6. Ознакомиться с особенностями серологического метода лабораторной диагностики вирусных гепатитов. Серологическая диагностика вирусных гепатитов


Серодиагностика гепатитов: что показывает анализ

Для определения вируса гепатита, получения информации о происхождении болезни, условиях и причинах возникновения проводится серодиагностика гепатита с, b, a. Выявление серологических маркеров позволяет поставить диагноз и предпринять правильное лечение. К маркерам относятся вирусные белки, специфичные антитела, которые вырабатывает организм как ответ на инфекцию и нуклеиновые кислоты вируса.

Что это такое?

Серодиагностика — распознавание этиологии заболеваний способом выявления антител в крови. Серологические маркеры относятся к поздней диагностике, так как реакции возможны на 10−12 дней от начала болезни. Серодиагностические исследования проводят, чтобы:

  • диагностировать заболевание — определить наличие антител в крови, используя стандартные антигены;
  • определить возбудитель — выявить неизвестные антигены.

Для проведения серодиагностики используют: бактериальные клетки; плазмоциты и лимфоциты, опухолевые и пораженные клетки; растворимые компоненты. Выделяют 6 групп серологических реакций:

  1. Реакции, которые происходят с укрупнением частиц Ag.
  2. Реакции связывания комплемента и иммунный гемолиз.
  3. Реакция иммунофлюоресценции.
  4. Реакции нейтрализации Anti.
  5. Реакция с фагоцитозом.
  6. Реакции иммуносорбентного анализа с применением антигенов и антител.

Что показывает анализ?

Проведение серодиагностики назначают больным, если по каким-то причинам нет возможности провести диагностику, исключающую заболевание. Анализ выявляет тип возбудителя инфекции и помогает поставить диагноз. Также серодиагностика позволяет подобрать наилучший вариант лечения. Симптомы для сдачи анализа: необоснованные приступы слабости, плохой аппетит, тошнота, изменение цвета каловых масс и урины, желтизна кожи. Своевременная серодиагностика подтверждает или опровергает инфицирование и определяет стадию заболевания.

Особенности серодиагностики и вид гепатита

Иммуноферментный анализ для серодиагностики гепатита С.

Оболочка каждого вируса имеет собственный набор белков. А аминокислоты, которые составляют белок, считаются своеобразным кодовым набором. Этот код и является маркером при серодиагностике. Маркерами гепатита А являются anti-НАV IgM и IgG. Маркерами гепатит В — HBcAg, HBsAg, HBeAg. Маркерами вируса С — HBCAg. Для проведения серодиагностики на вирус А применяют: ИЭМ (иммуноэлектронную микроскопию), РСК (связывания комплемента), РИА (применение меченых Anti и Ag), РЭМА (реакцию энзим антител). Серодиагностика на вирус В использует РИА, РЭМА, РПГ (преципитация в геле) и РИГА (непрямая гемагглютинация). При реакции РИГА используют эритроциты, которые нагружены HBsAg. Для серодиагностики гепатита С применяют иммуноферментный анализ.

Маркеры гепатита A

Исследование при гепатите А нацелено на определение IgM и IgG. Данные показатели появляются в крови как только уровень сывороточных ферментов в организме увеличивается. Anti-НАV IgМ — является показателем уровня антител М к вирусу гепатита. После инфицирования показатель вырастает и пока не появятся первые симптомы, анализ крови будет показывать положительный результат. Аnti-НАV IgG — данный класс определяется через 10 недель после попадания инфекции в организм. Показатель чаще всего остается высоким и после выздоровления, он свидетельствует о том, что начинается процесс формирования иммунитета к вирусу типа А.

С помощью маркера HBsAg можно выявить гепатит B на самом раннем этапе, антиген проявляется на 27−41 день после попадания инфекции в организм.

Маркеры гепатита B

Исследование нацелено на выявление антигенов и антител. Серодиагностика позволяет поставить диагноз и спрогнозировать исход болезни. Для каждой стадии, обнаруживается разный маркер HBV. На протяжении инкубационного периода антиген сохраняется в крови от 2 до 5 месяцев. Показателем инфицирования является одновременное определение HBs и НВс. В начале восстановления из крови исчезают HBc и HBe, образуется anti-НВс, позже в крови определяются антитела ко всем типам антигена. Наличие HbsAg говорит о заражении, если антиген есть в крови больше полугода, значит, заболевание находится в хронической стадии. Anti-HbsAg — показывает, что в организме образовались антитела и иммунная система активно борется с вирусом. HbsAg выявляется еще некоторое время после выздоровления. Anti-HbcAg выявляется с проявления симптомов и продолжается на протяжении всего периода.

При лабораторных исследованиях выявляются два класса антитела: IgM — синтезируется на ранних сроках и является признаком недавнего заражения или большой активности вируса. IgG — формируются через 2−3 месяца после инфицирования, обеспечивает иммунитет. Показатель HbeAg говорит об активности инфекции. Пациенты, у которых в крови обнаружен антиген — опасны для передачи вируса, поэтому должны соблюдать осторожность. При выявлении Anti-HbeAg, начинает формироваться иммунитет.

Маркеры гепатита C

Вирус гепатита С размножается неактивно, поэтому возникают трудности в диагностике инфицирования. Единственный способ выявления вируса С — определение РНК. Его определение проводят способом иммуноферментного анализа, выявляя количество Anti-HCV. Антитела определяются через 4−6 недель после попадания вируса в кровь. В этот период начинается формирование и циркуляция IgM. Через 3 месяца начинается синтез IgG. Длительное обнаружение IgM говорит об активности вируса и хронической стадии болезни. При хронической форме выявление IgM свидетельствует о поражении печени. Результат иммуноферментного анализа не является основанием для постановки диагноза, метод используется как скрининговый тест для выявления хронической формы. Обнаружив антитела к HCV и при подозрении на гепатит С необходимо пройти комплексное лабораторное обследование.

Иммуноферментный анализ серодиагностики позволяет обнаружить антитела к гепатиту С в 95% случаев хронической формы, при острой форме — точность метода 50−70%.

Серодиагностика не имеет 100% специфичности и чувствительности при диагностике вирусных гепатитов. Поэтому при оценке результатов необходимо учитывать симптоматику и использовать для диагностики несколько тестов, подтверждающих полученный результат. При оценке результатов серологических исследований следует учитывать анамнез заболевания, сведения о перенесенных заболеваниях и вакцинации, а также возможный контакт с источником инфекции.

infopechen.ru

Алгоритм серологической диагностики гепатитов - Eurolab

Маркер

Определение

Клиническая интерпретация

Маркеры  гепатита  А

HAV, RNA RNA вируса гепатита А Обнаруживаются в кале в первые дни после заражения. HAVAb, IgG/IgM Суммарные антитела против белков вируса гепатита А Свидетельствуют об острой инфекции или перенесенном гепатите А HAVAb, IgM Ранние антитела класса IgM против белков вируса гепатита А Свидетельствуют об острой инфекциивирусом гепатита А

Маркеры  гепатита E

HЕVAb, IgG/IgM Суммарные антитела против белков вируса гепатита Е Свидетельствуют об острой инфекции или перенесенном гепатите Е HEVAb, IgM Ранние антитела класса IgM против белков вируса гепатита Е Свидетельствуют об острой инфекциивирусом гепатита Е

Маркеры  гепатита В

HBsAg Поверхностный протеин вируса гепатита В Ранний маркер острого гепатита В (появляется через 3-5 недель после заражения), присутствует при хронической, в т.ч. бессимптомной  инфекции НВsAb Антитела против HBsAg  Перенесенный гепатит В, наличие защитного иммунитета, появляются также после вакцинации HBcAb Суммарные антитела (IgM и IgG) против  ядерного cor-белка вируса гепатита В (HВcAg в сыворотке  практически не выявляется) Маркер контакта с вирусом и  острая, хроническая или перенесенная инфекция. Важен в диагностике НВs – негативного гепатита. Антитела к НBc не являются защитными HBcAb, IgM Ранние антитела класса IgM против HBcAg Маркер острой инфекции и продолжающейся репликации вируса HBeAg Внутренний протеин вируса, кодируется общим с cor-белком геном вируса, но в отличии от HBcAg, HBeAg хорошо растворим и выявляется в сыворотке с момента репликации Маркер репликации вируса, концентрация HBeAg в сыворотке  прямо коррелирует с уровнем вирусемии.Один из важных показателей для назначения терапии препаратами интерферона HBeAb Антитела против HBeAg Маркер закончившейся активной репликации  вируса.Антитела к HBeAg не являются защитными HBV, DNA DNA вируса, прямое определение в ПЦР или реакции молекулярной гибридизации Свидетельствует об активном размножении вируса, и высокой инфекционности. Важен для диагностики мутантных форм гепатита В. Один из основных показателей для назначения терапии препаратами интерферона, маркер эффективности терапии

Маркеры  гепатита D (дельта)

HDV, RNA RNA вируса гепатита Дельта Наличие HDV RNA свидетельствует об активности процесса и коррелирует с максимумом воспалительно-некротических изменений в печени и экспрессией HDV RNA в тканях органа. Тест полезен при проведении противовирусной терапии HDVAg Антиген (специфический белок) вируса  Дельта Маркер  репликации и острой инфекции вирусом Дельта HDVAb, IgG/IgM Суммарные антитела  против белков вируса гепатита Дельта Маркер контакта с вирусом Дельта (острая или хроническая коинфекция) HDVAb, IgM Ранние антитела класса М против белков вируса гепатита Дельта Маркер  острой инфекции вирусом Дельта

Маркеры  гепатита С

HСVAb, IgG/IgM Суммарные антитела  противбелков вируса гепатита C Маркер контакта с вирусом C  (острая, хроническая или перенесенная инфекция) HCVAb, IgM Ранние антитела класса М против белков (core  или  NS 4)  вируса гепатита C Маркер  острой инфекции вирусом гепатита С. Показатель для назначения терапии препаратами интерферона HCV Western blot подтверждающий Суммарные антитела к отдельным поверхностным и внутренним белкам вируса гепатита С: core, E1, E2, NS3, NS4, NS5 Подтверждающий тест. Дифференциальная диагностика  стадий  инфекции вирусом гепатита С и определение целесообразности терапии препаратами интерферона HСV, RNA,+типирование РНК вируса РНК вируса, прямоеопределение методом ПЦР или реакции молекулярной гибридизации Свидетельствует об активной репликации вируса и высокой вирулентности. Важен для диагностики мутантных форм гепатита С. Один из основных показателей для назначения терапии препаратами интерферона, маркер эффективности терапии.

Маркеры  гепатита G

HGVAb, IgG Антитела класса против белков вируса гепатита G Острая инфекция или перенесенный гепатит G HGVAb, IgM Ранние антитела класса IgM против белков вируса гепатита G Острая инфекция вирусом гепатита G

www.eurolab.md

Серологические маркеры инфекций: расшифровка лабораторного ребуса

Со времени открытия серологических маркеров инфекций данный анализ является основным в лабораторных исследованиях. Цель его проведения – помощь в распознавании заболеваний инфекционного происхождения, а также выявление недугов, обусловленных нарушением защитных функций иммунной системы.

Диагностирование гепатитов, краснухи, сифилиса, ВИЧ и многих других болезней в наше время стало доступно благодаря анализам на серологические маркеры инфекций. Расшифровка результатов исследований помогает достаточно быстро определить наличие заболеваний, которые иногда бывает трудно выявить обычными способами.

Серологический метод исследования: помощь врачу в определении природы заболеваний

Анализ свойств и эффектов сывороток

Происхождение наименования «серология» — от лат. названия сыворотки (serum). Сочетание с известным logos означает «учение о сыворотке». Под серологией подразумевается раздел иммунологии, изучающий специфику взаимодействия антител сыворотки с антигенами.

Основа серологической диагностики – выявление специфических антител, образующихся в ответ на инфицирование определенным антигеном. По наличию в крови определенных антител делается заключение о характере и степени активности инфекции.

Серологический метод используется в диагностике:

  • герпеса
  • кишечных инфекций
  • цитомегаловируса
  • эпидемического паротита
  • атипичной пневмонии
  • краснухи
  • хламидиоза
  • токсоплазмоза
  • сифилиса
  • ВИЧ
  • кори
  • вирусных гепатитов В и C

Исследование применяют и в случаях, когда требуется выявление причин миокардитов.

Серологические реакции могут быть применены:

  1. В случае если нужно подтвердить диагноз. Практикуется добавление в сыворотку крови соответствующего антигена. Наличие антител доказывается либо опровергается характером ответной реакции.
  2. В случае, когда о характере заболевания ничего не известно, видовая принадлежность антигенов, находящихся в крови, выявляется добавлением антител.

Для проведения анализа из крови предварительно удаляют компонент, ответственный за свертываемость (фиброген).

Таким образом, цель проведения серологического анализа крови:

  • Постановка диагноза. Исследование показано в случае, когда требуется лабораторное подтверждение присутствия в сыворотке крови возбудителя.
  • Назначение лечения. Анализ поможет выявить реакцию возбудителя на различные лекарства.

Использование серологического анализа практикуется и при диагностике аутоиммунных заболеваний. Проведение процедуры помогает выявить антитела к тканям организма.

Серологические маркеры гепатитов: расшифровки результатов

Гепатит С

Вирусные гепатиты относятся к тому виду серьёзных инфекционных заболеваний, которые могут достаточно долго протекать, ничем себя особенно не проявляя. В трудности своевременного обнаружения и заключается его главная опасность.

Проведение анализа на маркеры, появляющиеся в крови как следствие введения вакцины или перенесенного заболевания, позволяет выявить гепатит в ранней фазе, в которой он лучше поддается излечению.

Виды вирусных гепатитов

Гепатит А

Этот вид (так называемая желтуха) встречается достаточно часто. Передается при употреблении инфицированных продуктов и воды. При его диагностике анализ делается на наличие антител:

  • Аnti-НАV IgМ. Существование в крови ранних антител свидетельствует о наличии вируса в организме не менее 25-30 дней.
  • Аnti-НАV IgG. Его наличие – свидетельство того, что пациент переболел данной формой гепатита в прошлом.
Гепатит В

Передается половым путем. Вирус может попасть в кровь и при использовании нестерильных инструментов. Распространен широко, при своевременном выявлении хорошо поддается лечению. По выздоровлении организм приобретает к вирусу пожизненный иммунитет. Нелеченый гепатит В, вероятнее всего, перейдет в хроническую форму, которая грозит осложнениями в виде цирроза и рака печени.

При выявлении гепатита В ищут следующие маркеры:

  • HВsAg. Специфический антиген, показывающий наличие заболевания.
  • Аnti-НВs. Его появление свидетельствует о завершении процесса.
  • Аnti-НВс IgG. Его длительное нахождение в организме указывает на течение процесса.
  • Аnti-НВс IgM. Его обнаружение является признаком начальной фазы заболевания.
  • Аnti-НВе. Его присутствие – признак вялотекущей формы гепатита.
Гепатит С

Наиболее тяжёлая форма заболевания. Поддается лечению лишь на ранних стадиях. Исход несвоевременно выявленной болезни – летальный.

По результатам исследований выявляются следующие маркеры:

  • Аnti-НСV. Свидетельствует о наличии заболевания.
  • Аnti-НСV IgM. Позволяет судить о достаточно недавнем заражении, что дает основания для благоприятного прогноза.
Гепатит D

Симптоматика та же, что и у гепатита В. Диагностируется присутствием аnti-НDV Ig G, характерного для гепатита В, дополненного аnti-НDV Ig M.

Гепатит Е

В целом подобен гепатиту А, но более опасен для беременных. Выявляется присутствием anti-HEV lg.

Гепатит G

По свойствам близок к гепатиту С, но менее опасен.

Маркеры внутриутробных инфекций: интерпретация результатов

Необходимые анализы во время беременности

Беременность – период, когда подверженность инфекциям становится достаточно острой проблемой для организма. Существует группа инфекций, которые опасны для беременных, в то время как для остальных групп пациентов не представляет угрозы. Названа эта группа ТОRСН-инфекциями. Название образовано из первых букв входящий в группу названий инфекций:

  • токсоплазмоз
  • другие инфекции (сифилис, листериоз, хламидиоз и др.)
  • краснуха
  • цитомегаловирусная инфекция
  • герпес

Выявленные антитела IgG означают наличие иммунитета к заболеванию. Препятствием для планирования беременности не являются.

Обнаружение IgM возможно лишь в острой стадии. Беременность можно планировать лишь после выздоровления.

Краснуха. Относится к инфекциям, передающимся внутриутробно. Перенесенное заболевание формирует пожизненный иммунитет. Тяжесть, с которой протекает заболевание, прямо пропорциональна возрасту больного. У плода инфицированной женщины велика вероятность развития тяжелых пороков. Сегодня есть возможность привиться от краснухи, тем самым избежав вероятности заболеть во время беременности. После прививки в течение некоторого времени в крови сохраняются титры IgM, поэтому от планирования беременности лучше воздержаться в течение 3 мес.

Перед прививкой нужно сделать серологический анализ, после которого можно принимать решение о проведении прививки.

Возможные результаты:

  • IgМ-, IgG-: обозначает отсутствие антител и необходимость вакцинации.
  • IgМ-, IgG+: показывает наличие иммунитета. Вакцинация не требуется.
  • IgМ+, IgG-: заболевание в ранней стадии, период обострения.
  • IgМ+, IgG+: период обострения.

Динамика отслеживается по степени понижения IgM и увеличения IgG. Заболевание опасно в острой фазе при положительном значении IgM.

Появление в крови IgM либо IgG, если ранее их у данной пациентки не наблюдалось, означает развитие заболевания. Такой же вердикт можно вынести при 4-кратном повышении за две-три недели количества IgG. Срок давности предыдущего обследования также имеет значение: антитела могут присутствовать в крови в течение 2 лет от начала заболевания. Поэтому наличие IgM не может интерпретироваться как признак острой инфекции. Наличие IgG в снижающемся количестве – не считается заболеванием и не представляет опасности.

Если заражение произошло во II или III триместре, заболевание излечимо.

Безопасный анализ: серологическое исследование при аллергии

Диагностические анализы

Диагностические анализы при аллергии проводят с помощью количественного определения иммуноглобулина Е. При этом способе аллергены связываются с антителами, образуя единый комплекс. В исследовании используется более 200 аллергенов.

Более тщательные исследования проводятся, когда нужно выявить тип и степень остроты реакции. Преимущество этого метода заключается в отсутствии прямого контакта пациента с аллергеном. При этом определяются общие и аллергенспецифические IgE.

В определении диагноза важны не только лабораторные исследования, но и другие данные. Сопоставить их и правильно диагностировать наличие заболевания может только врач, специализирующийся в данной области. Самолечением на основании расшифровки серологических анализов заниматься нельзя.

Июн 5, 2016Виолетта Лекарь

vselekari.com

ОСТРЫЙ ВИРУСНЫЙ ГЕПАТИТ: ЭПИДЕМИОЛОГИЯ, КЛИНИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ, ДИАГНОСТИКА РАЗЛИЧНЫХ ЭТИОЛОГИЧЕСКИХ ВАРИАНТОВ | Подымова С.Д.

Для цитирования: Подымова С.Д. ОСТРЫЙ ВИРУСНЫЙ ГЕПАТИТ: ЭПИДЕМИОЛОГИЯ, КЛИНИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ, ДИАГНОСТИКА РАЗЛИЧНЫХ ЭТИОЛОГИЧЕСКИХ ВАРИАНТОВ // РМЖ. 1998. №7. С. 7

Статья посвящена острым вирусным гепатитам, вызванным вирусами А, В, С, D, E, G. Описаны особенности эпидемиологии, клинического течения и прогноза этиологических вариантов острого вирусного гепатита. Подробно рассмотрены серологические маркеры различных вирусов, дана оценка клинической значимости выявляемых изменений с целью вооружить клиницистов достоверными диагностическими критериями различных этиологических вариантов вирусного гепатита и облегчить выбор профилактических и лечебных мероприятий.

Статья посвящена острым вирусным гепатитам, вызванным вирусами А, В, С, D, E, G. Описаны особенности эпидемиологии, клинического течения и прогноза этиологических вариантов острого вирусного гепатита. Подробно рассмотрены серологические маркеры различных вирусов, дана оценка клинической значимости выявляемых изменений с целью вооружить клиницистов достоверными диагностическими критериями различных этиологических вариантов вирусного гепатита и облегчить выбор профилактических и лечебных мероприятий.

The paper outlines acute viral hepatitides caused by primary hepatic viruses: A, B, C, D, E, G. It presents the epidemiological, clinical, and predictive features of etiological types of acute viral hepatitis, which makes it possible to approximately determine its etiology in a specific case. A comprehensive discussion of serological markers of different viruses and a clinical assessment of the changes found arm clinicians with valid diagnostic criteria for various etiological types of viral hepatitis and provide a guide in choosing preventive and therapeutical measures.

С.Д. Подымова, проф. Московской медицинской академии им. И.М.Сеченова, кафедра пропедевтики внутренних болезней (зав. - акад. РАМН В.Т. Ивашкин)

S.D.Podymova, prof. Department of Internal Propedeutics (Head - Prof. V.I.Ivashkin, Academician of the Russian Academy of Medical Sciences), I.M.Sechenov Moscow Medical Academy

Острый вирусный гепатит – одно из наиболее распространенных и опасных инфекционных заболеваний, в его основе лежат острые некрозы и воспаление печени, вызванные вирусами гепатита А, В, С, D, Е, G. Проявления острого гепатита разнообразны – от субклинических до быстро прогрессирующих и фатальных. В большинстве случаев заболевание протекает как самоограничивающийся процесс без осложнений. В зависимости от вида вируса наблюдается различная частота развития хронического заболевания печени, иногда субклинически протекающая инфекция переходит в быстропрогрессирующее хроническое поражение печени с развитием цирроза и даже гепатоцеллюлярного рака.

Этиологические варианты острого гепатита

Гепатит А

   Вирус гепатита А (HAV) был открыт S.Freinstone и его сотрудниками в 1973 г.    Эпидемиология. Вирус обладает устойчивостью во внешней среде, сохраняется в течение нескольких месяцев при температуре 4°С и несколько лет при -20°С. Вирус инактивируется при кипячении в течение 5 мин. Источником инфекции является больной вирусным гепатитом А (ВГА), (как желтушной, так и безжелтушной формой). Основными путями распространения вирусного гепатита А являются алиментарный, контактно-бытовой и водный. Заболевание возникает спорадически или в виде эпидемий, пик заболеваемости приходится на осенне-зимний период.    Диагностика. Для выявления HAV используют в реакции иммунофлюоресценции и иммуноферментный анализ. Вирус можно обнаружить в кале, моче, дуоденальном содержимом, крови больных в конце инкубационного, остром преджелтушном и раннем желтушном периодах болезни. С развитием желтухи выделение вируса уменьшается, а к моменту выздоровления (обычно 3-4 нед) прекращается. В остром периоде болезни у всех больных образуются специфичные к HAV антитела класса IgM, которые являются основным диагностическим маркером (табл.1). Затем их титр постепенно снижается, а в крови в течение длительного времени определяются антитела класса IgG и больные становятся невосприимчивыми к реинфекции. Защитная роль препаратов иммуноглобулина при HAV-инфекции связана именно с наличием в них антител класса IgG. В большинстве стран Европы и Америки эти антитела обнаружены у 40-80 % населения. Адекватность защитных иммунных реакций обеспечивает отсутствие хронического вирусоносительства и перехода в хронические формы.    Течение и прогноз. Инкубационный период продолжается от 2 до 6 нед. Клинические проявления ВГА зависят от возраста заболевших: субклинические и стертые формы наиболее характерны для детей, в то время как в юношеском возрасте и у взрослых чаще встречаются желтушные формы.    При инфекции HAV, как правило, наблюдается выздоровление. В редких случаях у взрослых отмечается клинический рецидив, обычно в течение первых 3 мес, напоминающий первичную атаку гепатита. Возможно развитие выраженного холестатического синдрома, фульминантные формы встречаются в 0,1 % случаев.

Гепатит В

   Вирус гепатита В (HBV) представляет собой двухспиральный ДНК вирус, (старое название – частицы Дейна). В наружную липопротеиновую оболочку вируса, расположенного в цитоплазме инфицированного гепатоцита, "встроены" молекулы поверхностного антигена НВsАg. Внутренняя оболочка вируса, проникающего в ядро гепатоцита, содержит внутренний антиген нуклеокапсида (НВсAg). НВеAg является субъединицей нуклеокапсида (внутренний компонент сердцевидной оболочки). Внутри оболочек находится геном вирионов гепатита В: маленькая двухспиральная молекула ДНК с небольшим односпиральным регионом и ферменты - ДНК-полимераза и протеинкиназа.    Геном HBV кодирует 4 продукта: поверхностные протеины (рге-S1, рге-S 2 и S), ядерные протеины (с- и е-протеины), ДНК-полимеразу (обратную транскриптазу), х-протеин.    Главная антигенная детерминанта – НВsAg – состоит из 3 компонентов: S-, pre-S1 и pre-S2-протеина. Pre-S- и pre-S2-протеины играют важную роль в прикреплении вириона и проникновении его в клетку и их относительно больше в полных вирионах, чем в частицах HBsAg. HBsAg может быть выявлен в сыворотке по крайней мере у 75 % инфицированных в острый период заболевания.Таблица 1. Серологические маркеры при вирусных гепатитах

Возбудитель

Маркеры

Диагностическое значение

HAV- Aнти-HAV IgM Имеющая или недавно перенесенная инфекция
IgG Инфекция в настоящем или прошлом; указывает на иммунитет
HBV HBsAg Положительный в большинстве случаев острого или хронического гепатита
НВсАg В сыворотке обычно не определяется
НВеАg Транзиторно- положительный при репликации вируса
Aнти-НВс (IgM, IgG) Положительные в случаях острой и хронической инфекции и у носителей - маркеры HBV-инфекции; не протективные; наличие анти-НВс IgM отражает репликацию вируса
Анти-НВе Транзиторно-позитивные при реконвалесценции

при некоторых формах хронической инфекции и у носителей, не протективные, отражают низкую инфекционность

Анти-HBs Становится позитивным в позднюю фазу реконвалесценции в большинстве острых случаев, протективные
pre-S1 Аg Маркер инфекционности и высокого риска вертикальной передачи HBV
Анти-pre S2 Маркер выздоровления после HBV и высокой эффективности вакцинации
HCV анти-HCV Становятся позитивными через 5- 6 нед после появления клинических симптомов; непротективные; серопозитивные лица должны рассматриваться как инфицированные
HDV Дельта Ag анти-HDV (IgM или IgG) Маркер наличия HDV

Указывают на инфицированность, не протективные

HEV Анти-HEV: IgM IgG Имеющаяся или недавняя инфекция, реконвалесценция Инфекция в настоящем или прошлом; указывает на иммунитет

 

   Ядерный протеин HBV состоит из нуклеокапсида, сформированного из агрегированных димеров НВсAg (core – протеин), которые включают циркулярную ДНК с неполной двойной цепью и ДНК-полимеразу/обратную транскриптазу. НВсAg является внутренней частью полного вириона.    НВеAg представляет собой протеин, образующийся при специфическом саморасщеплении pre-core в core. В отличие от core-протеина НВсAg, НВеAg не участвует в формировании капсида и выделяется за пределы клетки. Функция НВеAg до конца не ясна, но он может служить индуктором толерантности организма к HBV. Каждый из перечисленных антигенов вызывает гуморальный иммунный ответ (образование соответственно антител анти-НВs, анти-НВс и анти-НВе) при HBV-инфекции.    ДНК вируса может быть обнаружена в сыворотке с использованием техники молекулярной гибридизации, включая полимеразную цепную реакцию (ПЦР), и является наиболее чувствительным показателем присутствия вируса.    В последние годы идентифицировано несколько мутантов HBV (W.Carman и соавт., 1993). Первая категория мутации, при которой изменяется структура главной детерминанты НВsAg (которая представляет собой основную мишень для вакцины против HBV), является причиной сохранения инфекции, несмотря на активную иммунизацию против "дикого" типа вируса.    Вторая категория мутаций поражает pre-core/core- ген. Обычно следствием этого является невозможность экспрессии HBeAg, хотя организм продуцирует анти-НВе-антитела. При этом формирование НВсAg не нарушается и, следовательно, продолжается репликация вируса. По-видимому, мутантные вирусы могут возникать при заражении "диким" типом под влиянием иммунного ответа организма. Существует мнение, что мутанты по области pre-core вызывают более агрессивное течение острого или хронического гепатита. Другие мутации встречаются значительно реже и поражают гены ДНК-полимеразы/обратной транскриптазы и х-протеина.    Эпидемиология. Инфекция HBV - одна из самых распространенных вирусных инфекций человека. По данным ВОЗ, более 1/3 населения мира уже были инфицированы HBV и 5 % из них являются носителями этой инфекции.    HBV высокоустойчив к внешним воздействиям. В условиях комнатной температуры сохраняется 3 мес, в холодильнике – 6 мес, в замороженном виде – 15-20 лет, в высушенной плазме – 25 лет. Свою инфекциозность теряет при автоклавировании в течение 30 мин, при стерилизации сухим паром – в течение 60 мин при 160 °С.    Основная масса случаев заболевания связана с инструментальным заражением (шприцы, иглы, зубоврачебные инструменты, приборы и др.), значительно меньшая – с введением не проверенных на НВV препаратов крови. Накоплены данные о существовании "естественного" пути передачи вируса при тесном контакте (мать – ребенок), половым путем, а также других путей бытового заражения, связанных с повреждением кожных и слизистых покровов. Особенно подвержены риску заражения пациенты, находящиеся на гемодиализе, а также определенные социальные группы - мужчины-гомосексуалисты, мужского пола, наркоманы, проститутки. К группе повышенного риска заражения HBV относятся медицинские работники, имеющие контакт с кровью и ее компонентами.    Особенности клинической картины. Инкубационный период острого гепатита В (ОГВ) варьирует от 4 нед до 6 мес, составляя в среднем 50 дней. Первые серологические маркеры виремии могут, однако, выявляться уже через 2 нед, особенно при массивном парентеральном заражении.    HBsAg начинает определяться в сыворотке в сроки от 2 нед до 2 мес до появления клинических признаков заболевания. Анти-НВс обнаруживаются приблизительно одновременно с клиническими симптомами и повышением активности трансаминаз сыворотки. Первоначально в высоком титре выявляются анти-НВс IgМ, которые сохраняются в сыворотке от нескольких месяцев до 1 года; впоследствии доминируют анти-НВс IgG. Анти-НВс IgG могут персистировать в течение нескольких лет после острого гепатита и определяться у всех хронических носителей. Они не несут защитной функции, а скорее служат маркером перенесенной HBV-инфекции.    Маркеры активной репликации - НВеAg, ДНК-полимераза и ДНК HBV - обычно можно выявить в сыворотке до начала роста активности трансаминаз. Продолжительность наличия НВsAg варьирует в широких пределах: от нескольких дней до 2-3 мес; персистенция более нескольких месяцев может указывать на хронический процесс. Характерно, что HBsAg перестает определяться перед появлением анти-НВs. Эти антитела наблюдаются у 80-90 % больных, особенно в период реконвалесценции, и указывают на относительный или абсолютный иммунитет. Их обнаружение свидетельствует об адекватном иммунном ответе на инфекцию.    Необходимо сделать несколько замечаний относительно интерпретации результатов серологических тестов при ОГВ. Во-первых, у определенного числа больных ОГВ в сыворотке не определяется HBsAg, чаще всего из-за его низкой концентрации. Ввиду этого отсутствие HBsAg не исключает диагноз ОГВ. В этом плане более чувствительным маркером являются анти-HBc, которые могут быть единственным серологическим маркером инфекции. Отрицательные результаты теста на анти-НВс с большой долей вероятности исключают диагноз ОГВ.    С другой стороны, положительный результат теста на анти-НВс при отсутствии HBsAg может быть просто следствием перенесенного ранее ОГВ. Больные без HBsAg, но с наличием анти-НВс могут быть дифференцированы на основании определения анти-HBs: положительные результаты теста на анти-HBs в начале заболевания позволяют исключить диагноз ОГВ.    Обнаружение анти-НВс IgМ свидетельствует либо о недавно перенесенном ОГВ, либо о хроническом гепатите В в фазу активной репликации вируса. У пациентов с перенесенным ранее острым гепатитом и клиническими признаками активного заболевания печени при отсутствии анти-НВс IgМ можно предполагать суперинфекцию HDV или другую вирусную или невирусную причину заболевания. Положительный тест на НВеAg или ДНК HBV является несомненным доказательством продолжающейся репликации HBV.    Клиническое течение ОГВ более вариабельно и более продолжительно, чем ВГА. Нередко наблюдаются внепеченочные проявления: крапивница и другая кожная сыпь, артрит и существенно реже – гломерулонефрит и васкулит. С HBV-инфекцией ассоциировано более 1/3 случаев узелкового периартериита.    Прогноз. По крайней мере 95 % больных ОГВ без сопутствующей патологии выздоравливают полностью с исчезновением НВsAg. Менее чем у 1 % развивается массивный некроз печени, но это осложнение встречается более часто, чем при ВГА. У 5-10 % больных с сохраняющимся HBsAg более 6-12 мес имеется риск развития хронического гепатита.   

Гепатит D

   Инфекция, вызванная вирусом гепатита D (HDV) или "дельта-агентом", этим необычным возбудителем, может рассматриваться как осложнение гепатита В. HDV представляет собой неполный РНК-вирус. Инфекция HDV требует предшествующего или одновременного инфицирования HBV, который выступает как вирус-хелпер. НВsAg, покрывающий вирусную частицу, несомненно способствует гепатотропности и клеточному захвату HDV. Несмотря на это, состав самого вириона HDV характеризуется недостатком рге-S1 и рге-S2 пептидов, которые способствуют проникновению вириона в гепатоцит.    Эпидемиология. Более 5 % носителей HBV-инфекции в мире инфицированы также HDV. Распространенность HBV и HDV во многом совпадает, но варьирует в разных регионах. Передача происходит контактным путем, при гемотрансфузии или через зараженные иглы.    Заболевание не является эндемичным, для него характерны отдельные вспышки. Особенно в регионах с высокой инфицированностью, где передача инфекции наблюдается в основном среди молодых людей при повреждениях кожных покровов или половых контактах. Перинатальная передача не играет большой роли.    Клинические особенности. Одновременное инфицирование HBV и HDV (коинфекция) приводит к развитию острого гепатита смешанной этиологии. Длительность инкубационного периода такая же, как при гепатите B (1,5-6 мес). Преджелтушный период характеризуется более коротким острым течением с ранними симптомами интоксикации.    Характерны более высокая лихорадка, артралгии, могут быть боли в области печени. В желтушном периоде более выражены симптомы интоксикации, и боли в области печени, отмечается спленомегалия. Особенностью смешанной инфекции является наличие клинико-ферментативных или только ферментативных симптомов обострения, возникающих на 15-32-й день болезни. При этом активность АсАТ выше, чем активность АлАТ, одновременно повышается значение тимоловой пробы, что нехарактерно для острого гепатита.    При коинфекции дельта-антиген может быть выявлен в сыворотке крови больных через 4-7 дней после появления желтухи и в течение 1-2 последующих недель. Практически параллельно с дельта-антигеном обнаруживается РНК HDV.    О наличии HDV-инфекции свидетельствует обнаружение анти-HDV класса IgМ. При полностью развернутой картине заболевания и в период реконвалесценции определяются анти-HDV класса IgG. Почти во всех случаях в сыворотке присутствуют также HBsAg и анти-НВс. Персистенция анти-HDV IgМ коррелирует с активностью HDV-инфекции и повреждением печени.    В отличие от коинфекции при суперинфекции анти- HDV класса IgG регулярно выявляются уже в остром периоде болезни.    Острый вирусный гепатит D у носителей HBsAg характеризуется более коротким инкубационным периодом (1-2 мес), острым началом болезни с болями в правом подреберье, лихорадкой, усилением клинических симптомов при появлении желтухи, отечно-асцитическим синдромом, нарушением белково-синтетической функции печени, наличием анти-дельта IgМ, или дельта-антигена, наряду с HBsAg появляются анти-НВе и анти-НВс IgМ.    Течение и прогноз. Не доказано, что у больных с одновременным острым инфицированием HBV и HDV увеличивается частота развития хронического гепатита, но частота развития острой печеночной недостаточности выше, чем при ОГВ.    У лиц, хронически инфицированных HBV, острая суперинфекция HDV может вызвать обострение гепатита В, также становится хронической и ассоциирована с гистологическими признаками хронического активного гепатита. В более ранних исследованиях отмечалось, что HDV-инфекция не способствует развитию гепатоцеллюлярной карциномы, однако последние данные свидетельствуют об обратном.    При суперинфекции может произойти элиминация HDV или больные становятся хроническими носителями как HBV так и HDV.   

Гепатит С

   В 1989 г. Houghton и соавт. выделили вирус гепатита С (HCV), и это название теперь пришло на смену термину "гепатит ни А ни В с парентеральным механизмом передачи".    HCV представляет собой РНК-содержащий флавивирус, покрытый липидной оболочкой. Вирусный геном содержит предполагаемый ядерный участок р22, два участка, кодирующих гликопротеиды оболочки (Е1 и Е2), и четыре неструктурных (NS) участка, кодирующих ферменты, которые играют роль в репликации вируса. Вариабельностью генома во многом обусловлены отсутствие иммунитета против реинфекции HCV возможность множественного инфицирования различными вариантами HCV. Эти особенности вируса препятствуют созданию вакцины и могут влиять на эффективность антивирусной и иммуномодулирующей терапии при хронической HCV-инфекции.    Эпидемиология. РНК HCV определяется в сыворотке инфицированных лиц, но в существенно более низких концентрациях, чем при гепатите В. Обычно возбудитель переносится при массивном заражении, например, гемотрансфузиях; существенно менее вероятны пути переноса, характерные для HBV-инфекции (перинатальный, половой, семейные контакты). Риск заражения среди медицинских работников через случайные уколы иглами, инфицированными HCV, составляет от 4 до 10 %. Инфицирование часто происходит при внутривенном введении наркотиков, продуктов плазмы, а также при гемодиализе. Возможно инфицирование реципиентов при трансплантации органов от HCV позитивных доноров. Тот факт, что более чем в 40% острых спорадических случаев HCV-инфекции не удается выявить факторы риска, указывает на возможность межличностной передачи, но механизм ее точно не известен [1].    HCV является главной причиной посттрансфузионного гепатита; по данным ВОЗ (1988), на его долю приходилось до 70 % всех случаев заболевания [2]. Число носителей HCV составляет более 500 млн человек, а частота инфицирования в основных группах риска составляет до 80% [3].    Диагностика. При выявлении антител к HCV наибольшее распространение благодаря своей надежности и чувствительности получил иммуноферментный метод (ELISA). В настоящее время для скрининга доноров широко используется тест-система третьего поколения ELISA-3, которая обладает значительно большей чувствительностью и специфичностью по сравнению с системами предыдущих поколений.    Использование ELISA-3 дает почти 100 % гарантию выявления носителей анти-HCV при диагностике вирусных заболеваний печени. Однако в двух случаях антитела могут быть не обнаружены. Во-первых, появление анти-HCV в крови может происходить в срок до 6 мес после инфицирования (в среднем через 12 нед), т. е. в определенный период течения инфекции имеется так называемое "серологическое окно". Во-вторых, антитела могут не выявляться у больных, получавших иммуносупрессивную терапию (например, после трансплантации органов). Несмотря на высокую специфичность ELISA-3 (99,7 %) возможны также ложноположительные результаты. Учитывая это, предложены подтверждающие тесты, такие как рекомбинантный иммуноблоттинг (RIBA) и получивший меньшее распространение анализ синтетических пептидов (Inno-Lia).    У большей части RIBA-положительных лиц вирус находится в состоянии репликации, что подтверждается выявлением у 75 – 80 % из них РНК HCV. Отсутствие РНК при наличии анти-HCV может быть связано с элиминацией вируса после перенесенной инфекции, низким уровнем виремии (ниже порога чувствительности ПЦР), либо ложноположительным результатом обнаружения антител.    Клинические особенности. Инкубационный период после заражения составляет от 5 до 7 нед, после чего наблюдаются повышение активности трансаминаз и другие клинические проявления. Остается неясным, являются ли острые повреждения печени результатом цитотоксического действия вируса, иммунного ответа организма или в их возникновении принимают участие оба механизма.    Клинические симптомы и лабораторные показатели при гепатите С неотличимы от таковых при других вариантах острого гепатита.    Было выявлено, что HCV реплицируется не только в печени, но и в мононуклеарных клетках периферической крови и в клетках иммунной системы, расположенных в различных органах [4]. Этим объясняется достаточно частое сочетание его с такими заболеваниями, как криоглобулинемия, синдром Шегрена, хронический гломерулонефрит, узелковый периартериит.    Тесты иммуноферментного анализа 1-го поколения на HCV становятся положительными только через 12 нед или позже, тесты 2-го поколения ELISA-2 и RIBA дают положительные результаты иногда через 2 нед, но чаще между 5 и 6-й неделей после инфицирования, т.е. в конце инкубационного периода. Тесты ELISA-2 и ELISA-3 и дополнительный анализ RIBA положительны почти во всех случаях постинфузионного гепатита С. Анализ на РНК HCV при помощи ПЦР становится положительным не ранее чем через 2 нед после инфицирования.    Диагноз подтверждается на основании положительных результатов исследования на серологические маркеры и/или РНК HCV. В неясных случаях может быть полезно определение РНК HCV. ПЦР может быть использована для оценки активности вирусной репликации у тех больных, у которых поражение печени может быть вызвано несколькими этиологическими факторами.    Течение и прогноз. Острая HCV-инфекция только в редких случаях может быть причиной массивного некроза печени и фульминантной печеночной недостаточности. При этом HCV-инфекция значительно чаще приобретает хроническое течение, чем HBV-инфекция. Персистирование HCV может наблюдаться у больного несмотря на нормализацию активности трансаминаз сыворотки, отрицательный тест на РНК HCV, в этих случаях РНК обнаруживается в печени и других тканях.    Примерно 50-79 % больных с посттрансфузионным гепатитом С становятся хроническими HCV-носителями. Поздними осложнениями заболевания могут быть цирроз и гепатоцеллюлярная карцинома.

Гепатит Е

   Вирус гепатита Е (НЕV) был идентифицирован в 1983 г. при проведении эксперимента с заражением добровольца материалами, полученными от больных, у которых был заподозрен гепатит В [5]. HEV существует в виде единственного серотипа (в пределах возможностей стандартных серологических методов с использованием поликлональных антител), хотя вариации в 15-20 % нуклеотидных последовательностей у штаммов, выделенных в разных географических районах, встречаются достаточно часто.    Эпидемиология. НЕV передается почти исключительно фекально-оральным путем. Наиболее сильно контагиозность НЕV проявляется в том случае, если заражение происходит при употреблении зараженной воды и пищи, в то время как контактная передача от человека к человеку, столь характерная для гепатита А, реализуется значительно реже.    Клинические особенности. Острый гепатит наблюдается в основном у подростков и молодых людей в возрасте от 15 до 40 лет, крайне редко поражаются дети и пожилые люди. Инкубационный период составляет от 2 до 9 нед, в среднем 6 нед, т.е. достоверно больше, чем при гепатите А.    Вирус начинает выявляться в крови, желчи и кале в конце инкубационного периода так же, как при гепатите А. В сыворотке вирус обнаруживается в течение 10 дней от появления клинических признаков заболевания. Печень, по-видимому, служит единственной мишенью для HEV, поэтому внепеченочные проявления – кожная сыпь и артралгии – наблюдаются редко.    Клинические проявления типичны для острого гепатита, следует отметить более высокую частоту желтушных форм. Также описаны субклинические формы, особенно у детей. Активность АлАТ и АсАТ достигает сразу высоких, предельных для данного больного значений. Исходя из того, что у экспериментально зараженных HEV обезьян на 7-10-й день после заражения наблюдается еще один пик повышения активности трансаминаз, можно предположить, что и у больных имеется первый подъем активности ферментов в продромальный период, когда биохимические исследования еще не проводятся.    Течение и прогноз. Заболевание протекает остро и заканчивается спонтанным выздоровлением через 2-3 нед. Гиперферментемия может иногда сохраняться в течение 1-2 нед после исчезновения желтухи. При остром гепатите Е может развиваться длительный холестаз. Доказательств перехода в хронические формы нет. Однако уровень смертности при эпидемическом гепатите Е значительно выше, чем при других формах острого вирусного гепатита (от 1 до 2 % в общем, среди беременных достигает 20%, особенно в III триместре). Причиной летальных исходов является фульминантная печеночная недостаточность. Быстро развивающаяся интоксикация сопровождается на первых этапах гемоглобинурией и олигоурией, часто переходящими в анурию. Очень быстро к ним присоединяются геморрагический синдром и энцефалопатия. В этот период исход болезни во многом зависит от рациональной тактики ведения больных в отделениях интенсивной терапии.    Диагноз. ОГВ может быть заподозрен в эпидемических случаях у лиц с "острым ни А ни В гепатитом". Иммуноферментный анализ позволяет выявить анти-HEV IgМ и/или IgG. Антитела класса IgМ присутствуют в сыворотке от 2 до 24 нед после острого начала болезни. Анти-HEV IgG также появляются через 2 нед и обычно их титр начинает снижаться после 2 лет, хотя иногда высокие титры могут наблюдаться в течение многих лет. По выздоровлении от острого заболевания, по-видимому, развивается пожизненный иммунитет.   

Гепатит G

   Вирус гепатита G (HGV, или GBV-C) был обнаружен F. Simons и соавт. в 1995 г. и независимо выделен Linnen и соавт. из плазмы больного хроническим гепатитом С в 1996 г. Было обнаружено, что геном данного возбудителя подобен геному представителей семейства флавивирусов. Пока не существует сывороточной пробы для диагностики активной или перенесенной инфекции HGV. Заражение HGV может выявляться только при обнаружении РНК в ПЦР.   Эпидемиология HGV мало изучена. Гепатит G относится к инфекциям с парентеральным механизмом передачи возбудителя. РНК GBV-C/HGV была обнаружена у 1-2 % добровольных доноров. В Европе и США HGV-инфекция часто встречается у больных хроническим гепатитом С (20%), хроническим гепатитом В (около 10 %), а также при аутоиммунном (10 %) и алкогольном гепатите (10 %). Еще чаще РНК HGV обнаруживают у людей, парентерально соприкасающихся с кровью или ее продуктами: у 20 % пациентов, которым проводилось переливание крови, у 20% больных гемофилией и примерно у 30 % лиц, вводивших наркотики внутривенно. Вирус можно обнаружить в сыворотке, плазме, мононуклеарных клетках периферической крови и слюне. РНК HGV часто обнаруживают у больных с пересаженными почками, печенью и сердцем. В этих случаях проведение иммунодепрессии способствует развитию хронического носительства HGV. Заражение HGV может быть основной причиной хронического гепатита у некоторых групп риска, отдельно или в сочетании с HBV и НCV.    Клинические особенности. Острый гепатит G протекает в клинически выраженной и бессимптомной формах. Характерно умеренное повышение активности трансаминаз сыворотки. Последние сообщения свидетельствуют о том, что HGV может вызывать острый скоротечный гепатит. Фульминантный гепатит, вызванный GBV-C/HGV, характеризуется относительно медленным развитием печеночной недостаточности (от 16 до 45 дней), значительными колебаниями активности трансаминаз и высокой смертностью [8]. Инфекция HGV может перерасти в хроническое заболевание печени с длительным выявлением РНК GBV-C/HGV и, возможно, в гепатоцеллюлярную карциному.    Клиническая особенность HGV-инфекции – появление биохимических признаков холестаза с увеличением активности гаммаглутамилтранспептидазы и щелочной фосфатидазы [9]. Возможно, HGV вызывает специфическое поражение желчных протоков с синдромом внутрипеченочного холестаза.    Применение медикаментов ограничено. Основными препаратами являются аскорутин, ундевит, липамид. Назначение витаминов В1, В2, В6, В12 в инъекциях не показано в отсутствие специфической недостаточности. Как неспецифические иммуностимуляторы применяют аскорбиновую кислоту, рибоксин. Специфическое лечение острого гепатита до настоящего времени не получило достаточного распространения. Высокая частота хронизации гепатита G побудила к применению интерферона (ИНФ) для воздействия на вирус в фазу острой инфекции именно при этом варианте гепатита. Обычно используется a-2а- и a-2в-ИНФ в дозе 3 000 000 МЕ 3 раза в неделю внутримышечно или подкожно в течение 4-8 нед и более. M.Omata и соавт. (1991) отметили биохимическую ремиссию у большинства больных острым гепатитом G, получавших a-ИНФ. Через 3 года наблюдения выявлено, что у больных с биохимической ремиссией стали также отрицательными тесты на РНК HCV. Показано снижение частоты хронизации гепатита G при использовании ИНФ. Однако для окончательных выводов о том, снижает ли терапия ИНФ частоту хронизации острого гепатита G, необходим более длительный период наблюдения.    Больных с молниеносными формами острого вирусного гепатита с признаками печеночной энцефалопатии переводят в отделения интенсивной терапии, где не только осуществляют определение центрального венозного давления, контроль pH, сахара, электролитов крови, но и при необходимости производят мониторинг внутричерепного давления.   Прогноз улучшается при тщательном наблюдении и своевременной реализации комплекса лечебных мероприятий, включая коррекцию электролитного состава и pH крови, подавление патологической флоры толстой кишки и кортикостероидную терапию. Последняя применяется для предупреждения и снятия отека головного мозга. При развитии инфекционных осложнений на фоне острой печеночной недостаточности назначают пенициллин в дозе 3 000 000 – 6 000 000 ЕД/сут или ампициллин и оксациллин в дозах 2-3 г/сут. Необходимо своевременно рассмотреть вопрос о трансплантации печени.    Профилактика острых гепатитов начинается с санитарного просвещения населения, общегигиенических мероприятий, мер по предотвращению заражения медицинского персонала; важно также раннее выявления заболевших, скрининг доноров.    В период острого заболевания (особенно при гепатитах А и В, которые передаются фекально-оральным путем), важную роль играют общегигиенические мероприятия. Следует свести к минимуму контакт заболевшего со здоровыми и тщательно обеззараживать выделения. Необходимы проведение саниерование питьевой воды и стоячих вод, важна личная гигиена. Особенно большое профилактическое значение имеет раннее распознавание безжелтушных форм эпидемического гепатита: тщательное эпидемиологическое обследование очага, систематическое (1 раз в 15-20 дней) определение активности альдолазы и аминотрансфераз сыворотки крови.    Профилактика сывороточного гепатита состоит в механической очистке и эффективной стерилизации инструментария. При проведении каждой процедуры (прививка, диагностический тест) должны использоваться надежно простерилизованные иглы и шприцы. Важнейшей задачей является обеспечение медицинских учреждений шприцами разового пользования. Необходимы тщательное наблюдение за донорами и проверка используемых для парентерального введения препаратов крови и ее компонентов на содержание HBsAg.    Основным методом профилактики гепатитов А и В является вакцинация лиц с повышенным риском заражения. Имеется специфическая вакцина против гепатита А, а также плазменная и рекомбинантная вакцина против HBV. Для пассивной иммунизации используются специфические иммуноглобулины против HAV и HBV. Вакцина для профилактики гепатита С разрабатывается.    Несмотря на достигнутый прогресс в диагностике и профилактике вирусного гепатита В остается много нерешенных проблем как в преодолении вакцинной резистентности к мутантным штаммам HBV, так и в осуществлении глобальной вакцинации.

Литература:

   1. Alter MJ. Transmission of hepatits C virus – route, dose, and titer (editorial). N Engl J Med 1994; 330:784.    2. Шахгильдян И.В., Кузин С.Н., Хухлович П.А. и др. Эпидемиологическая характеристика гепатита// Рос. журн. гастроэнтеролог., гепатол., колопроктол. – 1995. – № 2. – С. 15–20.    3. Ивашкин В.Т., Хазанов А.И., Васильев А.С. и др. Вирусы гепатитов В и С: эпидемиология, роль в патогенезе острых и хронических заболеваний печени// Рос. журн. гастроэнтерол. и гепатол. – 1994. – №. 2. – С. 12–15.    Инфекционные болезни. Руководство для врачей/Под ред. В.И. Покровского. – М.: Медицина, 1996, 528 с.    4. Gumber S.C. et al. Hepatitis C: A Multifaceted Disease. Review of Extrahepatic Manifestations. Ann Intern. Med. 1996; 23:615–20.    5. Балаян М.С. Вирусный гепатит В// Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. – 1995. – Т. 20. – С. 32–37.    6. Simons F.N., Pilot-Martias T.F., Leary T.P., Dawson O.T., Desai S.M., Schlauder G.G. et al. Identification of two flavivirus-like genomes in the GB hepatitis agent. Proc Nat Acad Sci USA 1995; 92:3401–5.    7. Linnen J., Wages J., Zhang-keck Z., Ery K.E. et al. Molecular Cloning and Disease association of Hepatitis G Virus: A Transfusion – Transmissible Agent. Hepatitis GB – Virus GBV–C Selected Bibliography 1996. Science 1996: 271;43–7.    8. Yoshiba M., Okamoto H., Mishiro Sh. Detection of the GBV-C hepatitis virus genome in serum from patients with fulminant hepatitis of unknown actiology. Lancet 1995; 346:1131–2.    

Поделитесь статьей в социальных сетях

Порекомендуйте статью вашим коллегам

www.rmj.ru

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ВИРУСНЫХ ГЕПАТИТОВ. Болезни печени и желчного пузыря |

Первичное обследование на заболевание гепатитом в независимости от его разновидности начинается со сдачи анализов крови и мочи и общего осмотра. При анализе мочи определяют изменение ее цвета, при анализе крови – количество лейкоцитов, лимфоцитов и СОЭ, а при осмотре врач выявляет наличие желтухи, увеличена ли и уплотнена ли печень и повышена ли болевая чувствительность ее нижнего края.

При подозрении на гепатит следуют дальнейшие обследования. Для оценки степени поражения печени и определения, связана ли желтуха с воспалением печени, необходимы биохимические анализы крови и мочи. Анализы определяют уровень желчного пигмента билирубина, образующегося в печени в результате распада эритроцитов. При гепатитах концентрация свободного и связанного билирубина в крови резко повышается, а когда уровень билирубина превышает 200–400мг/л и при этом есть признаки желтухи, то это верный признак гепатита.

Другим показателем, говорящим о тяжести течения вирусного гепатита, является изменение протромбинового индекса. Его определяют с помощью тимоловой пробы. Еще можно с помощью белков, синтезируемых печенью, провести специальные тесты на свертываемость крови. Здесь диагнозом служит положительная реакция мочи на уробилин.

Отдельным видом диагностики вирусных гепатитов являются серологические методы. С их помощью обнаруживают антитела и антигены в крови и других жидкостях организма. Одним из таких методов является иммуноферментный анализ (ИФА).

Иммуноферментный анализ является универсальным, широко используемым на практике методом диагностики гепатита. Он предназначен для выявления вирусных белков, или антигенов, вырабатываемых иммунной системой после попадания вирусов в организм человека. Наличие этих белков позволяет поставить точный диагноз, оценить характер заболевания и помочь врачу выбрать правильный способ лечения.

Для выявления антигенов существуют так называемые тест‑системы, выпускаемые в виде полистироловых планшетов с 96 лунками. На дно лунок заранее сорбируются антитела к тому или иному антигену возбудителя гепатита. На первом этапе в каждую лунку добавляют, например, сыворотку крови больного в разных концентрациях, содержащую пока не определенный вирусный антиген. Если этот антиген совпал с антителом, то происходит их связывание. Для выявления результата в лунки затем добавляют специальный фермент, который окрашивает раствор в желто‑коричневый цвет. После этого планшет промывают, и из тех лунок, где антиген был полностью связан с антителом и уже не сможет взаимодействовать с добавляемым соединением, он легко смывается. Так выясняют, антиген какого вируса содержится в крови больного.

К достоинствам этого метода можно отнести простоту методики, высокую чувствительность и возможность обследования одновременно большого количества пациентов. В качестве недостатков можно отметить необходимость наличия специального дорогостоящего оборудования и квалифицированного персонала.

Вторым серологическим методом диагностики вирусных гепатитов является метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). С его помощью можно найти в организме нуклеиновые кислоты ДНК и РНК, а затем провести прямую идентификацию инфекционного агента или генетической мутации в любой биологической среде. С точки зрения клинической медицины выявление в исследуемом объекте нуклеиновой кислоты равнозначно обнаружению там возбудителя болезни. Теоретически ПЦР позволяет обнаружить даже одну искомую молекулу нуклеиновой кислоты среди миллионов других. Метод ПЦР анализа также дает возможность оценить качество лечения путем контроля за наличием или отсутствием возбудителя.

В основе метода полимеразной цепной реакции лежит способность ДНК и РНК к воспроизводству. В случае подозрения на вирусный гепатит у больного берут образец ткани и сначала выделяют нуклеиновую кислоту, которая имеет свою уникальную последовательность нуклеотидов, из которых она состоит. Для каждого возбудителя болезни составлена своеобразная тестовая карта. Кроме этого, для проведения ПЦР нужны праймеры – короткие участки ДНК, соответствующие участкам выделенной из образца нуклеиновой кислоты. Праймеры обеспечивают возможность и специфичность реакции. Еще нужны специальные ферменты, или полимеразы, без помощи которых реакция невозможна.

ПЦР‑анализы проводят в несколько этапов, по окончании которых получаются точные копии распознаваемого участка матричной нуклеиновой кислоты. Количество этапов составляет от 30 до 50 в соответствии с заданной программой. Конечный продукт реакции распознается с помощью электрофореза, проводимого в геле.

Для каждого вида возбудителя вирусных гепатитов разработаны системы тестов, но лучше всего метод ПЦР диагностирует вирусы гепатитов В, С и D, и это вообще единственная возможность обнаружить вирус гепатита G. Для диагностики гепатита В метод ПЦР тоже важен, так как среди множества разновидностей этого вируса встречаются такие, которые не определяются другими серологическими тестами. Что же касается гепатита С, то для его обнаружения применение ПЦР стало поистине находкой. Метод позволяет выявлять вирус гепатита С на самом раннем этапе заболевания. Уже через неделю после инфицирования вирус гепатита С можно обнаружить в сыворотке крови. Также можно распознать и генетические разновидности этого вируса, что позволит врачу назначить правильное лечение.

Кроме перечисленных методов диагностики вирусных гепатитов для выявления заболевания используют все методы исследования печени, описанные выше. В частности, ультразвуковое обследование органов брюшной полости и биопсию.

for-medic.info

Лабораторная диагностика вирусных гепатитов - презентация онлайн

1. Лабораторная диагностика вирусных гепатитов Основные диагностические маркеры вирусов

Шевченко Н.И.

2. Вопросы, разбираемые на лекции

Классификация и основные характеристики вирусов, вызывающих острые и хронические гепатиты. Парэнтеральные гепатиты. Особенности строения и репродукции вируса гепатита В. Основные маркеры, обнаруживаемые в материалах от больных. Гепатит D. Особенности патогенеза и клиники коинфекции и суперинфекции вирусом гепатита D. Интерпретация результатов. Строение и репродукция вирусов гепатита С и G. Вирусные маркеры. Специфичность, чувствительность и прогностическое значение результатов отдельных методов. Энтеральные гепатиты: пути заражения, особенности патогенеза и клинических проявлений гепатитов А и Е. Отбор образцов для анализов. Основные вирусологические маркеры энтеральных гепатитов.Вирусные гепатиты – группа полиэтиологичных антропонозных вирусных инфекций, характеризующихся поражением печени.

4. Вирусные гепатиты

Существуют и другие заболевания, характеризующиеся полиорганностью поражения ,и в том числе – поражением печени. Такие гепатиты не являются самостоятельными заболеваниями, а представляют собой лишь синдром основного заболевания

5. Эпидемиология

По данным ВОЗ в 2001 году хронические заболевания печени были причиной 1,4 млн смертей, включая 796 тыс. случаев смерти от цирроза и 616 тыс.- от рака печени. Как минимум 20% этих смертей связывают с вирусом гепатита С( ВГС).Его распространенность составляет 170 млн человек. Приблизительно у 2 млрд человек во всем мире ( т.е у одной трети мировой популяции) имеются серологические маркеры НВV- инфекции, из них маркеры хронической инфекции – у 350 млн.

6. Эпидемиология

В республике Беларусь также отмечен неуклонный рост заболеваемости хроническими вирусными гепатитами с 8,8 на 100 тыс населения до 26,34 в 2005 году. Анализ возрастной структуры заболевших показывает ,что наиболее поражаемыми возрастными группами являются подростки и взрослые от 15 до 40 лет, их удельный вес в РБ составляет 75%. Даже при использовании современных методов диагностики в 5-25% случаев природа острых и хронических гепатитов остается нераспознанной

7. Вирусные гепатиты

Идентифицированы и детально охарактеризованы 6 типов вирусов, способных вызывать гепатиты у людей : А,В,С,D,Е, G. Ими вызываются 90% всех случаев гепатитов, тогда как для 10% заболеваний, напоминающих вирусные гепатиты, этиологические агенты пока не установлены

8. Вирусные гепатиты различаются по:

механизму передачи возбудителей длительности инкубационного периода тяжести протекания заболевания способности давать осложнения и переходить в хроническую форму

9. Вирусные гепатиты

Вирусы гепатитов А и Е вызывают только острые заболевания Вирусы В,С и D – острые и хронические формы гепатитов. Хронические формы часто прогрессируют с развитием циррозов печени и печеночно-клеточного рака, которые определяют инвалидизацию и смертность в этой группе инфекций. Хронический гепатит D прогрессирует с исходом в цирроз печени чаще и быстрее, чем гепатит С. Хронический гепатит В по частоте прогрессирования занимает промежуточное положение

10. С учетом эпидемиологических особенностей выделяют две группы вирусных гепатитов

1. Вирусные гепатиты с парентеральным (кровяно-контактным) механизмом передачи: гепатиты В, C, D, G и ТТV. Характерно хроническое течение заболевания и вирусоносительство2. Вирусные гепатиты с энтеральным (фекально-оральным) механизмом передачи: гепатиты А, Е и F. Возбудители передаются пищевым, водным и контактными путями.

12. Диагностика

Различные виды острых и хронических гепатитов не имеют патогномоничных характеристик клинического течения и гистологической картины поражения печени

13. Основа лабораторной диагностики вирусных гепатитов

знания об их возбудителях и репликации информация о появлении и исчезновении маркеров инфицирования современные иммунохимические и молекулярно- биологические методы детекции антигенов, антител и нуклеиновых кислот

14. Диагностика

Лабораторная идентификация этиологического агента важна : для определения прогноза заболевания при количественном определении вирусных нуклеиновых кислот – для оценки эффективности специфической противовирусной терапии

15. Сравнительная характеристика гепатотропных вирусов

Виру с А (HAV) Семейство Род Picornaviridae Hepatovirus B (HBV) Hepadnaviridae C (HСV) Flaviviridae Геном 1Н + РНК Orthohepadna- 2Н циркулярная virus ДНК 1Н Hepacivirus нефрагментиро - ванная + РНКВирус Семейство D (HDV) Е (HЕV) Род Не классифицирован Caliciviridae Hepacivirus F Фактически не изучен (HFV) G Flaviviridae Hepacivirus (HGV) TTV Не классифицирован, похож на парвовирусы Геном Кольцевая 1Н +РНК 1Н нефрагментиров анная + РНК 1Н нефрагментиров анная + РНК 1Н ДНК

17. Гепатит А

ВГА не имеет наружной оболочки, но состоит из наружной белковой капсулы, или капсида, содержащего внутри положительную одноцепочную РНК, который действует в качестве матрицы для выработки вирусных белков внутри клетки-хозяина. Лабораторная диагностика ГА основана на выявлении маркеров вируса ГА – антигена ВГА, антител (анти-ВГА класса IgМ и IgG ), а также РНК ВГА

18. Специфические маркеры гепатита А

19. Специфические маркеры гепатита А

РНК НВА. Выявляется в сыворотке, фекалиях, воде, пищевых продуктах методом ПЦР. Выявление в сыворотке коррелирует с максимальным уровнем антител. Обнаружение РНК в стуле указывает на инфицированность больного, в воде и пищевых продуктах – на зараженность вирусом.

20. Специфические маркеры гепатита А

Антигены ВГА выявляются ИФА в фекалиях через 10-20 дней после инфицирования, в самом начале разгара болезни могут быть обнаружены только у 15-20% больных.

21. Специфические маркеры гепатита А

Выявляются ИФА в сыворотке или плазме в начале заболевания. Максимальная концентрация в течение нескольких недель, отсутствие их в разгаре болезни позволяет исключить гепатит А. Наличие IgG при отсутствии IgМ указывает на перенесенную в прошлом болезнь IgG.

22. Специфические маркеры гепатита А

После выздоровления IgG обнаруживаются пожизненно и рассматриваются как показатель иммунной защиты против гепатита А. Сейчас определяют количественно для оценки динамики поствакцинального иммунного ответа

23. Специфические маркеры гепатита А

Антитела к ВГА класса М - выявляются ИФА и РИА в сыворотке или плазме в начале болезни независимо от наличия или отсутствия клинических симптомов. Титр Ат быстро нарастает, максимальная концентрация через 1,5-6 мес.после начала болезни, через год после выздоровления уже не обнаруживаются

24. Специфические маркеры гепатита А

Интерпретация. Вывление IgМ указывает на острую болезнь и позволяет проводить серологическую дифференциацию: обнаружение IgМ и IgG указывает на острую инфекцию. При перенесенном в прошлом заболевании отсутствуют IgМ, но обнаруживаются IgG.

25. Лабораторная диагностика гепатита Е (ГЕ )

При постановке диагноза ГЕ необходимо принять во внимание несколько диагностических аргументов: наличие у больного симптомокомплекса острого, и предположительно инфекционного гепатита надежное исключение этиологического участия вирусов ГА и ГВ, основанное на отрицательных результатах серологических тестов - анти-ВГА класса IgM и анти-НВс класса IgM

26. Лабораторная диагностика гепатита Е (ГЕ )

тщательный анализ данных эпидемиологического анамнеза, включая указания на недавние выезды в эндемичные регионы исследование (по возможности) фекалий больного на присутствие частиц вируса ГЕ методом иммуноэлектронной микроскопии, ПЦР

27. Лабораторная диагностика гепатита Е (ГЕ )

Существуют диагностические методы, основанные на применении иммунофлюоресцирующих антител (МФА) для определения антигена ВГЕ в фекалиях и иммуноферментного анализа (ИФА) для определения антител к ВГЕ - анти-ВГЕ класса IgM и IgG.

28. Лабораторная диагностика гепатита Е (ГЕ )

Наличие анти-ВГЕ класса IgM с высокой частотой определяются в сыворотках больных ГЕ в острой стадии заболевания и в период ранней реконвалесценции выявление анти-ВГЕ класса IgG свидетельствуют о перенесенной в прошлом ГЕ - инфекции Для диагностики ГЕ определяют также РНК ВГЕ

29. Острый гепатит Е. Специфические маркеры

РНК вируса. Появляется в крови через 2-3 недели после заражения, вирусемия длится около 2 недель и свидетельствует о факте инфекции IgМ появляются после заражения через 3-4 недели и исчезают через несколько месяцев, свидетельствуют об острой фазе болезни

30. Острый гепатит Е. Специфические маркеры

IgG преобладают на стадии выздоровления с нарастанием титра до высоких значений в течение нескольких месяцев. Наличие только IgG без IgМ не является подтверждением диагноза гепатита Е на данный момент. Диагноз выставляется только при одновременном обнаружении обоих классов иммуноглобулинов. Неясно, предохраняют ли IgG от повторного заражения?

31. Вирусный гепатит ни А ни Е

У части больных с типичными симптомами вирусного гепатита не удается выявить специфические маркеры известных гепатитов. Возможная этиологическая роль гепатита G, трансфузионного вируса ТТV в возникновении ни А ни Е не подтвердилась. Возможно, это вирус SEN.Он обнаружен у 92% больных трансфузионным гепатитом ни А ни Е. SEN характеризуется хронизацией, фекально-оральный путь передачи редок.

32. Лабораторная диагностика гепатита В

основана на выявлении специфических для ГВ антигенов и соответствующих антител в крови, а также вирусных нуклеиновых кислот. Основными тестами являются: НВ sAg - анти-НВ s анти-НВс класса Ig М и IgG НВе Ag - анти-НВе ДНК ВГВ

33. В составе вириона HBV есть четыре основных антигена:

HBsAg - поверхностный (superficial) антиген. HBcAg - сердцевинный антиген (соr-антиген) HBeAg (антиген е) - локализован в сердцевине вириона и циркулирует в крови в свободном виде или в виде комплекса с антителом анти-HBe HВxAg (оболочечный) - расположен вблизи оболочки вириона. Его роль в патогенезе изучается

34. Поверхностный антиген - HBsAg - существует в виде трех морфологически различных вариантов:

Поверхностный антиген - HBsAg существует в виде трех морфологически различных вариантов: суперкапсид цельного вириона в виде частиц диаметром 20 нм, имеющих сферическую форму в виде нитей длиной 230 нм

35. Сочетание лабораторных маркеров при различных стадиях / формах вирусного гепатита В

36. Специфические маркеры гепатита В без D- агента.

НВV ДНК выявляется ПЦР, означает вирусемическую стадию процесса и свидетельствует о высокой репликативной активности. При о.гепатите быстро нарастает в течение инкубационного периода, достигая максимума в начале периода разгара. Обнаружение ДНК свыше 5-6 мес после заболевания – неблагоприятный признак ( хронизация процесса).

37. Специфические маркеры гепатита В без D- агента

– поверхностный антиген, самый ранний маркер, появляющийся еще в инкубационном периоде. При о.течении процесса циркулирует 5-6 мес., свыше этого времени- хронизация процесса. Определяют методом ИФА. HBsAg

38. Специфические маркеры гепатита В без D- агента

Если HBsAg+, то образец перепроверяется в 2 параллельных пробах. Если результат вновь положительный хоть в одной пробе – первично положительный образец ( скрининговое исследование).Затем этот образец исследуют подтверждающим тестом с нейтрализующим компонентом. Если результат отрицательный – у обследуемого отсутствует гепатит В, но полностью диагноз гепатита В не исключают.

39. Специфические маркеры гепатита В без D- агента

1.наличие сероконверсионного окна 2.инфекция может быть латентной 3.чувствительность тест-системы недостаточна.

40. Специфические маркеры гепатита В без D- агента

Обнаружение антител является или показателем иммунитета к гепатиту В или иммунного ответа на вакцинацию. Если после вакцинации, то титр к HBs Ag нарастает постепенно и при этом не образуются антитела к HBс – антигену. AntiHBs.

41. Специфические маркеры гепатита В без D- агента

HBс Ag- сердцевинный антиген. Является сильным иммуногеном и вызывает образование специфических антител. Эти антитела появляются через 1,5 – 2 мес.с начала периода разгара и могут циркулировать годами. Могут быть единственным маркером - перенесенного гепатита В - стадии серологического окна между исчезновением HBsAg и появлением к нему антител

42. Специфические маркеры гепатита В без D- агента

HBсМ- особая роль, т.к. появление их подтверждает о.период гепатита В. Обнаружение их важно, когда 1.специфическая диагностика гепатита В проводится поздно, т.е. HBs Ag в крови уже отсутствует 2. у больного есть клиника острого гепатита при наличии установленного хронического гепатита- низкий титр HBсМ ( подтверждение суперинфекции)

43. Специфические маркеры гепатита В без D- агента

3. антитела к HBs могут быть после вакцинации, НВс G являются маркерами перенесенной инфекции 4. НВс G могут присутствовать в стадии серонегативного окна 5. Ат к HBsAg в 15% случаев могут вообще не появиться 6. в течение 6 лет после о.гепатита В у пятой части HBs Ag людей антитела к HBsAg могут исчезнуть, а антитела к HBс Ag остаются пожизненно.

44. Специфические маркеры гепатита В без D- агента

Ат НВеAg. Мнение о наличии антител ,как благоприятном исходе заболевания неоднозначно. При о.гепатите В благоприятное прогностическое значение имеет сероконверсия,т.е. исчезновение НВеAg и появление антител к нему, особенно при проведении терапии.Неоднозначность интерпретации является следствием открытия дефектного вируса, имеющего мутацию в зоне генома- прекормутанты.Они не могут синтезировать НВеAg,но при инфекции в крови длительно обнаруживаются к нему антитела. Этот вариант гепатита является хроническим, протекает длительно,бессимптомно,и эти периоды характеризуются обострением с вирусемией и некротическими изменениями в печени.

46. Маркеры репликации вируса

положительные результаты определения ДНК HBV в ПЦР HBeAg анти-НВс IgМ HBsAg

47. состояние после вакцинопрофилактики

ДНК-, HBsAg-, а-НВс(М)-,HBeAg-, a-HBs+, а-НВе-, a-HBc(G)-

48. анти-HBs выявляются:

у реконвалесцентов, после вакцинации, после введения препарата иммуноглобулина, содержащего анти-HBs. анти-HBs не определяются: при ОГВ, на ранней стадии разрешения вирусного гепатита В.Aнти-HBc класса G обнаруживаются: у больных ОГВ при молниеносных формах инфекции у хронических больных у носителей HBsAg у реконвалесцентов у перенесших в прошлом инфекцию, которая завершилась элиминацией вируса Aнти-HBc класса G не выявлются: на ранних стадиях ОГВ после вакцинации против гепатита В и пассивной иммунизации

50. Предикторы хронизации инфекции

Высокие уровни ДНК ВГВ в сыворотке крови на начальной стадии инфекции Высокие концентрации HBsAg и HBeAg на начальной стадии инфекции Персистенция HBsAg (>6 месяцев) и НВеAg (>10 недель)

51. Предикторы хронизации инфекции

Анти-HBs не появляются после перенесенной инфекции Персистенция анти-HBs IgМ (>2 месяцев. Инфекция, вызванная HBeAgнегативным мутантом вируса Наличие иммунодефицита (первичного, вторичного) у инфицированных

52. острый гепатит В

ДНК+, HBsAg+ a-HBc(M)+ HBeAg+,a-HBs-, а-НВе a-HBc(G)-

53. ранняя фаза разрешения гепатита В

ДНК-, HBsAg а-НВс(М)-, HBeAg a-HBs-, а-НВе a-HBc(G)+

54. стадия реконвалесценции после гепатита В

ДНК-, HBsAg а-НВс(М)-, HBeAg a-HBs+, a-HBe+/ a-HBc(G)+

55. здоровое носительство

HBsAg+, а-НВс(М) HBeAg-, a-HBs-/+ а-НВе-, a-HBc(G)+

56. Последовательность тестирования на маркеры В-инфекции

1. HBsAg 2. анти-НВс IgМ 3.НВе-Ag 4. анти-HBs тотальные 5. анти-НВс тотальные

57. Лабораторная диагностика гепатита Д (ГД

Вирус гепатита Д (ВГД) – это дефектный вирус, содержащий одно-спиральную РНК, которому для репликации необходимо помощь вируса ГВ для синтеза оболочечных белков, состоящих из HBsAg, который используется для инкапсуляции генома ВГД. ВГД не принадлежит ни к одному из известных семейств вирусов животных, по своим свойствам ВГД наиболее близок к вироидам и сателлитным вирусам растений.

58. D- вирусная инфекция. Специфические маркеры

РНК – определяют ПЦР, обнаружение свидетельствует об активности процесса и коррелирует с максимумом некротических процессов в печени. Тест нужен при наблюдении больных хроническим гепатитом. НDV Ag-выявляют ИФА, РИА, иммуноблотом. Обнаружение антигена указывает на активную репликацию вируса в тканях печени.

59. D- вирусная инфекция. Специфические маркеры.

Ат НDV М –являются маркерами активной инфекции. При о.гепатите В с D-агентом эти антитела исчезают из кровотока в течение 2 мес.с начала инфекции. При суперинфекции циркулируют месяцами. Ат НDV G являются маркерами перенесенного гепатита D,обнаруживаются в крови многие месяцы.

60. Острый гепатит В с D-агентом. Специфические маркеры.

Лабораторная диагностика: выявление HBsAg, НВсМ, НDV М ,которые циркулируют на протяжении всего заболевания. Коинфекция (одновременное инфицирование вирусом гепатита В и D).

61. Острая D-суперинфекция вирусоносителя гепатита В

К специфическим маркерам относятся : HBsAg ,НDV М ,НDV G при отсутствии НВсМ.

62. Вирусный гепатит G

Не вызывает стойкого иммунного ответа , и серологические тесты не используются для диагностики. Единственный метод – обнаружение РНК вируса.

63. Лабораторная диагностика гепатита С (ГС)

Открытие возбудителя ГС стало возможным благодаря методам молекулярной биологии в 1989-1991 гг. Сначала путем клонирования был получен из сыворотки больных с гепатитом “ни-А, ни-В” вирусный геном, а затем был установлена и структура самого вируса. Геном вируса ГС (ВГС) представлен однонитчатой позитивной РНК, состоящих из 10 000 нуклеотидных оснований, образующих регионы, которые кодируют три структурных белка (С, Е1, Е2) и пять неструктурных (NS2, NS3, NS4, NS5).

64. Лабораторная диагностика гепатита С (ГС)

Особенностью ВГС является чрезвычайно высокая гетерогенность его генома. Анализ нуклеиновых кислот РНК-ВГС различных изолятов выявил существенные отличия в их первичной структуре. На основании этих данных была построена классификация ВГС, разделяющая их на варианты ( их 6-9) и субтипы- генотипы, одни из которых присутствуют во всех регионах мира, а другие только в отдельных странах.

65. Гепатит С

Отличительная особенность – значительная изменчивость с образованием множества одновременно существующих, иммунологически различающихся антигенных вариантов – квазивидов. Квазивиды – генетически близкородственные варианты одного и того же изолята ВГС, которые возникают в результате мутаций в ходе репликации вируса в организме - хозяина.

66. Гепатит С

В Дальнейшем образование квазивидов в течение всего периода заболевания приводит к ускользанию от иммунного ответа, а также к формированию резистентности к противовирусным препаратам и персистенции ВГС.

67. Специфические маркеры гепатита С

РНК- определяют методом ПЦР, подтверждает факт активной инфекции. Количественное определение важно для оценки эффективности противовирусной терапии. Выявление РНК – установление диагноза гепатита С в случае серонегативности. Обнаружение РНК вируса гепатита С является основанием для постановки диагноза у пациентов с иммуносупрессией.

68. Определение антител к HCV: интерпретация результатов

В острой фазе гепатита С через 2-3 недели после появления анти-HCV-IgM к С-белку в сыворотке крови начинают выявляться антиHCV IgG к С-белку. При этом не удается определить анти-HCV-IgG к неструктурным (NS) белкам. Латентная фаза гепатита С характеризуется наличием анти-HCV-IgG как к структурным, так и неструктурным белкам при отсутствии анти-HCV-IgM.

69. Определение антител к HCV: интерпретация результатов

В фазе реактивации при сохранении анти-HCV-IgG к С-белку и NS-белкам вновь начинают определяться антиHCV-IgM В сыворотке крови реконвалесцентов могут длительное время присутствовать анти-HCV-IgG к С-белку при отсутствии анти-HCV-IgM

70. Специфические маркеры гепатита С

АтНВс определяют методом ИФА. Диагностически значимыми являются IgG,т.к. нет данных за большую значимость IgМ.Обнаружение IgG говорит о контакте пациента с вирусом и обнаруживается у больных о. и хр. гепатитом. У 5% больных хроническим гепатитом С РНК может обнаруживаться при отсутствии антител

71. Специфические маркеры гепатита С

При скрининговом обнаружении антител IgG методом ИФА образцы должны быть исследованы в 2 параллельных пробах. Если хоть 1 образец дает положительный результат, то образец считают первично положительным. Для диагностики гепатита С ИФА является подтверждающим тестом.

ppt-online.org

6. Ознакомиться с особенностями серологического метода лабораторной диагностики вирусных гепатитов.

Гепатит А

Антигены HAV

в фекалиях – в конце инкубационного периода и до начала первых клинических проявлений

Анти-HAVIgM

свидетельствует о наличии текущей или недавней инфекции

Гепатит Е

Анти-HЕV IgM

в острой фазе и в период реконвалесценции

Анти-HЕV IgG

в острой фазе и в период реконвалесценции

Гепатит В

HBsAg

первый маркер инфицирования, может быть маркером интегративной инфекции, результатом которой может быть первичный рак печени и тогда в крови начинает определяться НВх антиген.

HBcAg

выявляется только в ядрах гепатоцитов

HBeAg

маркер инфекционности (циркулирует только при наличии HBsAg) – выявление свидетельствует о активной репликации вируса. Выявление его через 2 мес от начала заболевания говорит о хронизации процесса

Анти-HBsIg

маркер перенесенной инфекции.

Анти-HBcIgM

выявляется раньше всего при остром гепатите В и является единственным маркером в фазу «окна»

Анти-HBcIgM + ДНК вируса + ДНК-полимеразная активность

говорит о активном патологическом процессе в печени

Анти-HBcIgG

маркер перенесенного инфицирования

Анти-HBeIg

маркер завершенной репликации вируса

Гепатит С

Сывороточные маркеры инфицирования – суммарные антитела анти-HCV

Анти-HСc

ранние маркеры инфицирования

Анти-HCVIgM

свидетельствуют о репликативной активности вируса, а снижение титра этих антител свидетельствует о благоприятном течении болезни

РНК HCV в сыворотке

виремия:

1. транзиторная (острый гепатит с последующим выздоровлением)

2. персистирующая (хронический гепатит С)

3. прерывающаяся (повторное выявление)

Гепатит D

Коинфекция

HDVAg, анти-HDVIgM, РНК вируса

в желтушный период

анти-HDVIgG

начиная с 1-2 мес от появления желтухи

+ Маркеры гепатита В (HBsAg, HBeAg, Анти-HBcIgM, ДНК вируса )

Суперинфекция

анти-HDVIgG, анти-HDV IgM

в высоком титре

+ снижение титра HBsAg, снижение титра (или исчезновение) Анти-HBcIgM

Стойкое увеличение титра HDV Ig

маркер хронического гепатита D

Гепатит G

РНК вируса

при остром гепатите G (определяется в течение 6 мес).

Антитела к оболочечному белку Е2

(не ранее чем через 5 мес с момента инфицирования).

Задача. В крови больного желтухой обнаружены следующие серологические маркеры:

studfiles.net


Смотрите также