь, проникает в клетки печени, запускается механизм репликации, и в результате размножение приобретает устойчивый характер.

Эти процессы не затрагивают в значительной степени жизнедеятельность печени и других органов в течение длительного времени. В этот период эффекторные реакции иммунной системы организма не задействованы. Число вирусных частиц резко возрастает к концу инкубационного периода и становятся максимальными. В этот период методом ПЦР можно обнаружить в крови вирус гепатита В, тогда как остальные маркеры НВ-вирусной инфекции, главным образом серологические, ещё отсутствуют. Таким образом, с помощью полимеразной цепной реакции стала возможной более ранняя диагностика острого гепатита В.

Источники: http://zdravoe.com/266/index.html, http://meduniver.com/Medical/zabolevania_pecheni/diagnostika_gepatita_b.html

Комментариев пока нет!

www.izlechisebya.ru

Гепатит B | Биомедика

ГЕПАТИТ В – острое или хроническое заболевание печени, вызываемое вирусом гепатита В (Hepatitis В virus, HBV) и протекающее в различных клинико-морфологических формах: от бессимптомных до злокачественных (цирроз печени, гепатоцеллюлярная карцинома). Заражение ВГВ происходит от «здоровых» вирусоносителей с нераспознанными хроническими или острыми формами гепатита В при переливании крови и ее компонентов, при медицинских манипуляциях и сексуальных контактах, во время тесных бытовых контактов. Реже вирус может передаваться от инфицированной матери к ребенку во время родов или после.

Вирус гепатита В отличается чрезвычайно высокой устойчивостью к различным физическим и химическим факторам: низким и высоким температурам, многократному замораживанию и оттаиванию, длительному воздействию кислой среды. Он сохраняется при комнатной температуре в течение 3 мес., а в заморожен-ном виде – 15-20 лет.

Диагностика гепатита В включает в себя ряд анализов крови. При положительных результатах на опреде-ление серологические маркеров вирусного гепатита В (HBsAg) методом иммуноферментного анализа необходимо сдать кровь на гепатит В для обнаружения ДНК вируса методом полимеразно-цепной реакции (ПЦР).

В медицинском центре «Биомедика» можно сдать анализы на гепатит В метотом ПЦР:

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДНК ГЕПАТИТА В методом ПЦР – это основной метод диагностики гепатита В, который подтверждает наличие вируса гепатита В в исследуемом материале (цельная кровь, сыворотка, плазма, биоптаты печени) и устанавливает патогенез заболевания.

Показания:

  • Для ранней диагностики острого вирусного гепа­тита В (ДНК вируса гепатита В – самый ранний маркёр при острой инфекции).
  • Исследования при HBsAg-негативной инфекции.
  • Обследования лиц, входящих в группу риска.
  • Для выявления ведущего вируса при смешанной этиологии.
  • Выявление стадии активной репликации вируса при хроническом состоянии.
  • Контроль проводимой терапии.
  • Цирроз печени.
  • Слабость, недомогание, быстрая утомляемость, снижение аппетита, тошнота, тяжесть в правом подреберье, увеличение печени, а также боли в мышцах, суставах.
  • Желтуха, кожный зуд, увеличение селезёнки, сосудистые «звездочки».

После проведения анализа крови на определение ДНК вируса гепатита В в нашем медицинском центре пациенту выдается заключение : «ДНК вируса гепатита В обнаружена» или «ДНК вируса гепатита В не обнаружена». Определение ДНК HBV в материале является важнейшим анализом, который наряду с другими лабораторными исследованиями позволяет диагностировать инфекцию, определять характер инфекционного процесса, выступать в качестве критерия в проведении терапии и оценки ее эффективности.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДНК ГЕПАТИТА В (вирусная нагрузка) – это тест на определение количества единиц ДНК вируса гепатита В, которые присутствуют в определенном объеме крови (обычно это 1 мл, что соответствует 1 кубическому сантиметру). Это количество выражается в цифрах, единицы измерения – копии/мл.

Показания:

  • Положительный качественный тест на наличие ДНК вируса гепатита В в сыворотке крови.
  • Определение тактики лечения пациентов.
  • Мониторинг эффективности противовирусной терапии.

Количественный метод определения содержания ДНК вируса в плазме дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к антивирусным препаратам. Снижение концентрации ДНК вируса гепатита В в течение недели после начала курса лечения не менее чем на треть является быстрым и точным параметром для предсказания эффективности терапии, приводящей к раннему вирусологическому ответу.

Ищете где сдать анализ на гепатит В? Наша современная ПЦР-лаборатория в режиме «реального времени» позволяет провести диагностику гепатита В в качественном и количественном формате. Сдать кровь на гепатит В можно в любое удобное для Вас время. Предлагаем Вам получить консультацию у высококвалифицированных врачей-инфекционистов.

biomedica.by


Смотрите также